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DTT（二硫蘇糖醇）的作用2023/01/31: DTT（二硫蘇糖醇）的作用DTT即DL-Dithiothreitol，中文名為二硫蘇糖醇。分子式為C4H10O2S2，分子量為154.25，。常用還原劑，有抗氧化作用。DTT和巰基乙醇相比，作用相似，但DTT的刺激性氣味要小很多，毒性也比巰基乙醇低很多。而且DTT比巰基乙醇的濃度低7倍時(shí)，兩者效果相近。DTT的特性：DTT是一種很強(qiáng)的還原劑，其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)（含二硫鍵）的構(gòu)象穩(wěn)定性。它的氧化還原電勢(shì)在pH為7時(shí)為-0.33伏。由于容易被空氣氧化，因此DTT的穩(wěn)定性較差；但

大鼠Bcl-2試劑盒選型和使用時(shí)要注意些什么？2023/01/09: 大鼠Bcl-2試劑盒的產(chǎn)品選型要注意這幾點(diǎn)：1、是檢測(cè)抗體還是抗原。（1）檢測(cè)抗原常用于檢測(cè)抗原的方法是非競(jìng)爭(zhēng)性的雙抗體夾心法，其次是競(jìng)爭(zhēng)法，但競(jìng)爭(zhēng)法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難;特別是檢測(cè)微生物的抗原，因?yàn)槠湫铇?biāo)記抗原，對(duì)于某些抗原很難做到甚至是不可能的。在競(jìng)爭(zhēng)法中，沒(méi)標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起，許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì)（例如糞便），可影響elisa結(jié)果。（2）檢測(cè)抗體檢測(cè)抗體種類(lèi)常用的方法是檢測(cè)抗體種類(lèi)的捕獲法，這個(gè)方法用于檢測(cè)特異性IgG,IgA盒IgM。這個(gè)方法的是因相捕獲的抗體

凍存過(guò)的全血為什么不建議再拿來(lái)做ELISA實(shí)驗(yàn)2023/01/09: 很多ELISA實(shí)驗(yàn)新手客戶都會(huì)咨詢(xún)我司技術(shù)能否把全血提取出來(lái)放-70℃條件保存，等實(shí)驗(yàn)開(kāi)展了（比如一個(gè)月左右的時(shí)間）再離心全血取血清或者血漿做ELISA實(shí)驗(yàn)？這種做法我司技術(shù)都是持反對(duì)建議的。與此同時(shí)，也是明確要求我司銷(xiāo)售人員在與客戶售前溝通時(shí)建議老師全血樣本提取好了應(yīng)該及時(shí)離心出血清或者血漿。并要求-70℃條件下保存，如果一個(gè)月左右可以開(kāi)展實(shí)驗(yàn)可以-20℃保存，期間不能反復(fù)凍融。至于凍存后的全血不可以再提取血清、血漿樣本來(lái)做elisa的具體原因如下：1.全血凍存后解凍，用常規(guī)離心方式提取血清仍

酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）基本原理2023/01/03: 一、基本原理1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測(cè)定的文章，使得1966年開(kāi)始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是：①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同

常用中性紅染色液的濃度及作用2022/12/27: 不同濃度中性紅染色液的區(qū)別中性紅(Neutralred)，學(xué)名“3-氨基-7-甲氨基-2-甲基吩嗪鹽酸鹽”，深綠色、棕色或淺黑色粉末。溶解度為水4.0%，無(wú)水乙醇1.8%，乙二醇yi醚3.75%，乙二醇3.0%；幾乎不溶于二甲苯，其水溶液或乙醇溶液呈紅色是細(xì)胞活體染色和酸堿性指示劑的一種堿性吩嗪染料。細(xì)胞染色原理：中性紅是一種弱堿性pH指示劑，變色范圍pH6.4～8.0之間（由紅變黃）。在中性或微堿性環(huán)境中，植物的活細(xì)胞能大量吸收中性紅并向液泡中排泌，由于液泡在一般情況下呈酸性反應(yīng)，因此，進(jìn)入液

科博瑞淺談PCR試劑盒的使用2022/12/20: PCR檢測(cè)步驟1.將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；2.待測(cè)樣本與步驟1所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。其中步驟1為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上

科博瑞平板計(jì)數(shù)簡(jiǎn)便方法2022/12/14: 細(xì)菌計(jì)數(shù)細(xì)菌細(xì)胞計(jì)數(shù)是建立或監(jiān)測(cè)細(xì)菌生長(zhǎng)速度、確定種群倍增時(shí)間所必需的。細(xì)菌培養(yǎng)物可以通過(guò)測(cè)定活細(xì)胞數(shù)來(lái)確定，活細(xì)胞數(shù)是每mL的菌落形成單位數(shù)(CFU/mL)，或者通過(guò)使用分光光度計(jì)測(cè)量600nm處的光密度（OD600）來(lái)間接分析細(xì)胞總數(shù)。必須指出的是，細(xì)菌的生長(zhǎng)速度和培養(yǎng)要求在不同菌種之間可能有很大的差異，因此很難用同一種方式量化所有的細(xì)菌。下面，科博瑞提供了一個(gè)關(guān)于如何確定細(xì)菌細(xì)胞計(jì)數(shù)的一般程序?；铙w計(jì)數(shù)：為了計(jì)數(shù)細(xì)菌懸浮液中的CFU，從活躍的細(xì)菌液體培養(yǎng)物中吸取一定的體積在適當(dāng)?shù)囊后w介質(zhì)中

大鼠（Rat）蘇氨酸（Threonine）ELISA檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介2022/12/09: 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被蘇氨酸（Threonine）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并徹di洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的蘇氨酸（Threonine）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3

小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒操作注意事項(xiàng)2022/12/07: 小鼠麥胚凝集素elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)，已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育，洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。1、靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2、特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3、重復(fù)性:板內(nèi)、板間變

植物細(xì)胞色素P450（CYP450）試劑盒使用說(shuō)明書(shū)，科博瑞品牌2022/12/07: 檢測(cè)范圍：96T25IU/L-800IU/L使用目的：本試劑盒用于測(cè)定植物組織，細(xì)胞及其它相關(guān)樣本中細(xì)胞色素P450（CYP450）活性。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中植物細(xì)胞色素P450（CYP450）水平。用純化的植物細(xì)胞色素P450（CYP450）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞色素P450（CYP450），再與HRP標(biāo)記的細(xì)胞色素P450（CYP450）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的

科博瑞告訴你酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用的規(guī)則2022/12/02: 酶聯(lián)免疫試劑盒是較普遍常用的藥物殘留檢測(cè)方法，與儀器分析技術(shù)相比具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確和靈敏度高等特點(diǎn)，但對(duì)實(shí)驗(yàn)操作條件的要求比較嚴(yán)格。實(shí)驗(yàn)條件主要由實(shí)驗(yàn)室的操作環(huán)境和操作人員的操作熟練程度兩方面組成，但ELISA試劑盒對(duì)實(shí)驗(yàn)室操作環(huán)境的要求是幾種藥物殘留檢測(cè)方法中相對(duì)較低的。由于大部分的試驗(yàn)操作步驟都是由實(shí)驗(yàn)人員來(lái)完成的，人為的誤差相對(duì)嚴(yán)重一些。本人結(jié)合幾年的工作實(shí)踐介紹一下進(jìn)行ELISA操作的時(shí)候應(yīng)該注意的問(wèn)題。酶聯(lián)免疫試劑盒操作的通用的規(guī)則1.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性，可以使用蒸餾水和電子天

大鼠（Rat）瓜氨酸化組蛋白H3（CH3）ELISA檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介2022/11/28: 檢測(cè)原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被瓜氨酸化組蛋白H3（CH3）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并ce底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的瓜氨酸化組蛋白H3（CH3）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），計(jì)算樣品濃度。樣品收集、處理及保存方法1.血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3

原代細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、凍存、復(fù)蘇、分離、鑒定2022/11/25: 原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)一、組織塊直接培養(yǎng)法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結(jié)締組織，血液等雜物。2、用手術(shù)剪將組織剪切成1mm3左右的小塊，再用Hank's液洗三次。3、將組織塊轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶，并貼附于瓶底面。4、輕輕將培養(yǎng)瓶翻轉(zhuǎn)，瓶底朝上，向瓶?jī)?nèi)注入適量的培養(yǎng)液，將培養(yǎng)瓶放置在37℃恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。5、放置待組織小塊貼附后，將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)平放，使組織浸入培養(yǎng)液中（勿使組織漂起），37℃繼續(xù)培養(yǎng)。二、消化培養(yǎng)法1、取材，用Hank's液洗滌三次，并剔除脂肪，結(jié)締組織，血液等雜物。2、用手

LCMS檢測(cè)合格譜圖的標(biāo)7個(gè)標(biāo)準(zhǔn)是什么？2022/11/22: LCMS合格譜圖的標(biāo)準(zhǔn)：1、UV譜圖主峰的保留時(shí)間應(yīng)大于2T0(進(jìn)樣峰時(shí)間)，并小于全部運(yùn)行時(shí)間的4/5。2、UV譜圖的吸收波長(zhǎng)以客戶指ding波長(zhǎng)為準(zhǔn)（一般為220nm），弱紫外樣品（紫外吸收在220nm是波谷，MS信號(hào)相對(duì)較強(qiáng)）可用ELSD譜圖交貨或以客戶要求為準(zhǔn)。3、UV譜圖主峰吸收一般應(yīng)高于100mau。對(duì)信噪比良好的樣品，可以適當(dāng)降低峰高要求到高于50mau，當(dāng)所有可見(jiàn)的UV峰都積分后仍合格的，可認(rèn)為合格。4、UV譜圖中，主峰理論塔板數(shù)在10000以上（即峰寬小于0.5分鐘），峰對(duì)稱(chēng)因

淺談保存胎牛血清的正確的方式2022/11/21: 胎牛血清從上市以來(lái)一直備受爭(zhēng)議，從廠家，價(jià)格，鑒別到產(chǎn)品質(zhì)量，產(chǎn)品如何正確的保存都是些大問(wèn)題，今天科博瑞生物就帶領(lǐng)大家一起來(lái)學(xué)習(xí)如何正確的使用和保存血清。標(biāo)準(zhǔn)血清的鑒別方法：血清凝固析出的淡黃色透明液體，如將血液自血管內(nèi)抽出，放入試管中，不加抗凝劑，血液迅速凝固，形成膠凍。其周?chē)龀鲋S色透明液體即為血清，也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過(guò)程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)化成維蛋白塊，所以血清中無(wú)纖維蛋白原，這一點(diǎn)是與血漿的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中，血小板釋放出許多物質(zhì)。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化，并隨

植物組織樣本的前處理2022/11/18: 一、勻漿介質(zhì)一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測(cè)定指標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,目的是保持樣本的等滲環(huán)境。二、組織勻漿的制備1、取組織塊（0.2g～0.5g）最少可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱(chēng)重，放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:4的比例加入4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎組織塊。3、勻漿的方式：手工勻漿，機(jī)器勻漿。①手工勻漿：左手持勻漿管將下端插入盛有冰水混合物的

常用的培養(yǎng)基耗材和細(xì)胞接種量2022/11/17: 我們常用的細(xì)胞培養(yǎng)容器有T25培養(yǎng)瓶、10cm培養(yǎng)皿、多孔板等，尤其是是多孔板，需要加多少培養(yǎng)基，很多同學(xué)不太確定，下面小編為大家整理了常見(jiàn)的培養(yǎng)容器的加液體積和建議接種量：耗材名稱(chēng)規(guī)格培養(yǎng)面積(cm^2)加液體積（ml）建議接種量(×10^6）T25培養(yǎng)瓶底面積25cm^22551.25T75培養(yǎng)瓶底面積75cm^27515~303.75T175培養(yǎng)瓶底面積175cm^217535~408.756cm培養(yǎng)皿直徑6cm21.251.0610cm培養(yǎng)皿直徑10cm60.88~103.0415cm培

細(xì)胞傳代操作步驟2022/11/16: 一、貼壁細(xì)胞傳代（以一個(gè)T25瓶為例）1、吸出原培養(yǎng)液；2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞，吸出PBS丟棄；3、加入1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞，放入培養(yǎng)箱消化；4、消化時(shí)間跟據(jù)細(xì)胞特性有所不同，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯分離變圓，側(cè)立培養(yǎng)瓶細(xì)胞可以滑落時(shí)可終止消化，全程不要拍打培養(yǎng)瓶；5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫落并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞，使之盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液，這時(shí)可以在顯微鏡看下；6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm（約25

常用的分子生物學(xué)基本技術(shù)簡(jiǎn)介2022/11/15: 核酸分子雜交技術(shù)由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測(cè)方法的靈敏性，它已成為分子生物學(xué)中常用的基本技術(shù)，被廣泛應(yīng)用于基因克隆的篩選，酶切圖譜的制作，基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測(cè)等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下（適宜的溫室度及離子強(qiáng)度等）可按堿基互補(bǔ)原成雙鏈。雜交的雙方是待測(cè)核酸序列及探針（probe）,待測(cè)核酸序列可以是克隆的基因征段，也可以是未克隆化的基因組DNA和細(xì)胞總RNA。核酸探針是指用放射性核素、生物素或其他活性物質(zhì)標(biāo)記的，能與特定的核酸序列發(fā)生特異性

上海科博瑞生物凍存的原代細(xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng)2022/11/11: 上?？撇┤鹕飪龃娴脑?xì)胞應(yīng)該如何培養(yǎng)，我司以客戶為核心，以產(chǎn)品質(zhì)量求生存，以售后服務(wù)求信譽(yù)，原代細(xì)胞通過(guò)不斷改進(jìn)來(lái)提高效率，絕不以犧牲品質(zhì)作為代價(jià)。原代細(xì)胞是指從機(jī)體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以?xún)?nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱(chēng)為原代細(xì)胞培養(yǎng)。原代細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細(xì)胞株（系）研究、DNA，RNA和遺傳學(xué)研究等。一、凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出，注意保護(hù)手和眼睛。2.將凍存管快速的放入37℃水浴中，輕輕握住并

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