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2022
04-22

大鼠海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)和傳代流程
體外培養(yǎng)大鼠海馬神經(jīng)元細胞細胞周期有限；建議使用與procell配套的專用生長培養(yǎng)基和正確的操作方法進行培養(yǎng)，以保證細胞處于理想培養(yǎng)狀態(tài)。procell實驗室分離的大鼠海馬神經(jīng)元細胞采用胰蛋白酶消化、神經(jīng)元特異性培養(yǎng)基培養(yǎng)、篩選結(jié)合化學試劑抑制制備。細胞總數(shù)約為5×105個細胞/瓶。大鼠海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)和傳代流程（請嚴格按照無菌操作）：1、從原培養(yǎng)瓶中吸出培養(yǎng)基，用PBS緩沖液潤濕細胞兩次，加入2-3ml025%胰蛋白酶消化細胞（注意消化時間，一般控制在1-2min內(nèi)）；2、在顯微鏡下觀察消化
2022
04-21

收到293 [HEK-293]細胞后如何操作？
293[HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞形成的永生化細胞，293[HEK-293]細胞包含并表達轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出，293[HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293[HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293[HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋
2022
04-14

直播答疑 | 普諾賽3月直播：細胞系由來及鑒定問題
在普諾賽3月30日開播的細胞培養(yǎng)直播課堂中，有很多同學提出各種疑問。我們篩選出具有代表性的問題，并作了詳細解答。01動物細胞怎么鑒定？要根據(jù)實驗的目的以及細胞類型進行選擇。如果是人源細胞系，并且有文獻或數(shù)據(jù)庫公布對應細胞信息，則進行STR鑒定即可；如果使非人源的細胞系，可以進行種屬鑒定，并且附加一個研究方向相關的指標進行驗證，部分小鼠細胞也可以做STR鑒定，但目前數(shù)據(jù)庫不*，很多都沒有匹配數(shù)據(jù)。對于原代細胞，如果能夠確保取材無誤，僅進行特異性指標方面的檢測就可以了，方法可采用免疫熒光、流式檢測、
2022
04-12

胎牛血清的儲存和使用都是有講究的
胎牛血清是實驗室常用的天然培養(yǎng)基，但不能直接使用。無論是存儲還是使用，都比較復雜。血清的常規(guī)處理是熱鈍化，即置于56°水浴中30分鐘；其目的是使血清中的補體成分和一些未知的細胞生長抑制分子失活。實驗表明，大多數(shù)細胞不需要經(jīng)過正確處理后的熱滅活血清。經(jīng)過這樣的處理，血清只能輕微促進細胞的生長，或者根本沒有作用。即使是高溫處理通常也會影響血清的質(zhì)量并降低細胞的生長速度。熱處理過的血清會顯著增加沉淀物的形成。在倒置顯微鏡下觀察時，這些沉淀物，如“小黑點”，常常使研究人員誤認為血清被污染了，而將血清置于
2022
04-07

雞卵泡顆粒細胞分離、培養(yǎng)實驗步驟
雞卵泡顆粒細胞分離、培養(yǎng)實驗步驟：A.翅下靜脈注射2mLEDTA-2Na(W/V，2%)溶液處死母雞，新潔爾滅消毒液浸泡消毒5min，打開腹腔，剪取整個卵巢，小心剝離卵泡(以8-15g為最佳)，置于裝有PBS緩沖液的無菌培養(yǎng)皿中；B.用加有雙抗的PBS緩沖液沖去血污，漂洗3次；將漂洗干凈的卵泡移入裝有預冷PBS緩沖液的平皿中，剝凈卵泡外膜、結(jié)締組織及血管網(wǎng)；C.用手術刀在卵泡表面劃一道1-2cm長的切口(動作要快)，釋放卵黃，用PBS緩沖液將剩余的卵黃液漂洗干凈，剩下的卵泡膜即為：基膜和卵泡顆粒
2022
04-06

大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的分離方法主要有這兩種
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞是在哺乳動物骨髓基質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的細胞亞群，具有多種分化潛能，可分化成骨、軟骨、脂肪、神經(jīng)和成肌細胞。它們不僅機械地支持骨髓中的造血干細胞(HSC)，而且還分泌多種生長因子（如IL-6、IL-11、LIF、M-CSF和SCF）來支持造血。常用的MSC分離方法主要有全骨髓法和密度梯度離心法。全骨髓法是根據(jù)干細胞在低血清培養(yǎng)基中的優(yōu)勢特性，定期更換溶液去除非貼壁細胞，從而達到純化和擴增MSC的目的。密度梯度離心是根據(jù)骨髓中各細胞成分的不同比例，分離出單核細胞進行貼壁培養(yǎng)，兩者本質(zhì)上沒有
2022
03-31

3月高分文獻精選：普諾賽助力各類疾病研究
截止至2022年3月，使用普諾賽產(chǎn)品發(fā)表的文獻，總發(fā)表篇數(shù)達3000+，單篇最高影響因子達39.849。本期我們精選5篇影響因子在15分以上的文獻，進行分享。其中，使用普諾賽產(chǎn)品MC3T3-E1細胞和HOS細胞發(fā)表于知-名期刊MaterialsToday的文章，單篇影響因子高達31.041。正是因為越來越多研究團隊的選擇，我們對產(chǎn)品質(zhì)量從未松懈，期待為您帶來更好的體驗！高分文獻精選01用于骨肉瘤臨床治療和組織再生的新型光熱控制多功能支架Anovelphotothermallycontrolled
2022
03-28

大鼠海馬神經(jīng)元細胞的使用需要特別注意這些
從海馬體中分離出大鼠海馬神經(jīng)元細胞；海馬體又稱海馬回、海馬區(qū)和大腦海馬體，主要負責記憶和學習。海馬神經(jīng)元是海馬體中的主要細胞。它們的主要功能是參與近期記憶、情緒和內(nèi)臟功能的調(diào)節(jié)。它們是阿爾茨海默病、癲癇等疾病的主要病變之一。海馬體屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在神經(jīng)系統(tǒng)疾病的學習、記憶、情緒反應和病理生理變化中起重要作用。此外，海馬體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)干細胞的主要聚集區(qū)。它具有高度有序的層狀結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元分布相對獨立的特點。邊界比較清晰，材料容易獲取。因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究人
2022
03-23

收到THP-1細胞后如何操作？
THP-1細胞對乳汁珠和激活的紅細胞有吞噬作用，無表面和胞質(zhì)免疫球蛋白。THP-1細胞可以用佛波醇、TPA誘導單核細胞分化。1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與Procell技術支持聯(lián)系。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進行觀察。3.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。4.可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移
2022
03-21

RAW 264.7收貨后如何操作？
RAW264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；sIg-、Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。RAW264.7細胞不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性。RAW264.7細胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖，并且可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導RAW264.7細胞分解紅血球，但對腫瘤靶細胞無作用。1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與Procell技術支持聯(lián)系。
2022
03-15

收到大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞后如何操作？
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多
2022
03-14

拿到雞卵泡顆粒細胞應執(zhí)行以下操作
雞卵泡顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞，它們的增殖和分化直接影響卵巢功能活動，如卵泡的生長起始、發(fā)育、排卵、黃體形成和類固醇激素的分泌，細胞呈圓形或橢圓形。細胞總數(shù)約5×105個/瓶，細胞純度高達80%以上，不含HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。從雞卵泡組織中分離出雞卵泡顆粒細胞；成熟卵泡是卵巢的結(jié)構(gòu)成分之一。卵泡腔大，卵丘明顯。卵泡的子宮內(nèi)膜細胞靠近卵泡的顆粒層，它們之間有基底膜。子宮內(nèi)膜細胞呈多角形，胞質(zhì)清晰，核圓形。細胞間可見許多毛細血管。外膜細胞位于最外層，多呈梭形，與周
2022
03-03

小鼠單核巨噬細胞都有哪些作用？
小鼠單核巨噬細胞細胞株源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤。sIg-,Ia-抗原、Thy-1.2表面抗原陰性。此細胞株不分泌可檢測到的病毒顆粒，XC斑點形成試驗陰性?？梢园嬛行约t并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖。可以抗體依賴性地分解綿羊紅血球與腫瘤靶細胞。LPS或PPD處理2天可誘導分解紅血球但對腫瘤靶細胞無作用。小鼠單核巨噬細胞具有較廣泛的造血活性，可刺激中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞的增殖、分化和功能活性。主要用于腫瘤化療或放療引起的粒細胞減少。用于異體或自體骨髓移植，加速骨髓功能恢復，亦用
2022
03-03

收到細胞后如何操作？
1.首先，觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與Procell技術支持聯(lián)系。2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進行觀察。3.仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。4.可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中，備用；細胞傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。5.
2022
02-21

幾種常見的細胞污染類型及處理方法
凡混入細胞培養(yǎng)環(huán)境中對細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物都應視為細胞污染，細胞污染不能*被消除，但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴重性。本文將簡要介紹幾種常見的細胞污染類型及處理方法。常見細胞污染類型細胞細菌污染特征：大小在0.5~5μm，比動物細胞小很多。多呈球狀或桿狀，形態(tài)規(guī)則，分布均勻；增殖速度快，一般細菌污染后48~72小時爆發(fā)式增殖；營養(yǎng)消耗快，培養(yǎng)基很快變黃，變渾濁；鏡下觀察有明顯的定向運動。處理方法：輕度細菌污染可用10X雙抗清洗處理，重度細菌污染建議消殺后丟棄。細胞真菌污染特征：
2022
02-18

細胞凍存與復蘇的技術原理和操作步驟
細胞凍存與細胞復蘇，是細胞培養(yǎng)過程中的常見工作。細胞凍存，是指將細胞貯存在超低溫環(huán)境中，使細胞暫時“冬眠”的技術，在需要的時候再進行復蘇。細胞復蘇，是把凍存在-80℃冰箱或液氮中的細胞快速解凍，并使細胞重新恢復生長的技術。本文將為大家介紹細胞凍存與復蘇的技術要點和操作步驟。細胞凍存篇凍存原則細胞凍存原則為“慢凍”，即讓細胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。如果直接將細胞懸液放在超低溫下快速冷凍，細胞會受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護劑（如DMSO、甘油）和在凍存盒中添加的異丙醇，都起到程序性降
2022
02-16

細胞長得慢、傳代不易貼壁，該怎么挽救？
各類細胞產(chǎn)品是我們做實驗研究的基礎，一支小小的細胞，關乎我們各種實驗的成功與否，細胞的”小事情“，在實驗中都是”大事情“，如果你的細胞出現(xiàn)生長緩慢、不貼壁等情況，那你可要注意了，這就是細胞狀態(tài)不好的信號，要及時“挽救”，不然很有可能細胞就瀕臨死亡。問題一：細胞生長緩慢細胞長得慢是細胞培養(yǎng)過程中比較常見的問題，一般來說，細胞活力和濃度一直是細胞健康的標志，細胞長得慢的話，活力和濃度可能都會直線下降。造成細胞生長緩慢的主要原因及解決方法：1，新配置的培養(yǎng)基以及換了新的血清，細胞不適應;解決方法：最好
2022
02-11

Annexin V流式檢測細胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法
示例：細胞用FITC-AnnexinV/PI熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒檢測效果圖。Jurkat細胞用1μM喜樹堿(Camptothecin)(左)或未加藥(右)處理4h，F(xiàn)ITC-AnnexinV/PI熒光雙染細胞凋亡檢測試劑盒染色后，流式細胞儀熒光檢測。AnnexinV-FITC單陽性細胞為早期凋亡細胞，AnnexinV-FITC和PI染色雙陽性的細胞為壞死細胞或者晚期凋亡。PI單染色陽性位裸核細胞。實測數(shù)據(jù)可能會因細胞類型、細胞凋亡情況，檢測儀器等的不同而存在差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。流式檢測
2022
02-10

細胞傳代時間經(jīng)驗技巧
養(yǎng)細胞的小伙伴們都知道，細胞一定要傳代，因為細胞在培養(yǎng)過程中不斷的繁殖，數(shù)量也隨之增加，然而培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶的空間有限，增殖受到抑制，所以必須將一部分細胞移至別的培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶，讓細胞有足夠生長空間。細胞傳代也不僅僅是為細胞安一個更大的“家”，更重要的，是使細胞系或細胞株進一步增殖，這樣，我們才能有足夠的細胞做各種各樣的實驗。但是，對于傳代的時間，很多小伙伴都掌握不好，因為對于不同的細胞來說，判斷能否開始傳代的標準略有不同，今天，我們就主要來聊一下，細胞傳代的時間問題。什么時候進行細胞傳代?對于貼
2022
01-20

如何避免胎牛血清沉淀物的產(chǎn)生
胎牛血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么？①纖維蛋白，它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物，可以達到1-2mm，可以用肉眼觀察到。②磷酸鈣，它也是常見的一種沉淀物，通常會使血清出現(xiàn)渾濁，并且在37℃培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點，這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動，因此經(jīng)常被誤認為是微生物污染。③膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì)，它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。關于細胞生長，我們的試驗以及經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細胞培養(yǎng)，我們的客戶以及其它血清生產(chǎn)商也證明了這一點。那么如何避免胎牛血清沉

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