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2023
03-24

細(xì)胞學(xué)堂 | 貼壁細(xì)胞6大培養(yǎng)難題原因和解決方法
貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)要貼附于培養(yǎng)（瓶）器皿壁上，細(xì)胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展，然后開(kāi)始有絲分裂，并很快進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。貼壁細(xì)胞因其培養(yǎng)過(guò)程較為繁瑣，所以培養(yǎng)時(shí)更容易出現(xiàn)問(wèn)題。以下總結(jié)了貼壁細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的6種問(wèn)題，并詳細(xì)介紹原因和解決方法，若培養(yǎng)時(shí)遇到這些情況，可參考對(duì)應(yīng)解決方法處理。01傳代后細(xì)胞全部飄起解決方法：檢查所使用的培養(yǎng)基的顏色是否偏紫色（如圖1），檢查瓶蓋是否透氣，不透氣瓶蓋是否被擰松。圖1.培養(yǎng)基顏色偏紫通常培養(yǎng)基偏堿，顏色就會(huì)偏紫，主要是因?yàn)榕囵B(yǎng)基里的酚紅指示劑遇酸變黃、遇堿變紫，培養(yǎng)基
2023
03-21

胎牛血清要怎么用才能有理想效果？
胎牛血清是一種常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)基添加劑，可以提供生長(zhǎng)因子、細(xì)胞黏附蛋白、酶等多種必需物質(zhì)，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。在使用時(shí)，需要掌握以下幾個(gè)方面的使用方法。1、正確儲(chǔ)存胎牛血清這是一種易變質(zhì)、易受污染的生物制品，需要在儲(chǔ)存和使用過(guò)程中注意保持其質(zhì)量和純度。儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)放置于-20℃以下的冰箱中，避免熱量和濕度影響其質(zhì)量。使用前應(yīng)先將血清緩慢解凍，并進(jìn)行消毒處理，以確保其純度和質(zhì)量。2、正確添加在細(xì)胞培養(yǎng)基中添加血清時(shí)，需要根據(jù)細(xì)胞類型和培養(yǎng)基配方等因素，選擇正確的添加量和添加時(shí)間。添加量一般為10%~20
2023
03-17

細(xì)胞學(xué)堂 | 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)異常解決方法
懸浮細(xì)胞大多胞體呈圓形，不貼于支持物上，呈懸浮生長(zhǎng)，容易大量繁殖。懸浮細(xì)胞培養(yǎng)雖比貼壁細(xì)胞少了消化的步驟，但培養(yǎng)起來(lái)同樣不易。有碎片、形態(tài)改變、生長(zhǎng)速度慢、細(xì)胞貼壁……每一種異常都牽動(dòng)著我們的心。因此本期細(xì)胞學(xué)堂整理了懸浮細(xì)胞收貨和培養(yǎng)過(guò)程中的常見(jiàn)問(wèn)題，并針對(duì)各個(gè)問(wèn)題列出解決辦法，帶你逐個(gè)擊破！運(yùn)輸常見(jiàn)問(wèn)題及處理方法1碎片多處理方法：懸浮細(xì)胞受到運(yùn)輸或者其他因素導(dǎo)致細(xì)胞損傷時(shí)，容易產(chǎn)生細(xì)胞碎片，碎片可通過(guò)低速離心（800~1000rpm，3min）去除；低速離心同時(shí)也會(huì)丟失細(xì)胞，故細(xì)胞密度低的時(shí)
2023
03-17

如何培養(yǎng)原代小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞？
小鼠骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有多向分化潛能的干細(xì)胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。那么它是如何培育的呢？1、材料成年小鼠4只、胎牛血清、L-DMEM、胰蛋白酶、PBS、Percool細(xì)胞分離液、雙抗、8%碳酸氫鈉溶液。2、儀器倒置顯微鏡、CO2恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺(tái)、生物顯微鏡、低溫高速離心機(jī)、無(wú)菌操作臺(tái)、血球計(jì)數(shù)板、6孔培養(yǎng)板。3、方法骨髓收集→Percoll密度梯度離心法分離純化骨髓間充質(zhì)
2023
03-14

人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞被廣泛應(yīng)用于組織工程
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為一個(gè)研究熱點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于再生醫(yī)學(xué)和組織工程（特別是在骨、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)等疾病的領(lǐng)域）。作為細(xì)胞模型被應(yīng)用于增殖、移植和分化研究，以及體外的免疫反應(yīng)的鑒定。這是一種能分化成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和軟骨細(xì)胞的多能干細(xì)胞。其具有強(qiáng)大的增殖能力和免疫調(diào)節(jié)能力，因此被廣泛應(yīng)用于組織工程，細(xì)胞治療和基因治療。人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞取自成人的骨髓，其擁有強(qiáng)大的自我更新能力并具有多向分化潛能。干細(xì)胞(BMSC)分離自骨髓；骨髓是機(jī)體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃
2023
03-07

大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的研究方法包括哪些？
海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng)，在學(xué)習(xí)、記憶、情緒反應(yīng)及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細(xì)胞聚集區(qū)。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞是神經(jīng)系統(tǒng)中的一個(gè)重要細(xì)胞類型，其在學(xué)習(xí)、記憶和認(rèn)知等過(guò)程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。這是一種典型的多極神經(jīng)元，其細(xì)胞體呈梭形，具有多個(gè)樹(shù)突和一個(gè)軸突。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的樹(shù)突分為原樹(shù)突和側(cè)樹(shù)突兩種，原樹(shù)突通常比側(cè)樹(shù)突長(zhǎng)，且數(shù)量較少。軸突起始于細(xì)胞體的一個(gè)區(qū)域，向外延伸并分支成多個(gè)終末分支，形成神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的研究方法主要包
2023
03-05

雞卵泡顆粒細(xì)胞的使用
雞卵泡顆粒細(xì)胞的用途：該細(xì)胞分離自雞卵泡組織；雞卵泡顆粒細(xì)胞培養(yǎng)可保持雞卵泡顆粒細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞卵泡顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于雞卵泡顆粒細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。雞卵泡顆粒細(xì)胞的使用：1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。2、待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。3、細(xì)胞傳代：1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一
2023
02-16

細(xì)胞學(xué)堂 | 脫落的293T細(xì)胞如何恢復(fù)正常
293T[HEK-293T](人胚腎細(xì)胞)是293[HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。該細(xì)胞廣泛應(yīng)用于病毒包裝，因其比較容易轉(zhuǎn)染，也是常用的表達(dá)研究外源基因的細(xì)胞株。圖1.293T正常生長(zhǎng)圖片該細(xì)胞因?yàn)橘N壁松散，若購(gòu)買常溫細(xì)胞，收貨時(shí)有可能大部分細(xì)胞脫離培養(yǎng)瓶壁，顯微鏡下找不到細(xì)胞，只能看到肉眼可見(jiàn)的細(xì)胞團(tuán)，是正?，F(xiàn)象（如圖2）。圖2.293T收貨聚團(tuán)（圖由客戶提供，僅供學(xué)習(xí)參考）參照以下方式處理即可恢復(fù)正常：1收到細(xì)胞后請(qǐng)先置于培養(yǎng)箱中穩(wěn)定2
2023
02-14

L-谷氨酰胺對(duì)機(jī)體具有多方面的作用
L-谷氨酰胺對(duì)機(jī)體具有多方面的作用：1.增長(zhǎng)肌肉，主要是通過(guò)以下幾方面來(lái)實(shí)現(xiàn)：為機(jī)體提供必需的氮源，促使肌細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成；通過(guò)細(xì)胞增容作用，促進(jìn)肌細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化；刺激生長(zhǎng)激素、胰島素和睪酮的分泌，使機(jī)體處于合成狀態(tài)。2.谷胺酰胺有強(qiáng)力作用。增加力量，提高耐力。運(yùn)動(dòng)期間，機(jī)體酸性代謝產(chǎn)物的增加使體液酸化。谷氨酰胺有產(chǎn)生堿基的潛力，因而可在一定程度上減少酸性物質(zhì)造成的運(yùn)動(dòng)能力的降低或疲勞。3.免疫系統(tǒng)的重要燃料，可增強(qiáng)免疫系統(tǒng)的功能。谷氨酰胺具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用，它是淋巴細(xì)胞分泌、增殖及其功能
2023
02-03

細(xì)胞學(xué)堂 | RAW 264.7誘導(dǎo)極化及鑒定大全
RAW264.7（小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞）是破骨細(xì)胞、炎癥研究最-常用的體外模型之一，被廣泛用于研究風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松癥、骨質(zhì)溶解、牙周炎等骨骼疾病。極化方式巨噬細(xì)胞是具有異質(zhì)性的一類免疫細(xì)胞，在體內(nèi)外不同環(huán)境影響下可極化為不同表型參與機(jī)體生理、病理反應(yīng)。從激活方式上分為經(jīng)典激活的巨噬細(xì)胞M1和選擇性激活的巨噬細(xì)胞M2。1M1型分化細(xì)菌和脂多糖（LPS）可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞向M1型分化，產(chǎn)生促炎細(xì)胞因子，抵抗病原入侵，但也會(huì)造成機(jī)體損傷，在實(shí)驗(yàn)中可采用2.5ng/mLIFN-γ和200ng/
2022
12-13

文獻(xiàn)解讀 | J Exp Med發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞抑制肝纖維化的作用及機(jī)制
肝炎病毒感染、酒精性或非酒精性脂肪性肝炎和膽道梗阻都會(huì)造成慢性肝損傷，使肝臟發(fā)生病理性的纖維化，進(jìn)而誘發(fā)肝纖維化的發(fā)生，最終導(dǎo)致肝硬化和肝功能衰竭。在肝纖維化進(jìn)程中，活化的肝星狀細(xì)胞在肝臟中沉積是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)。同時(shí)，其他研究人員發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞通過(guò)直接接觸殺死早期激活或衰老的肝星狀細(xì)胞或誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞凋亡，表現(xiàn)出獨(dú)-特的抗纖維化能力。??前列腺素是由花生四烯酸經(jīng)過(guò)環(huán)氧合酶和前列腺素合成酶的連續(xù)反應(yīng)而得到的具有生物活性的脂類，其中前列腺素E2在免疫調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮著雙重作用，這種雙重作用的產(chǎn)生
2022
12-06

神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞是什么？
神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞簡(jiǎn)介：神經(jīng)母細(xì)胞瘤是幼兒時(shí)期常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，由于其發(fā)生部位隱匿，并且無(wú)特殊臨床表現(xiàn)，早期診斷極為困難，再加上神經(jīng)母細(xì)胞瘤惡性程度高，故生存率很低，3年生存率僅為30%左右。神經(jīng)母細(xì)胞瘤是起源于神經(jīng)嵴的交感神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤，可發(fā)生在身體的任何部位。主要發(fā)生于腎上腺髓質(zhì)、腹膜后、后縱隔、盆腔和頸交感神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。其惡性程度高，經(jīng)常在短期內(nèi)就可以突破包膜，侵犯周圍組織和器官，并且發(fā)展迅速，早期就出現(xiàn)血行和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。神經(jīng)母細(xì)胞瘤也有自然消退傾向或轉(zhuǎn)化為良性神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤，是自然消退率最高的
2022
11-16

大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞都可以有哪些用途？
大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞都可以有哪些用途？1、本產(chǎn)品僅能用于科研。2、本產(chǎn)品未通過(guò)直接用于活體動(dòng)物和人的審核。3、本產(chǎn)品未通過(guò)用于活體診斷的審核。大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的運(yùn)輸和保存視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近。1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,
2022
11-11

如何區(qū)分血漿和血清的區(qū)別
血漿和血清的區(qū)別：1、成分血漿：正常人從血管抽出血液加抗凝劑，經(jīng)離心沉淀，下面部分為血細(xì)胞，上面淡黃色部分就叫血漿，里面有第5、第8凝血因子及纖維蛋白原。血漿的化學(xué)成分中，水分占90-92%，其他10%以溶質(zhì)血漿蛋白為主，并含有電解質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)素、酶類、激素類、膽固醇和其他重要組成部分。血漿蛋白是多種蛋白質(zhì)的總稱，用鹽析法可將其分為白蛋白、球蛋白和纖維蛋白原三類。血清：正常人從血管抽出的血液不加抗凝劑，自然凝固，經(jīng)離心沉淀，下面紅色部分為血細(xì)胞部分，上面淡黃色部分就叫血清，里面沒(méi)有第5、第8凝血因子
2022
11-03

雞卵泡顆粒細(xì)胞生理結(jié)構(gòu)是怎樣的？
雞卵泡顆粒細(xì)胞分離自PMSG誘導(dǎo)后3天的雞卵巢組織，顆粒細(xì)胞是卵巢的主要功能細(xì)胞，其增殖與分化直接影響著卵泡的生長(zhǎng)啟動(dòng)、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動(dòng)。細(xì)胞形狀呈圓形或橢圓形。細(xì)胞采用機(jī)械分離法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105個(gè)/瓶，細(xì)胞純度可達(dá)80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。初級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞為單層；次級(jí)卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開(kāi)又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓，著色深，細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長(zhǎng)突起伸入放射帶的凹
2022
11-02

普諾賽小鼠STR鑒定服務(wù)
小鼠STR鑒定小鼠STR鑒定原理同人源STR鑒定一樣，通過(guò)檢測(cè)種屬特異性的18個(gè)STR位點(diǎn)來(lái)識(shí)別細(xì)胞。對(duì)于目前數(shù)據(jù)庫(kù)中已收錄的78種小鼠細(xì)胞，可通過(guò)匹配度判斷細(xì)胞的正確性，對(duì)于未收錄的細(xì)胞，可以通過(guò)STR鑒定位點(diǎn)出峰情況判定細(xì)胞是否為小鼠細(xì)胞，同時(shí)可以判斷是否有其他小鼠細(xì)胞以及人源細(xì)胞的污染。貨號(hào)服務(wù)項(xiàng)目?jī)r(jià)格（元/株）服務(wù)周期詳情JSFW10小鼠STR鑒定1000收到樣本后，2-4個(gè)工作日點(diǎn)擊咨詢服務(wù)項(xiàng)目提供小鼠細(xì)胞18個(gè)位點(diǎn)STR鑒定，增加兩個(gè)人源位點(diǎn)用于檢測(cè)常用人源細(xì)胞的交叉污染。既能判斷是
2022
10-27

普諾賽人源細(xì)胞STR鑒定服務(wù)
人源細(xì)胞STR鑒定據(jù)統(tǒng)計(jì)，國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室有20%~30%的細(xì)胞株被錯(cuò)誤辨識(shí)和交叉污染。NIH等權(quán)-威機(jī)構(gòu)以及大部分的雜志期刊已將細(xì)胞系鑒定作為基金申請(qǐng)和文章發(fā)表的前提條件，人源細(xì)胞STR鑒定已經(jīng)被ATCC等細(xì)胞庫(kù)組織作為金標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用于細(xì)胞系鑒定。STR（ShortTandemRepeat，短串聯(lián)重復(fù)序列）基因位點(diǎn)由長(zhǎng)度為3-7個(gè)堿基對(duì)的短串連重復(fù)序列組成，這些重復(fù)序列廣泛存在于人類基因組中，可作為高度多態(tài)性標(biāo)記，被稱為細(xì)胞的DNA指紋，其可通過(guò)PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）來(lái)檢測(cè)。STR基因座位上的等位基
2022
10-27

普諾賽種屬鑒定服務(wù)
種屬鑒定細(xì)胞的交叉污染包括種屬內(nèi)細(xì)胞的交叉污染以及種屬間的交叉污染，根據(jù)2021年發(fā)布實(shí)施的《哺乳動(dòng)物細(xì)胞交叉污染檢測(cè)方法通用指南》規(guī)定，STR鑒定等方法可應(yīng)用于種屬內(nèi)細(xì)胞的交叉污染，而無(wú)法檢測(cè)種屬間細(xì)胞的交叉污染。為解決人及小鼠以外種屬細(xì)胞無(wú)法采用STR鑒定進(jìn)行檢測(cè)，以及種屬間細(xì)胞交叉污染的問(wèn)題，普諾賽特推出細(xì)胞種屬鑒定服務(wù)。該鑒定方法采用基于CO1的PCR檢測(cè)法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度高，能夠快速準(zhǔn)確的判斷檢測(cè)細(xì)胞的種屬以及是否存在不同種屬的交叉污染。貨號(hào)服務(wù)項(xiàng)目?jī)r(jià)格（元/株）服務(wù)周期詳情JSF
2022
10-08

胎牛血清應(yīng)該如何解凍？
胎牛血清是通過(guò)剖腹產(chǎn)封閉穿刺胎牛心臟獲得的，經(jīng)過(guò)自然層析和離心，收集淺黃色透明上清液，去除血細(xì)胞、纖維蛋白和其他成分。生產(chǎn)后，采用多級(jí)高壓膜過(guò)濾技術(shù)和三級(jí)0.1微米末端微濾法進(jìn)行處理。它通常用于細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。那么，如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)損害產(chǎn)品質(zhì)量？一般來(lái)說(shuō)，未開(kāi)封的血清應(yīng)保存在-10℃至-20℃，并在產(chǎn)品規(guī)定的有效期內(nèi)使用。如果一次不能用完一瓶，建議將血清無(wú)菌重新包裝到合適大小的無(wú)菌離心管中，再放回冷凍室。胎牛血清從冷凍冰箱中取出后，先放在2~8℃的冰箱中融化，然后在室溫下*融化，或通
2022
09-30

直播答疑 | 原代細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題解決方案
原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的首-次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)，是細(xì)胞系建立的第一步。在9月22日開(kāi)播的“原代細(xì)胞常見(jiàn)問(wèn)題解決方案”課程中，有很多老師就原代細(xì)胞培養(yǎng)問(wèn)題提出了疑問(wèn)。我們篩選出部分代表性問(wèn)題，并作了詳細(xì)解答。臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞需要包被嗎？選用什么包被比較好？臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞建議包被，建議選用0.1%明膠包被，包被的細(xì)胞形態(tài)會(huì)比不包被的好看。角質(zhì)細(xì)胞需要包被嗎？角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)類似上皮細(xì)胞，營(yíng)養(yǎng)環(huán)境要求高，建議使用膠原蛋白包被。細(xì)胞原皿狀態(tài)很好，傳代后細(xì)胞邊界不清楚是什么原因？感覺(jué)虛化的很快。

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