99超碰中文字幕在线观看-天天干天天日天天舔婷婷-我看操逼的好看的女人的-日本一二三四五区日韩精品

在PCR反應體系中添加劑DMSO的作用2023/12/27

DMSO主要用于高GC含量的模板擴增，可能的機理是改善GC含量高的DNA的變形情況，降低其二級結(jié)構(gòu)，使得聚合酶在二級結(jié)構(gòu)處延伸。DMSO可以提高PCR的特異性,幫助擴增一些難擴的模板。當體系中加入DMSO時，可適當降低退火溫度。在實踐中，聚合酶鏈式反應可能因各種原因而失敗，通常表現(xiàn)為兩個問題，一是目的模板的擴增量太少，二是非目的基因擴增太多。這種情況研究人員通常會在反應體系中加入合適的添加劑進行解決。通常添加劑的作用主要是降低基因的二級結(jié)構(gòu)或者降低非特異性的啟動。下面是幾種常用的添加劑以及它們的

PCR技術(shù)的常規(guī)實驗流程步驟2023/12/19

PCR（聚合酶鏈式反應）是一種分子生物學技術(shù)，現(xiàn)在已經(jīng)被廣泛運用于臨床和實驗室，用于擴增特定的DNA片段。它的基本原理就是在體外模擬細胞內(nèi)DNA復制的條件，最終完成特定基因的體外復制。PCR實驗基本由變性、退火、延伸三個步驟完成。1.變性。變性的目的是使模板DNA雙鏈解旋成為單鏈以便與引物結(jié)合，通常給它加溫至95℃（這是Taq酶進行30個左右的循環(huán)后活力不致受到過多損失時能耐受的最高溫度）。模板的變性對PCR成功與否至關(guān)重要，第一輪循環(huán)中變性時間往往為10min，然而根據(jù)經(jīng)驗，在其他各次的循環(huán)中

胎牛血清的功能有哪些?2023/12/12

胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量最大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細胞生長必須的營養(yǎng)成份，常用于動物細胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素，基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白，能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到解毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑，使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活，保

細胞爬片（玻片）的用前準備2023/12/06

細胞爬片又名玻片，是指讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，主要用于組織學，冰凍切片，細胞涂片，原位雜交等。除了在實驗中的使用，實驗前的準備也十分重要，讓我們一起來看看使用前需要做哪些準備吧！用前準備：1、蓋玻片的選擇爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細胞爬片，價格比較昂貴但是細胞貼壁牢固，拍出照片效果好；2、爬片的剪裁可根據(jù)自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小，置于6孔板、12孔板或24孔板；3、爬片的使用前處理將剪裁好的爬片，置于濃

如何鋪出均勻的細胞培養(yǎng)板？2023/11/20

細胞居中和細胞邊緣化從經(jīng)濟和高效的角度來說，需要根據(jù)實驗目的選擇不同規(guī)格的培養(yǎng)板。如在進行藥物對待測細胞半抑制率（IC50）測試時，通常使用96孔板，一方面可以設置濃度梯度；另外還可一次性測多個藥物，減少實驗誤差。收集細胞要混勻消化后的細胞一定要充分混勻，要把聚在一起的細胞團充分地吹打開，最好是單個的狀態(tài)，但同時又不能損傷細胞，可以用玻璃吸管的移液器操作。離心也很有講究，一般用1000rpm/min即可。離心力太大細胞容易抱團，然后懸浮離心后的細胞團時，先不要把所有液體都加進，一般先加2mL液體

PVDF膜的主要用途及功能2023/11/14

PVDF膜這種說法很籠統(tǒng)，因為PVDF膜有很多種，這邊簡單介紹幾種：1、水處理用PVDF膜，分為超濾膜和微濾膜兩種，主要用于污水、海水淡化等的前處理，清除大分子、細菌、泥沙等雜質(zhì)2、戶外建筑用PVDF膜，主要用戶戶外建筑的玻璃、外墻、戶外廣告牌等的保護，主要是耐老化和耐磨功能3、電池用PVDF膜，包括在燃料電池和鋰離子聚合物電池中的隔膜應用PVDF的主要性能：?機械強度與堅韌度高?防霉菌性?高耐磨性?對氣體和液體的高耐滲透性?耐熱穩(wěn)定性好?阻燃，低煙?溫度提升過程中抗蠕變性好?純度高?容易進行熔

細胞培養(yǎng)皿的用途、注意事項有哪些？2023/11/09

定義：培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細胞培養(yǎng)的實驗室器皿，由一個平面圓盤狀的底和一個蓋組成，一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類，主要為塑料和玻璃的，玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙xi材料的，有一次性的和多次使用的，適合實驗室接種、劃線、分離細菌的操作，可以用于植物材料的培養(yǎng)。用途：適用于防疫站、醫(yī)院、生物制品、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等單位，用于細菌的分離培養(yǎng)、抗菌素效價檢驗和定性檢驗分析。在農(nóng)業(yè)、水產(chǎn)等科學研究用于對種子發(fā)牙、植物、昆蟲、魚種

新手如何培養(yǎng)細胞？2023/11/06

細胞培養(yǎng)基本概念：細胞培養(yǎng)將活細胞（尤其是分散的細胞）在體外進行培養(yǎng)的方法稱為細胞體外培養(yǎng)。狹義的主要是指分離（散）細胞培養(yǎng)，廣義的還包括單（個）細胞培養(yǎng)又稱克隆，是指單個細胞通過有絲分裂形成的細胞群體。原代細胞初次培養(yǎng)。即培養(yǎng)物一經(jīng)接種到培養(yǎng)皿中就不再分割，任其生長繁殖而不更換生長器皿。傳代培養(yǎng)隨著培養(yǎng)時間的延長、細胞不斷分裂繁殖，細胞之間相互接觸會發(fā)生接觸性抑制，生長速度逐漸減慢甚至停止。培養(yǎng)皿中營養(yǎng)物逐漸不足，代謝產(chǎn)物不斷累積，不利于細胞繼續(xù)生長。在這種情況下，需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，

ELISA測定應該如何正確操作2023/10/30

ELISA測定現(xiàn)在通常為采用手工操作的以微孔板條為固相的測定模式，測定操作非常簡單，一般涉及到標本的收集保存、試劑準備、加樣、溫育、洗板、顯色、比色、結(jié)果判斷和結(jié)果報告及解釋等方面，其中任一步驟的不當都會影響測定結(jié)果，且尤以加樣、溫育和洗板等步驟為甚?，F(xiàn)分述如下。一、臨床標本的收集和保存用于ELISA測定的臨床標本最為常用的是血清（漿），有時因為特定的檢測目的，也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。目前臨床上使用血清標本測定的標志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標志物、激素、特種蛋白、細胞

影響ELISA試劑盒試驗成果的要素2023/10/26

ELISA試劑盒，即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復性好的特點，并具有操作簡潔、無放射性危害的優(yōu)點，因此多年來廣泛應用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機構(gòu)的試驗室中。影響ELISA試驗的要素有如下三方面：一、試劑盒1、抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗中空白對照OD值偏高或假陽性；2、酶結(jié)合物濃度過高，也會導致OD值假性增高。二、試驗儀器1、加樣器是否通過校正，酶免測定血清

什么是牛血清白蛋白？2023/10/23

牛血清白蛋白（BSA）是牛血清中的一種球蛋白，包含607個氨基酸殘基，分子量為66.446KDa，等電點為4.7。應用：牛血清白蛋白（BSA）在生化實驗中有廣泛的應用，例如在WB實驗中加入BSA，通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度，對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附，能減輕有些酶的變性減輕不利環(huán)境因素，如加熱、表面張力及化學因素引起的變性。測定蛋白濃度按50：1配置BCA工作液。10ulC液（蛋白標準）+90ulPBS液稀釋成0.5mg/ml的蛋白標準液。再分別以0、1、2、4、8、12、16、

離心管的作用及注意事項，有哪些？2023/10/19

一、種類：大量離心管（500mL、250mL）普通離心管（50mL、15mL）微量離心管（2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL）離心管按照底部形狀：錐形離心管，底部為錐形，是使用最多的離心管類型，平底離心管、圓底離心管離心管按照蓋子閉合方式：壓蓋離心管，以按壓方式密封的離心管，常見于微型離心管、螺旋蓋離心管，又可分為平蓋（蓋子頂部是平的）和塞蓋（蓋子頂部有塞子形狀）離心管按材料分：1、玻璃離心管：使用玻璃管時離心力不宜過大，需要墊橡膠墊，防止管子破碎，高速離心機一般不選用玻璃管。離心管蓋

ELISA（酶聯(lián)免疫吸附）原理及步驟詳解2023/10/13

1.原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發(fā)生的高選擇性高特異性識別和結(jié)合原理，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法，酶聯(lián)免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個部分組成：免疫識別，信號輸出和數(shù)據(jù)處理。2.步驟：免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體，而后利用抗體識別待測的抗原（通常是疾病的蛋白質(zhì)生物標記物，病毒，細菌等等，從復雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過氧化酶（HorseradishPeroxidase,HRP）、熒光或放射性標記的抗體通過直

PCR 成功的四大要素及注意事項2023/10/08

一、模板1.模板降解1）盡量選擇新鮮提取的模板進行PCR擴增，通過凝膠電泳檢測模板的完整性，若降解嚴重需要重新制備模板；2）模板避免反復凍融。2.模板中含有抑制DNA聚合酶活性的抑制劑1）采用離心柱法提取核酸，純化模板，消除抑制劑的干擾；2）適當減少模板量，采用梯度稀釋摸索最佳模板量；3）選用抗逆性強的DNA聚合酶。3.模板量太低1）適當增加模板量；2）模板為cDNA時，選用目的基因表達量高的組織提取高質(zhì)量RNA并選用基因克隆專用的反轉(zhuǎn)錄試劑盒得到的cDNA作為模板；3）選用靈敏度高的DNA聚合

如何正確的使用封板膜？2023/09/27

1.將封板膜貼在板子上從自封袋中取出單張封板膜，然后重新封好自封袋，以保持其中的無酶環(huán)境。保持底襯面朝上，握住封板膜，沿著切線處慢慢撕下底襯。隨后，將封板膜粘性面的一端貼在板子上，掌握好距離和角度，避免后續(xù)貼歪。貼的過程中一端貼，另一端拉住。注意：一定要戴手套●如果使用單端標簽的封板膜，則將襯紙部分除去、然后將封板膜錨固到板上，使其密封在整個板上，然后繼續(xù)除去襯紙。這種方法可以消除封板膜產(chǎn)生的卷曲和回滾?！袢绻褂脙蓚€末端標簽的產(chǎn)品，請以連續(xù)平滑的方式剝離中心襯紙。緩慢剝離內(nèi)襯可以減少卷曲。注意

細胞篩網(wǎng)的使用方法2023/09/19

細胞篩網(wǎng)（產(chǎn)品別名：細胞過濾網(wǎng)）常用于器官培養(yǎng)、組織轉(zhuǎn)運或移植，尤其適用于干細胞和原代細胞過濾，常與流式細胞儀配套使用，是流式細胞分選實驗。細胞過濾器使用堅固的尼龍網(wǎng)制作，主要分為三個篩孔型號：100um，70um，40um，可滿足不同細胞大小的過濾操作。那么怎樣才是正確的細胞篩網(wǎng)使用方法？讓我們一起來看看！使用方法：1.準備濾器：選擇一個合適的細胞篩網(wǎng)，并根據(jù)需要在濾器上加上濾紙，使其更容易使用。2.準備細胞懸液或培養(yǎng)基：將細胞懸液或培養(yǎng)基倒入容器中，并加入需要的藥物、酶、抗生素等。3.過濾細

ELISA試劑盒操作的5個方面2023/09/13

ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應留神以下5個方面。1.跟著病況的進展或由其他因素影響，某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動搖，因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中，標本恰當稀釋還可下降非特異性反響。2.加樣一般運用加液器，在ELISA試劑盒中一般有4次加樣：加標本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標本時有必要每份標本運用一支移液器吸嘴，避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時則不需更換吸嘴。3.在成批手藝檢測中，還應留神操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異，使抗原抗體反響和酶促反響時間不一

胰蛋白胨國產(chǎn)與進口的區(qū)別及特點？2023/09/11

國產(chǎn)的的胰蛋白胨是以新鮮牛肉和牛骨經(jīng)胰酶消化，濃縮干燥而成的淺黃色粉末。具有色淺、易溶、透明、無沉淀等良好的物理性狀。含有豐富的氮源、氨基酸等，可配制各種微生物培養(yǎng)基，生化制品及微生物學科研等領(lǐng)域中。進口的胰蛋白胨與國產(chǎn)的酪蛋白胨相同，也叫胰酪蛋白胨，都是采用酪蛋白為原料，經(jīng)過消化、脫色、過濾、濃縮、噴霧干燥而得到的一種淺黃色至類白色的干燥粉末。易溶于水，水溶液呈淡黃色。酪蛋白又稱干酪素是從牛奶中提取的一種營養(yǎng)價值很高的磷蛋白，是生產(chǎn)蛋白胨常用的原料。用此原料生產(chǎn)的蛋白胨，其氨基酸比較齊全，特別

使用培養(yǎng)皿的注意事項2023/09/01

培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細胞培養(yǎng)的實驗室器皿，由一個平面圓盤狀的底和一個蓋組成，是細胞實驗中常見的一種耗材。那么使用培養(yǎng)皿有哪些注意事項呢？一起來看看吧！注意事項1、培養(yǎng)皿質(zhì)地脆弱、易碎，故在清洗及拿放時應小心謹慎、輕拿輕放。2、使用完畢的培養(yǎng)皿及時清洗干凈，存放在安全、固定的位置，防止損壞、摔壞。3、使用培養(yǎng)皿的時候倒置的原因：1）防止培養(yǎng)基的水分蒸發(fā)，特別是培養(yǎng)基倒的時候如果倒的比較少的時候更容易干掉,影響微生物生長。2）防止形成的冷凝水滴落在培養(yǎng)基上造成染菌。3）倒放可以在某種程度上防止菌

超濾管的使用和注意事項2023/08/30

超濾是大分子脫鹽、濃縮的方法，重復性好，得率有保障，已經(jīng)在蛋白、抗體、病毒、核酸、囊泡等樣品制備中建立標準操作；在目前大熱的外泌體制備中也已經(jīng)成為主流方法。超濾管該如何使用？注意事項有哪些？讓我們一起來看看吧！使用方法1、預處理：新超濾管：使用前用純水浸泡，冰箱預冷10min。然后將水倒出，置于冰上預冷2-5min，加樣。舊超濾管：倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液，用純水沖洗干凈10遍（注意水流速盡量平緩，防止沖破濾膜），置于冰上預冷2-5min，加樣。2、加樣：如超濾管中有少許殘留水可將超濾管內(nèi)管倒置10