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ELISA試劑盒的應(yīng)用及操作注意事項2019/06/05

ELISA試劑盒的應(yīng)用及操作注意事項ELISA的應(yīng)用ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果，認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查，而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法

ELISA小小知識2019/05/29

ELISA小小知識如今生物科技日益突飛猛進的時代，像ELISA試劑盒產(chǎn)品五花八門品牌也眾多，讓你目不暇接，那么我們該如何選擇適合于我們科研實驗用的ELISA試劑盒呢？我們來看看ELISA常見技術(shù)指南：1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。2、ELISA實驗中為了確定*佳信號和背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按

大鼠ELISA檢測試劑盒操作說明及注意事項2019/05/22

大鼠ELISA檢測試劑盒操作說明及注意事項大鼠ELISA檢測試劑盒性能：1.靈敏度：zui小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。大鼠ELISA檢測試劑盒操作步驟：1.使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量

elisa試劑盒抗體能不能用于免疫組化？2019/05/17

elisa試劑盒抗體能不能用于免疫組化？ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。elisa試劑盒抗體一般不能用于免疫組化的，雖然說理論上這兩個都是屬于免疫反應(yīng)實驗，但是實際操作上還是有區(qū)別的。首先，ELISA的抗體一般是針對抗原蛋白的三極結(jié)構(gòu)的，所以操作一般在室溫下進行，避免高溫。而免疫組織化學(xué)的抗體是針對抗原的一級結(jié)構(gòu)的，所以要進行抗原熱修復(fù)。如果相互混用，很可能不能出結(jié)果

elisa試劑盒固相免疫測定的原理2019/05/10

elisa試劑盒固相免疫測定的原理基礎(chǔ)：抗原或抗體的固相化幾抗原或抗體的酶標(biāo)記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進行定性或定量分析。雙抗體夾心發(fā)用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測定，因此其敏感度相對高與間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBsAg的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。間接法間接法的優(yōu)點：只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。競

雞ELISA試劑盒有哪些優(yōu)點？2019/04/24

雞ELISA試劑盒有哪些優(yōu)點？雞ELISA試劑盒使用的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化，將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的方法顯現(xiàn)出來。固相吸附蛋白對錯特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才干，為了確?？乖贵w反應(yīng)的特異性，因此被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。酶可以通過共價鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成結(jié)合物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時分，被檢測靶政策中也結(jié)合了酶分子。結(jié)合在抗原抗體中的酶分

小鼠ELISA試劑盒的樣本以及處理步驟2019/04/17

小鼠ELISA試劑盒的樣本以及處理步驟1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4

豬ELISA檢測試劑盒標(biāo)本采集及保存和使用說明書2019/04/09

豬ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存：1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000xg離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8°C1000xg離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000xg離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。注：標(biāo)本溶血會影響后檢測結(jié)果，因此溶

Taq酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)細節(jié)2019/03/29

1976年Chien分離出熱穩(wěn)定聚合酶，1986年Erlich分離并純化了適于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的Tq熱穩(wěn)定性聚合酶，為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)成為實用技術(shù)奠定了基礎(chǔ)，現(xiàn)已用基因重組。日前可用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的聚合酶有多種：有從水生棲熱菌中提取的Taq酶、從嗜熱棲熱苗中獲得的Taq酶、從Litoralis棲熱球菌中分離的VENT酶、及從酸熱浴硫化裂片苗中分離的Sac酶，而以Taq酶用得廣泛。TaqDNA聚合酶分子量為94kD，75℃時酶比活性為150bs/酶分子，反應(yīng)溫度過高或過低均影響其延伸率，Taq蕾有很

elisa試劑盒常見幾種分類2019/03/22

常見elisa試劑盒1、細胞因子檢測試劑盒如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉(zhuǎn)化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等2、肝纖維化檢測ELISA試劑盒如纖維連接蛋白，透明質(zhì)酸，膠原，基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子，基質(zhì)金屬蛋白酶，層粘蛋白等等3、心肌梗塞檢測ELISA試劑盒如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應(yīng)蛋白等等4、腫瘤標(biāo)志物檢測ELISA試劑盒如腫瘤標(biāo)志物，組織多肽抗原，腫瘤相關(guān)因子，胰腺癌，直腸癌，細胞角蛋白片段，胃腸癌，鐵蛋白，糖鏈抗原，神經(jīng)特異性稀醇

小鼠6酮前列腺素6-K-PG酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項2019/03/14

小鼠6酮前列腺素6-K-PG酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項：1.保用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。2.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。3.加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。4.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。5.實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。6.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。7.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋

大鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測試劑盒處理方式及事項2019/03/08

大鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA檢測試劑盒處理方式:1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現(xiàn)采現(xiàn)用，胃液、唾液*的采集時間是空腹采集，一般隔夜尿不采集；2、采集血清時，一般要加入總體積1%的抗凝劑，采集后先室溫或4℃靜置半小時后，800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?、組織提取液、肺泡灌洗液等，采集后離心分離，800-1000rmpx5min，取上清，-20℃或4℃保存?zhèn)溆茫?、采集血漿時一般不加抗凝劑，采集后立即離心800-1000rmpx5min分離，取上清，-20℃

小鼠Ⅲ型前膠原肽PⅢNP酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存2019/01/30

小鼠Ⅲ型前膠原肽PⅢNP酶聯(lián)免疫試劑盒樣品收集、處理及保存：1.細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。2.細胞：用PBS反復(fù)洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104-106/ml左右，通過反復(fù)凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20分鐘后，以10

大鼠脂聯(lián)素ADP酶聯(lián)免疫試劑盒性能和注意事項2019/01/23

大鼠脂聯(lián)素ADP酶聯(lián)免疫試劑盒性能：1.準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。2.靈敏度：zui低檢測濃度小于（參考說明書）3.特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。4.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。5.貯藏：2-8℃，避光防潮保存。6.有效期：6個月大鼠脂聯(lián)素ADP酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項：1.保用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。2.按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。3.加入試劑的順序

大鼠克拉拉細胞蛋白CC16酶聯(lián)免疫試劑盒原理和操作步驟2019/01/16

大鼠克拉拉細胞蛋白CC16酶聯(lián)免疫試劑盒原理：1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA）用于IgG定量測定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。這一方法的基本原理是：①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，把受檢標(biāo)本（測定其中的

大鼠卵泡抑素FS酶聯(lián)免疫試劑盒儲存方式和試劑準(zhǔn)備2019/01/09

大鼠卵泡抑素FS酶聯(lián)免疫試劑盒儲存方式標(biāo)本的采集與保存：收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進行檢測的標(biāo)本，儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本，將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標(biāo)本需添加抑肽酶大鼠卵泡抑素FS酶聯(lián)免疫試劑盒試劑準(zhǔn)備1.使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫（18-25℃），試劑不能直接在37℃溶解。2.標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)

人轉(zhuǎn)移因子TF酶聯(lián)免疫試劑盒的樣本處理方法2019/01/02

人轉(zhuǎn)移因子TF酶聯(lián)免疫試劑盒樣本處理方法1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。3.尿液：用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照

人組織多肽特異性抗原TPS酶聯(lián)免疫試劑盒的操作注意事項2018/12/26

人組織多肽特異性抗原TPS酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物

大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶NE酶聯(lián)免疫試劑盒的操作步驟2018/12/20

大鼠中性粒細胞彈性蛋白酶NE酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔

大鼠脂蛋白脂酶LPL酶聯(lián)免疫試劑盒實驗原理和結(jié)果計算2018/12/18

大鼠脂蛋白脂酶LPL酶聯(lián)免疫試劑盒實驗原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠脂蛋白脂酶（LpL）水平。用純化的大鼠脂蛋白脂酶（LpL）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入脂蛋白脂酶（LpL），再與HRP標(biāo)記的脂蛋白脂酶（LpL）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的脂蛋白脂酶（LpL）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過