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吉奧藍圖(廣東)生命科學(xué)技術(shù)中心

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  • 2019

    12-28

    原代細(xì)胞和傳代細(xì)胞培養(yǎng)有哪些區(qū)別?

    一、概念不同1、原代細(xì)胞:指從機體取出后立即培養(yǎng)的細(xì)胞。有人把培養(yǎng)的第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。2、原代細(xì)胞:適應(yīng)在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。二、來源不同1、原代細(xì)胞:指直接從機體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。2、原代細(xì)胞:幼年動物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細(xì)胞。三、培養(yǎng)步驟不同1、原代細(xì)胞:將動物組織從機體中取出離散成單個細(xì)胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖。2、傳代細(xì)胞:原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過胰酶
  • 2019

    11-22

    細(xì)胞培養(yǎng)的注意事項

    原代動物細(xì)胞培養(yǎng):1、實驗材料要新鮮,從活體分離材料后要低溫保存,并盡快進行細(xì)胞分離實驗。2、無菌操作。操作時用的培養(yǎng)液,可加平時細(xì)胞培養(yǎng)液5倍含量的青鏈霉素。3、用酶法分離細(xì)胞時,注意酶液的濃度和控制消化時間。貼塊法分離細(xì)胞時,注意動作要輕柔,不要傷到細(xì)胞組織,組織塊邊緣盡量平整有利于細(xì)胞游離。4、培養(yǎng)液的選擇。不同的細(xì)胞有對培養(yǎng)液中營養(yǎng)的要求不同,根據(jù)所分離細(xì)胞的特性選擇。傳代細(xì)胞培養(yǎng):1、無菌操作2、控制消化時間3、及時關(guān)注細(xì)胞生長狀態(tài)
  • 2019

    11-17

    奶牛子宮內(nèi)膜上皮外培養(yǎng)及鑒定

    試驗采用酶消化及機械法相結(jié)合的方法培養(yǎng)奶牛子宮內(nèi)膜上皮原代細(xì)胞及傳代細(xì)胞。酶消化法采用0.1%鏈蛋白酶于4℃消化16~20h,機械法采用手術(shù)刀刮取子宮角內(nèi)膜。獲得原代分離的細(xì)胞后,采用胰蛋白酶消化法進行細(xì)胞的傳代培養(yǎng)。試驗應(yīng)用角蛋白抗體對細(xì)胞進行免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定,并對第3代奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞用MTT法繪制增殖曲線。結(jié)果顯示,細(xì)胞在相差顯微鏡下呈明顯的上皮樣細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞傳代到第8代時,仍能保持與原代細(xì)胞相似的細(xì)胞形態(tài)特征及生長狀態(tài)。同時細(xì)胞角蛋白染色陽性細(xì)胞占80%以上。試驗結(jié)果表明,應(yīng)用酶消
  • 2019

    10-17

    PD動物模型解析

    帕金森病又稱為震顫麻痹,是—種影響患者活動能力的中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性疾病,多發(fā)生于中老年以上的人群,美國APDA稱年齡小于40歲便開始患病者為年輕的帕金森病患者。圖片來源網(wǎng)絡(luò),侵刪主要臨床表現(xiàn)為靜止性震顫、肌強直和運動徐緩等。隨著*人口老齡化,解決PD這一世紀(jì)頑癥成為了各國學(xué)者必須面對的任務(wù)。目前對PD的研究越來越受到關(guān)注。無論研究其發(fā)病機制還是探索新的治療方法都離不開PD動物模型。常采用的PD動物模型大體上可以分為三類:機械損傷PD模型、神經(jīng)毒素?fù)p傷模型、基于PD相關(guān)基因的基因模型。今天小歐就為大
  • 2019

    09-20

    h1299細(xì)胞和a549細(xì)胞的區(qū)別

    h1299細(xì)胞來源于一個淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?;颊呓邮芰顺跗诜暖?。細(xì)胞均一性的部分缺失p53蛋白,并缺少p53蛋白表達。細(xì)胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白,而不合成促胃液釋放肽(GRP)。a549細(xì)胞,該細(xì)胞系是1972年由GiardDJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的,源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂;角蛋白陽性。一、H1299細(xì)胞種屬人肺癌細(xì)胞形態(tài)上皮樣細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI1640(w/oHepes)胎牛血清,10%傳代方法消化3-5分鐘。
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