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2022
04-26

二維梯度PCR與普通PCR儀有什么區(qū)別？
PCR儀是廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等領(lǐng)域的一款儀器設(shè)備，在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用頻率很高，而隨著科技的發(fā)展以及行業(yè)實(shí)際工作的需要，二維梯度PCR等開始出現(xiàn)，而用戶在進(jìn)行了解的時(shí)候，往往不知道梯度PCR儀與普通PCR儀的區(qū)別，因此給他們的選擇帶來(lái)了一定的困難，因此下面就來(lái)簡(jiǎn)單介紹一下二維梯度PCR與普通PCR儀有什么區(qū)別？先需要說明的是PCR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制，而梯度PCR儀的梯度也要做一下介紹，梯度實(shí)際上是指PCR時(shí)退火溫度條件可以
2022
04-21

帶你全面了解移液器
移液器是實(shí)驗(yàn)室用于取樣和加液常用的精密量器，是量出式量器，分定量和可調(diào)兩種類型。移液器是指一支移液器的容量是固定的，而可調(diào)移液器的容量在其標(biāo)稱容量范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào)。移液器使用時(shí)的注意事項(xiàng)(1)吸取液體時(shí)要緩慢均勻，避免液體濺到移液桿上。(2)在調(diào)整取液量的旋鈕時(shí)，不要用力過猛，并應(yīng)注意計(jì)數(shù)器顯示的數(shù)字不要超過其可調(diào)范圍。(3)移液器在取樣加樣過程中，應(yīng)注意吸液嘴不能觸及其他物品，以免被污染。(4)用完后，要將移液器調(diào)至最大量程，以免壓縮彈簧導(dǎo)致彈簧不能恢復(fù)。(5)移液器在使用完畢后應(yīng)卸掉槍頭后放置
2022
04-19

核酸提取儀使用注意事項(xiàng)
核酸提取儀主要由磁套、磁棒、進(jìn)給板和步進(jìn)電機(jī)四個(gè)部分組成；磁套位于磁棒的下方且對(duì)齊形成一對(duì)互相配合使用，進(jìn)給板位于磁套的下方；磁套、磁棒和進(jìn)給板分別連接一個(gè)步進(jìn)電機(jī)；磁套和磁棒的步進(jìn)電機(jī)控制磁套和磁棒的上下相對(duì)運(yùn)動(dòng)，與進(jìn)給板相接的步進(jìn)電機(jī)控制進(jìn)給板的左右水平運(yùn)動(dòng)。在步進(jìn)電機(jī)的驅(qū)動(dòng)下，分別進(jìn)行上下、水平運(yùn)動(dòng)以實(shí)現(xiàn)磁珠的收集、釋放、轉(zhuǎn)移進(jìn)而完成核酸的提取過程，轉(zhuǎn)移的是磁珠、而非液體，提高了樣品回收率，另外由于磁套的保護(hù)，磁棒并不直接接觸樣品防止了污染的可能發(fā)生。核酸提取儀使用注意事項(xiàng)：1)儀器接地為
2022
04-12

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀使用的基本步驟
實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀技術(shù)的原理：體外核酸擴(kuò)增，加熱使雙鏈DNA解開螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶，dNTPs（脫氧核糖核苷三磷酸），Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性→退火一引物延伸”過程至25-40個(gè)循環(huán)，呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)大待測(cè)樣本中的核酸拷貝數(shù)。簡(jiǎn)單的說，PCR儀就是利用DNA聚合酶對(duì)特定基因做體外或試管內(nèi)的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶進(jìn)行專一性的連鎖復(fù)制。目前常用的技術(shù)，可以將一段基因復(fù)制為原來(lái)的一百億至一千億倍。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
2022
04-06

程序降溫盒使用經(jīng)驗(yàn)分析
程序降溫盒的使用方法直都搞不明白，覺得是不是應(yīng)該把程序降溫凍存盒先從-80度移到室溫放一段時(shí)間(細(xì)胞剛開始還沒凍的時(shí)候就是室溫)，然后把細(xì)胞放進(jìn)去，再一起移到-80度，這樣才能實(shí)現(xiàn)程序降溫呢?時(shí)間使用長(zhǎng)了，感覺里面的液體是不是異丙醇啊，使用時(shí)間長(zhǎng)了會(huì)不會(huì)揮發(fā)或變質(zhì)什么的，要不要添加或維護(hù)一下呢，還有有一只降溫盒因不小心給傾斜讓液體流出了部分，要補(bǔ)充嗎？程序降溫盒使用經(jīng)驗(yàn)分析：經(jīng)驗(yàn)1：凍存盒外表面有刻度的吧，異丙醇液面要高于底線。4a.C*D8Y&P9A，y凍存盒肯定是先放在室溫，然后放進(jìn)去細(xì)胞，
2022
03-23

三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?
一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣既節(jié)約時(shí)間，也節(jié)約經(jīng)費(fèi)。三槽梯度PCR儀你真的了解嗎?加熱模塊：上孔與孔之間的溫度一致性對(duì)于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗(yàn)證試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，溫度驗(yàn)證檢測(cè)通?？捎糜冢涸诘葴啬Ｊ较孪鄬?duì)于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；
2022
03-16

程序降溫盒使用小技巧
程序降溫盒在沒有酒精或任何液體的情況下,能確保在低溫冰箱中樣品的降溫速率為-1℃/分鐘。它們可以運(yùn)用于各種細(xì)胞類型，包括干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系。這對(duì)于大多數(shù)需要培養(yǎng)的細(xì)胞系來(lái)說是非常理想的。已經(jīng)通過干細(xì)胞，原代細(xì)胞和細(xì)胞系的使用，證明了提高使用者的工作效率及保存細(xì)胞的存活率。通過采用絕緣材料和*的微對(duì)流設(shè)計(jì)來(lái)保證平均降溫速率為-1℃/min，而不是使用酒精或異丙醇等輔助劑。使用便捷，只需插入冷凍管，然后再放在-80℃的環(huán)境中即可。程序降溫盒使用時(shí)注意事項(xiàng)：經(jīng)驗(yàn)1：應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的，因
2022
03-10

迷你梯度PCR儀常用的五種分析方法
迷你梯度PCR儀的梯度溫度控制是一項(xiàng)可有助于PCR中引物退火優(yōu)化的功能。梯度設(shè)定的目的是在模塊之間實(shí)現(xiàn)變化的溫度，通過每列之間≥2°C的間隔溫度升降，使得可同時(shí)對(duì)于一系列的溫度進(jìn)行測(cè)試以獲取引物退火溫度。該技術(shù)的一種形式便是設(shè)計(jì)帶有三個(gè)或更多分割金屬模塊的PCR儀，每一模塊都具有獨(dú)立的加熱和冷卻元件。相比于梯度模塊，該模塊設(shè)計(jì)可帶來(lái)活設(shè)置三種或更多不同溫度的能力，以便使得每個(gè)獨(dú)立的區(qū)域都能進(jìn)行更好的溫度控制，特別是在優(yōu)化過程中。獨(dú)立金屬模塊的絕熱性阻止了模塊之間的熱交換。這就可實(shí)現(xiàn)更為準(zhǔn)確的模塊
2022
03-01

三槽梯度PCR儀科普知識(shí)大全，你真不一定都懂
三槽梯度PCR儀溫度的準(zhǔn)確性可能會(huì)對(duì)PCR的成敗與否起決定性作用，因?yàn)镻CR的三個(gè)主要步驟都依賴于溫度。類似地，加熱模塊上孔與孔之間的溫度一致性對(duì)于獲取可靠而可重復(fù)的PCR結(jié)果也是至關(guān)重要的。因此，所使用的PCR儀能在模塊之間準(zhǔn)確到達(dá)設(shè)定的溫度并具有一致性十分關(guān)鍵。確保熱準(zhǔn)確性的一種方法就是經(jīng)常使用溫度驗(yàn)證試劑盒進(jìn)行檢測(cè)并根據(jù)需要由接受過培訓(xùn)的專業(yè)人士進(jìn)行重新校準(zhǔn)。溫度驗(yàn)證檢測(cè)通常可用于：在等溫模式下相對(duì)于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；在溫度轉(zhuǎn)換后相對(duì)于設(shè)定溫度的孔間準(zhǔn)確性；熱蓋溫度的準(zhǔn)確性（可影響模塊
2022
01-21

雙槽梯度PCR儀應(yīng)該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應(yīng)原理類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火（復(fù)性）--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至40~60℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；③引物的延伸：DNA模板一引物結(jié)合物在
2022
01-17

熒光定量基因擴(kuò)增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴(kuò)增儀在操作、維護(hù)和修理本儀器的所有階段，都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告，便可能影響到儀器提供的保護(hù)。同時(shí)，這也會(huì)破壞設(shè)計(jì)和制造的安全標(biāo)準(zhǔn)以及儀器的預(yù)期使用范圍。a）儀器接地為了避免觸電事故，儀器的輸入電源線必須可靠接地。本儀器使用的是三芯接地插頭，這種插頭帶有一個(gè)第3（接地）腳，只能配合接地型電源插座使用，這是一種安全裝置。如果插頭無(wú)法插入插座內(nèi)，則應(yīng)請(qǐng)電工安裝正確的插座，不要使接地插頭失去安全作用。b）遠(yuǎn)離帶電電路操作人員不得擅自打開
2022
01-11

熒光定量PCR的理論依據(jù)是什么？
熒光定量PCR在反應(yīng)中，引入了一種熒光化學(xué)物質(zhì)，隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化。從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線包括3個(gè)階段：基線期，擴(kuò)增期和平臺(tái)期。只有在熒光信號(hào)擴(kuò)增期，PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，所以可以在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了便于對(duì)所檢測(cè)樣本進(jìn)行比較，在熒光定量PCR反應(yīng)的指數(shù)期，需要設(shè)定一定熒光信號(hào)的閾值，一般這個(gè)閾值是以PCR反應(yīng)的前
2022
01-04

二維梯度PCR的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些？
PCR技術(shù)從發(fā)明至今已有二十多年的時(shí)間，用于PCR實(shí)驗(yàn)的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化，包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應(yīng)條件、使用試劑的量甚至是引物等，很多研究者在進(jìn)行PCR優(yōu)化時(shí)都會(huì)考慮退火溫度的優(yōu)化，這時(shí)就會(huì)進(jìn)行梯度PCR。而為什么要通過梯度PCR來(lái)優(yōu)化以及如何解決梯度PCR優(yōu)化后所不能解決的問題，這些對(duì)很多研究者來(lái)說可能并不是很清楚，本文中將會(huì)對(duì)此作一淺析。二維梯度PCR是針對(duì)每臺(tái)PCR儀如何設(shè)置合適的退火溫度進(jìn)行摸索。它是以合成引物的退火溫度為參考值，在進(jìn)
2021
12-27

實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護(hù)方法
高分辨率溶解（HRM）作為一種聯(lián)管式的PCR后分析技術(shù)，引起了學(xué)術(shù)界的廣泛關(guān)注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行分析，與傳統(tǒng)的溶解曲線分析類似，但提高更多的信息，因而具有更廣泛的應(yīng)用?？筛鶕?jù)PCR產(chǎn)物的序列、長(zhǎng)度、GC含量或鏈互補(bǔ)性來(lái)區(qū)分樣品，其靈敏度可區(qū)分單個(gè)堿基的差別?，F(xiàn)在可以通過這種高效、直接的方法檢測(cè)、分析未知的甚至復(fù)雜的序列。離心式設(shè)計(jì)及其出色的光學(xué)和溫度表現(xiàn)令其得以勝任HRM。實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀保養(yǎng)及維護(hù)：1、儀器表面清潔儀器的表面應(yīng)定期用軟布加少量清水擦洗，清洗后將
2021
12-18

雙槽二維梯度PCR儀該如何設(shè)置合適的退火溫度？
雙槽二維梯度PCR儀就是將多個(gè)的PCR反應(yīng)放在一起做，不用一次一次的作很多次，溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度，或者說可以在適合的退火溫度下擴(kuò)增出目的條帶。除具標(biāo)準(zhǔn)PCR儀功能外，其梯度模塊還能同時(shí)進(jìn)行多達(dá)12個(gè)不同退火溫度的PCR反應(yīng)，在梯度模塊上，可實(shí)現(xiàn)對(duì)梯度溫度和梯度寬度等參數(shù)的調(diào)整，自由編程12道溫度，梯度實(shí)現(xiàn)不同樣品的退火溫度并同時(shí)進(jìn)行熱循環(huán)。僅一次實(shí)驗(yàn)就能確定特定體系相應(yīng)的退火溫度。從而可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化，大大提高PCR科研效率。雙槽二維梯度PCR儀如何設(shè)置合
2021
12-08

手動(dòng)移液器使用期間注意事項(xiàng)
手動(dòng)移液器是一種長(zhǎng)期使用的工具，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室。由于每天都要使用數(shù)小時(shí)，在選擇時(shí)人體工程學(xué)和個(gè)人偏好（例如握持舒適性）是非常重要的標(biāo)準(zhǔn)。在尋找適合工作的移液器時(shí)，還需要考慮其它因素，如應(yīng)用、實(shí)驗(yàn)室工作流程、所需的量程范圍、樣品的物理特性、滿足要求的準(zhǔn)確度和準(zhǔn)確度。手動(dòng)移液器使用期間注意事項(xiàng)：1.在取液前所取液體應(yīng)在室溫（15-25℃）平衡；若吸液溫度與室溫有異時(shí)將吸頭預(yù)洗多次再用。注意移液溫度不得超過70℃。2.吸頭浸入液體深度要合適，吸液過程盡量保持不變。3.在吸取液體時(shí)應(yīng)緩慢勻速吸取，避
2021
12-01

細(xì)胞凍存盒的實(shí)驗(yàn)步驟，您都知道嗎？
什么是細(xì)胞凍存？細(xì)胞長(zhǎng)勢(shì)良好，供大于求時(shí)，就可以考慮把細(xì)胞凍存起來(lái)，以后再用。當(dāng)溫度低于-70℃時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的酶活性全部停止，代謝活動(dòng)停止，故可以達(dá)到長(zhǎng)期保存的目的。隨著溫度降低，細(xì)胞內(nèi)外的水分都會(huì)結(jié)晶，所形成的冰晶會(huì)造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞，從而引起細(xì)胞死亡，特別是-20-0℃的階段，冰晶呈針狀，及容易引發(fā)細(xì)胞損傷。細(xì)胞凍存盒的基本原則是緩慢冷凍，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出
2021
11-24

自動(dòng)核酸提取儀中共聚焦掃描頭的作用你知道嗎？
自動(dòng)核酸提取儀隨機(jī)配置軟件，免費(fèi)升級(jí)，可控制儀器運(yùn)行，提供全過程實(shí)時(shí)監(jiān)控功能，記錄提取過程數(shù)據(jù)文件，每次運(yùn)行完自動(dòng)生成報(bào)告，記錄當(dāng)次提取實(shí)驗(yàn)信息，包括樣品信息、試劑信息、純化過程記錄，并具備搜索功能，快速查詢所需要查看的程序或報(bào)告；具有獨(dú)立編程功能，可根據(jù)不同品牌的試劑盒說明書，進(jìn)行裂解、清洗、洗脫等實(shí)驗(yàn)步驟的工作時(shí)長(zhǎng)、混勻幅度、是否加熱等功能的編輯和優(yōu)化；支持樣品二維碼掃描信息錄入及管理，可與其它數(shù)據(jù)庫(kù)、樣品庫(kù)同步共享，實(shí)現(xiàn)樣品編碼信息跟蹤追溯。自動(dòng)核酸提取儀中共聚焦掃描頭的作用：1.單光子部
2021
11-22

寵物也是需要進(jìn)行PCR檢測(cè)的哦！
冠狀病毒的生存方式，是把自己的遺傳物質(zhì)注入到宿主細(xì)胞里之后就開始復(fù)制，利用宿主細(xì)胞里的蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)來(lái)制作病毒的蛋白質(zhì)外殼，重新組裝成新的若干病毒，裂解宿主細(xì)胞并逃出宿主體外，之后繼續(xù)這樣的不斷復(fù)制和傳播。目前造成人類新型肺炎疫情的冠狀病毒（2019-Cov）為β屬，而寵物貓狗的貓冠狀病毒（FCov）和犬冠狀病毒（CCov）為α屬。由于貓狗身上缺少ace2酶，因此感染人的病毒無(wú)法進(jìn)入它們的細(xì)胞內(nèi)，根本談不上復(fù)制和傳播。并且，貓犬冠狀病毒不會(huì)傳染給人。PCR的意思是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，能夠用來(lái)擴(kuò)增DN
2021
11-20

移液器的選擇上需要考慮哪幾點(diǎn)？
移液器又被人們俗稱為移液槍，包括手動(dòng)移液器、電動(dòng)移液器；定量移液器、可調(diào)移液器；單通道移液器、多通道移液器。其結(jié)構(gòu)由容量調(diào)節(jié)器、吸液嘴推卸器、體積顯示窗、活塞、活塞套筒、吸引管連接頭等部分組成。1.移液器的選擇對(duì)于使用者而言，選擇一支經(jīng)久耐用且準(zhǔn)確性可靠的移液器，要考慮以下幾點(diǎn)：(1)產(chǎn)品的性能：移液器的準(zhǔn)確度和重復(fù)性必須滿足JJG646-2006《移液器檢定規(guī)程》。(2)產(chǎn)品的材料：移液器的外殼應(yīng)具有較高的耐沖擊性、耐腐蝕性和較低的導(dǎo)熱。(3)產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)：所選用的移液器，使用者在操作過程中應(yīng)感

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