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如何保證血清活性？2023/05/25

常規(guī)儲存首先，剛到貨的血清，趁著它還凍手，趕緊放進-20℃冰箱中，避免反復(fù)凍融。如何解凍：放4℃過夜直接在4℃冰箱里過夜融化的方法，雖然很多人在這么用，但還是有一些潛在的風險的。我們都知道，在血清這種混合物中，融化速度：蛋白質(zhì)等干物質(zhì)水這類溶劑，所以蛋白質(zhì)會溶解析出，而水還是結(jié)成冰的狀態(tài)，導(dǎo)致瓶子中間會出現(xiàn)一根透明的冰柱，而周圍則會呈現(xiàn)上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài)，在使用過程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過高等問題，影響細胞生長。更重要的一點是，血清中珍貴的生長因子等活性物質(zhì)，它們在解凍過

無血清培養(yǎng)基的應(yīng)用2023/05/24

目前在大規(guī)模動物細胞的培養(yǎng)中已經(jīng)普遍適用于無血清培養(yǎng)基。在疫苗生長、單抗和各種生物活性蛋白等生物制品的應(yīng)用領(lǐng)域中，優(yōu)化無血清培養(yǎng)基的成分可使不同的細胞在最有利于細胞生長和表達目的產(chǎn)物的環(huán)境中維持高密度培養(yǎng)，降低生產(chǎn)成本。在人類細胞培養(yǎng)中，應(yīng)用無血清培養(yǎng)基還能有選擇性地控制及避免成纖維細胞的過度生長。在無血清培養(yǎng)條件下，某些細胞的生長量和抗體的產(chǎn)量甚至較有血清時高出數(shù)倍。應(yīng)用：(1)研究細胞的分化條件：無血清培養(yǎng)基其組成可以是確知的化學(xué)物質(zhì)，因而可根據(jù)研究的需要增減具有重要生物活性物質(zhì)的種類和數(shù)量

什么是脂質(zhì)組學(xué)？2023/05/22

脂類是生物體中最重要的物質(zhì)之一，其在生物結(jié)構(gòu)、能量儲存、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等方面發(fā)揮著不可替代的作用。截至2018年1月，在LIPIDMAPS數(shù)據(jù)庫中已列出了40,000多種脂質(zhì)，之后這個數(shù)量還會不斷上升，因此對這些脂質(zhì)進行系統(tǒng)研究是非常有必要的。脂質(zhì)組學(xué)是系統(tǒng)研究脂質(zhì)組的一門獨立學(xué)科，作為大規(guī)模定性和定量研究脂類化合物并了解它們在不同生理、病理條件下的功能和變化的方法學(xué),能準確全面地提供生物樣品在不同生理條件下的全脂信息譜圖。由于脂類代謝是動植物的代謝中的第一大類，隨著近年來脂質(zhì)組學(xué)迅猛發(fā)展,科學(xué)家們將

合格的ELISA試劑盒需具備的條件2023/05/18

可以根ELISA試劑盒據(jù)以下幾個方面參閱●查驗技師應(yīng)具有從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析疑問的才干，對ELISA試劑盒實驗中呈現(xiàn)的意外狀況能及時妥善解決?！襁\用校對過的微量移液器，排除天然差錯。移液器準確與否對定量查看尤為主要。●仔細閱讀說明書嚴格依照說明書請求進行規(guī)范化操作。不一樣批號的試劑不可混用。值得改善的地方，重復(fù)實驗斷定建立后才干改善?！窳粢釫LISA試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運用。●評估試劑的實用性：試劑的安穩(wěn)與否，對準確率的凹凸

如何養(yǎng)細胞？2023/05/17

01為什么要進行細胞體外培養(yǎng)社會上習(xí)慣于把科學(xué)和技術(shù)連在一起，統(tǒng)稱為科學(xué)技術(shù)，簡稱科技。科學(xué)解決理論問題，技術(shù)解決實際問題。我們走向更好的生活現(xiàn)代生物技術(shù)一般認為包括基因工程技術(shù)、細胞工程技術(shù)、酶工程技術(shù)和發(fā)酵工程技術(shù)，而這些技術(shù)的發(fā)展幾乎都與細胞培養(yǎng)有密切關(guān)系。醫(yī)藥領(lǐng)域（基因工程藥物或疫苗在研究生產(chǎn)過程中很多是通過細胞培養(yǎng)來實現(xiàn)）、基因工程（乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體）、細胞工程（雜交瘤單克隆抗體，是通過細胞培養(yǎng)來實現(xiàn)），既使是現(xiàn)在飛速發(fā)展的基因工程抗體也離不開細胞培養(yǎng)；正在倍受重視的

培養(yǎng)基體系主要成分及功能介紹2023/05/16

1、葡萄糖：用于細胞能量代謝。2、CO?：細胞需要少量的二氧化碳來維持生長。在培養(yǎng)基中，溶解的CO?與碳酸氫鹽離子處于平衡狀態(tài)，許多培養(yǎng)基利用了這種CO?/碳酸氫鹽反應(yīng)來緩沖培養(yǎng)基的pH值。CO?溶解在培養(yǎng)基中，與水反應(yīng)生成碳酸。隨著細胞代謝產(chǎn)生更多的CO?，隨著下面的化學(xué)反應(yīng)向右驅(qū)動，介質(zhì)的pH值下降，通過向培養(yǎng)基中添加碳酸氫鈉，可使pH值維持在7.2~7.4的最佳范圍。3、酚紅：用于監(jiān)測培養(yǎng)基的pH值。在細胞生長過程中，由于細胞釋放的代謝物改變了pH值，培養(yǎng)基的顏色也隨之改變。在較低的pH值

明膠是什么？可分為幾種？2023/05/15

明膠是一種大分子的親水膠體，是膠原部分水解后的產(chǎn)物。按其性能和用途可分為照相明膠、食用明膠和工業(yè)明膠。根據(jù)用途不同，對明膠的質(zhì)量要求也不一樣。用作粘結(jié)劑使用時，主要要求粘接強度。用于照相、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域時，則強調(diào)產(chǎn)品的純度。膠原分子是由三條多肽鏈相互纏繞所形成的螺旋體，通過工藝過程的處理，膠原分子螺旋體變性分解成單條多肽鏈（α-鏈）的α-組分和由兩條α鏈組成的β-組分及由三條α鏈組成的γ-組分，以及介于其間和小于α-組分或大于γ-組分的分子鏈碎片。由此可見，明膠是一個具有一定分子量分布的多分散

透析袋的使用方法的詳細介紹2023/05/12

為防干裂，出廠前透析袋一般都經(jīng)10%的甘油處理，透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì)，它們對蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經(jīng)過處理才能使用。處理方法如下。方法一：把透析袋剪成適當長度（10-20cm）的小段。在大體積（500ml）的2%（w/v）的碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將透析袋煮沸10min。用蒸餾水清洗透析袋。放在500ml的1mmol/LEDTA2Na（pH=8.0）中將之煮沸10min。冷卻后，置于

免疫熒光技術(shù)的技術(shù)分類有幾種2023/05/11

⑴熒光抗體技術(shù)抗原抗體反應(yīng)后，利用熒光顯微鏡判定結(jié)果的檢測方法。⑵免疫熒光測定抗原抗體反應(yīng)后，利用特殊儀器測定熒光強度而推算被測物濃度的檢測方法⑴熒光物質(zhì)1）熒光色素許多物質(zhì)都可產(chǎn)生熒光現(xiàn)象，但并非都可用作熒光色素。只有那些能產(chǎn)生明顯的熒光并能作為染料使用的有機化合物才能稱為免疫熒光色素或熒光染料。常用的熒光色素有：⑴異硫氰酸熒光素（fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末，易溶于水或酒精等溶劑。分子量為389.4，最大吸收光波長為490--495nm

常見蛋白質(zhì)變性劑尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的優(yōu)缺點、區(qū)別2023/05/10

蛋白質(zhì)變性劑是一類能使蛋白質(zhì)發(fā)生變性作用的試劑。蛋白質(zhì)變性是指當?shù)鞍踪|(zhì)受物理或化學(xué)因素的影響，其分子內(nèi)部原有的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)發(fā)生改變的過程。一般認為蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)有了改變或遭到破壞，都是變性的結(jié)果。常見的蛋白質(zhì)變性劑有強酸、強堿、重金屬鹽、丙酮、尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍等。在生化實驗中，常需要對蛋白質(zhì)進行變性研究，一般我們常用尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍這三種蛋白質(zhì)變性劑。今天我們就來講講這三種蛋白質(zhì)變性劑的優(yōu)缺點、區(qū)別、變性機制和注意事項等內(nèi)容。尿素、鹽酸胍和異硫氰酸胍的優(yōu)缺點：尿素的溶解

胰酶的作用機理和應(yīng)用領(lǐng)域2023/05/09

胰酶是經(jīng)提取、精制、復(fù)配而成的一種復(fù)合酶，含有蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等，具有較強的分解蛋白質(zhì)及脂肪等能力，廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)療、釀造、絲綢、制革等行業(yè)。應(yīng)用領(lǐng)域：1、胰酶應(yīng)用在動物蛋白水解，如雞豬牛等家禽肉類、骨類肉副產(chǎn)品、魚蝦蚌類等水海產(chǎn)品的蛋白水解，生產(chǎn)各種肉類香精、骨湯料、肉類及海產(chǎn)品的抽提物。2、胰酶是一種無毒的蛋白質(zhì)，已成功應(yīng)用于洗滌劑用酶工業(yè)，可添加在普通洗衣粉、濃縮洗衣粉和液體洗滌劑當中，既可用于家庭洗衣，也可用于工業(yè)洗衣，可以有效的去除蛋類、乳制品、或肉汁、菜汁等蛋白類的污漬，另

NC膜、PVDF膜的選擇2023/05/08

硝酸纖維素膜又稱為NC膜，在膠體金試紙中用做C/T線的承載體，同時也是免疫反應(yīng)的發(fā)生處。所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材NC膜、PVDF膜的選擇westernblot中膜的選擇是實驗成功的關(guān)鍵點，Westernblot實驗中一般可以選擇硝酸纖維素膜(NC)和PVDF膜，那NC膜和PVDF膜有什么區(qū)別呢？怎樣才能選擇最恰當?shù)碾s交膜進行Westernblot實驗?zāi)?？WesternBlot時該選擇NC膜還是PVDF膜?硝酸纖維素膜：硝酸纖維素膜（NC膜）是蛋白印跡實驗的標準固相支持物。在低離子轉(zhuǎn)移緩

實驗室移液吸頭的分類2023/05/06

吸頭作為與移液器配合使用的耗材，一般根據(jù)應(yīng)用的不同可分為：標準吸頭、濾芯吸頭、低吸附吸頭、自動工作站吸頭、寬口吸頭。1.標準吸頭是應(yīng)用最為廣泛的吸頭，幾乎所有移液操作可使用普通吸頭，這是吸頭中實惠的一類。2.濾芯吸頭是為了避免交叉污染而設(shè)計的一種耗材，濾芯吸頭移取的樣品，不能進入移液器的內(nèi)部，從而起到保護移液器的部件不被污染和腐蝕，更重要的是也可以保證樣品間不會有交叉污染，常用于分子生物學(xué)、細胞學(xué)、病毒學(xué)等實驗中。3.對于靈敏度要求高的實驗，或者易殘留的珍貴樣品或試劑，可以選擇低吸附吸頭來提高回

常見細胞裂解液有哪些？2023/04/25

RIPA裂解液：RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液，獲得的蛋白樣品可用于常規(guī)WB、IP等實驗。組分：25mMTris-HCl,pH7.6、150mMNaCl、1%NP-40、1%去氧膽酸鈉、0.1%十二烷基硫酸鈉（SDS）。IP裂解液：IP裂解液是一種改良后的RIPA裂解液，具中等強度效力，可高效溶解細胞蛋白，但不會像RIPA一樣釋放染色體組DNA或破壞蛋白復(fù)合物。適合下游免疫沉淀或親和吸附應(yīng)用。組分：25mMTris-HCl,pH7.4、150mMNaCl、1%NP-40、1%mME

ripa裂解液的成分及使用方法2023/04/24

RIPA主要是從動物組織和動物細胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)是一種傳統(tǒng)的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等。RIPA的本意是RadioImmunoprecipitationAssay。RIPA裂解液的配方有很多種，根據(jù)其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。成分：RIPA裂解液(強)的主要成分為50mMTris(pH7.4)，150mMNaCl，1%TritonX-100，1%sodiumdeoxy

瓊脂和瓊脂糖有什么區(qū)別？2023/04/18

瓊脂和瓊脂糖的區(qū)別：瓊脂和瓊脂糖之間的主要區(qū)別在于，瓊脂是從紅藻中獲得的凝膠狀物質(zhì)，而瓊脂糖是從瓊脂或紅海藻中純化的線性聚合物。瓊脂和瓊脂糖是來自紅藻或海藻的兩種多糖產(chǎn)品。它們在各個領(lǐng)域都非常有用，從廚房（如食物）到化學(xué)實驗室（作為細菌生長的培養(yǎng)物）。因此，這些資源的種植具有商業(yè)價值，并且正在亞洲和美國的部分地區(qū)進行。在結(jié)構(gòu)上，瓊脂糖是一種線性聚合物，由交替的D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖單元組成。另一方面，瓊脂是瓊脂糖和瓊脂膠的混合物。什么是瓊脂？瓊脂或瓊脂-瓊脂是從江蘺和石花菜等紅藻中

DMEM高糖、DMEM低糖、DMEM/F-12培養(yǎng)基到底啥差別？2023/04/11

DMEM高糖培養(yǎng)基DMEM高糖培養(yǎng)基是在MEM培養(yǎng)基基礎(chǔ)上改良而來，目前已廣泛應(yīng)用于各種細胞的培養(yǎng)。DMEM高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細胞?？捎糜诙喾N哺乳動物原代細胞的培養(yǎng)，例如原代成纖維細胞、神經(jīng)細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞、HUVEC、平滑肌細胞等，也可以用于一些細胞系的培養(yǎng)，例如Hela、293、Cos-7及PC-12等。DMEM低糖培養(yǎng)基DMEM低糖培養(yǎng)基是一種應(yīng)用十分廣泛的培養(yǎng)基，可用于許多哺乳動物細胞培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。DMEM/F-12培

姬姆染色液的操作步驟及注意事項2023/03/23

操作步驟：1、滴加姬姆染色液A液（0.5-0.8ml）于涂片上，并讓染液覆蓋整個標本涂色片染色1分鐘。2、將姬姆薩染色液B液滴加于A液上面（滴加之量為A液的2-3倍）以洗耳球吹出微風使液面產(chǎn)生漣漪狀，使兩液充分混合，染色3-10分鐘。3、水洗（沖洗時不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖去，以防有沉渣沉淀在標本上）。4、干燥，鏡檢。注意事項：1、染色時間要視何種標本，涂片薄厚，有核細胞多少，何種細胞及溫室等而定；通常染血液涂片時滴加B液后染1-3分鐘即可，染骨髓片則應(yīng)不少于5分鐘。2、做骨髓涂片時因為骨髓纖

DMEM（低糖）的注意事項和使用步驟2023/03/06

DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分的用量，同時又分為高糖型（低于4500gm/L）和低糖型（低于1000mg/L）。DMEM低糖培養(yǎng)基用于養(yǎng)干細胞可防分化，DMEM高糖可養(yǎng)大多數(shù)哺乳動物的細胞。注意事項：1、培養(yǎng)及長期放置，需要2-8℃避光保存，請勿低溫凍存。2、培養(yǎng)基中添加的L-谷氨酰胺在溶液中不穩(wěn)定、易分解，長期放置后使用若發(fā)現(xiàn)細胞生長變慢可以在使用前加入適量的L-谷氨酰胺，來維持細胞正常代謝。3、含有NaHCO3的培

DNA提取試劑盒有哪幾種？2023/02/28

DNA提取試劑盒是根據(jù)lv/芐化/法構(gòu)建的，能夠從樣本中提取基因組DNA的試劑盒。lv化/芐具有能將含有纖維素等的細胞壁中的羥基芐基化，從而破壞細胞壁的特性。本制品利用了lv化/芐的這一特性，將植物樣品凍結(jié)融解后，再使用PipetTip將植物樣品在Microtube壁上數(shù)次按壓即可破壞細胞壁。本法與傳統(tǒng)方法相比，省去了液氮研磨等煩瑣步驟，有利于一次性處理大量樣品。而且，本制品經(jīng)過了改良，熱處理時間只需15分鐘，使用本制品從實驗開始至水相回收只需30分鐘時間。得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及