99超碰中文字幕在线观看-天天干天天日天天舔婷婷-我看操逼的好看的女人的-日本一二三四五区日韩精品

組織細胞內(nèi)抗原的固定性2017/04/13

組織細胞內(nèi)抗原的固定是免疫酶標和非標記免疫酶組織化學方法中的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)過固定，可以達到如下目的：1.標本在玻片上的吸著力增加；2.標本所含的類脂和蠟質(zhì)等成分可以除去，從而有利于抗原與酶標記抗體的結(jié)合；3.標本的保存時間可以增長，組織切片固定后，在－20℃，可以存放一年以上而不改變免疫酶技術(shù)的染色；組織內(nèi)有關(guān)抗原不同，則所用固定劑與固定方法也隨之改變。丙酮和乙醇是常用的兩種固定劑。但對于許多病毒與細菌的定位研究，選擇丙酮和四氯化化碳作為固定劑是zui合適的；對于可溶性蛋白抗原的定位，常用乙醇；對

細胞膜的作用2017/04/13

細胞膜的主要功能:細胞膜對于細胞整個結(jié)構(gòu)的完整性以及細胞的正常生命活動都是至關(guān)重要的。其功能概括起來有以下幾個方面。(1)細胞的界膜，這是細胞膜zui重要的功能。無論是真核細胞還是原核細胞，都必定有一個由一定膜結(jié)構(gòu)形成的界膜，不然的話就不會有細胞存在。細胞膜的出現(xiàn)使生命起源到了細胞的形式，也保證了細胞生命活動的正常進行。細胞膜的出現(xiàn)使各種生物大分子集中到一個相對穩(wěn)定的微環(huán)境中，這樣有利于細胞的物質(zhì)和能量代謝，也有利于細胞的生長發(fā)育。(2)物質(zhì)的跨膜運輸膜的存在使細胞成為一個相對獨立的系統(tǒng)，但細胞

培養(yǎng)細胞污染的來源2017/03/23

污染來源細胞培養(yǎng)過程中污染的來源主要有以下幾條途徑：1、不潔的動物組織標本很多動物組織本該是無菌的(直接與外界相通的呼吸道和消化道、泌尿系統(tǒng)除外)，但由于取材時不小心也會有污染的機會。組織本身含有細菌，如取材時不用濃的抗生素洗液洗滌浸泡，也會帶菌，造成細胞污染。2、空氣空氣中含有大量的微生物，如果操作室與外界隔離不嚴或消毒不充分下，很容易造成污染。另外，凈化工作臺使用過久，濾板未定期更換或長久不更換，濾氣受塵埃堵塞，工作時不帶口罩或外界氣流過強，污染空氣進入操作區(qū)，也會導(dǎo)致污染。春夏季南方地區(qū)多

免疫組化實驗注意事項2017/03/09

免疫組化實驗注意事項1.蘇木素復(fù)染時間需要摸索，尤其陽性染色也在細胞核上。2.DAB顯色時間需要達到*化，鏡下觀察達到陽性染色明顯但背景不太深。3.抗體孵育時間和抗體濃度需要摸索。尤其一抗孵育溫度在4度。4.切片脫蠟和水化要充分；加反應(yīng)液時要覆蓋組織充分；每次加液前甩干洗滌液，但又防止干片；用組化筆畫圈時盡量畫大一點，否則墨水排斥液體，引起片周邊干片。5.片子著色不均勻的原因如下：（1）脫蠟不充分?？梢?0℃烤20min，立即放入新鮮的xylene1；（2）水化不全。應(yīng)經(jīng)常配制新鮮的梯度乙醇；（

流式細胞術(shù)——補償微球篇2017/02/23

—多色流式分析的福音由于熒光光譜的重疊現(xiàn)象，在進行流式多色分析時，必須設(shè)置單染管進行熒光補償。OneComp/UltraCompeBeads微球大小和淋巴細胞相當，可連接各種熒光標記的抗體來調(diào)節(jié)補償。每滴微球中都含有兩群：一群是可以結(jié)合抗體的陽性群，一群是不會與抗體反應(yīng)的陰性群。優(yōu)點●使用方便，一滴即可?！衽c所有小鼠、大鼠和倉鼠來源的抗體反應(yīng)，無論它們的輕鏈是kappa還是lambda。●適用于各種激發(fā)光---適用于488nm藍光，532nm綠光，561nm黃光，633-635nm紅光，Ultr

細胞核的分離提取2017/01/05

細胞核的分離提?。ㄒ唬┎僮鞑襟E1．用頸椎脫位的方法處死小白鼠后，迅速剖開腹部取出肝臟，剪成小塊（去除結(jié)締組織）盡快置于盛有0.9％NaCl的燒杯中，反復(fù)洗滌，盡量除去血污，用濾紙吸去表面的液體。2．將濕重約1g的肝組織放在小平皿中，用量筒量取8ml預(yù)冷的0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液，先加少量該溶液于平皿中，盡量剪碎肝組織后，再全部加入。3．剪碎的肝組織倒入勻漿管中，使勻漿器下端浸入盛有冰塊的器皿中，左手持之，右手將勻漿搗桿垂直插入管中，上下轉(zhuǎn)動研磨3～5次，用3層紗布過

培養(yǎng)基傳代細胞的制備操作方法2016/12/13

（一）原理體外培養(yǎng)基的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)。細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞

PVDF膜蛋白染色步驟2016/11/25

一、所需試劑1.2%麗春紅S濃貯存液（3-羥基-4-[2-磺基-4-硫代-苯偶氮基]-2，7-萘二磺酸）：溶于30%三氯醋酸和30%磺基水楊酸中。貯存液可在室溫下穩(wěn)定存放1年以上。2.PBS。www.runwelltac.com二、操作步驟1.在染色之前，先配制麗春紅S的應(yīng)用液。即將2%的麗春紅S濃貯存液用1%醋酸1:10稀釋即成為應(yīng)用液（注意：如果使用硝酸纖維膜，須將麗春紅S應(yīng)用液更換為用水1:10稀釋）；2.用麗春紅S應(yīng)用液將PVDF膜洗1次；3.加入新鮮稀釋的麗春紅S應(yīng)用液，并在室溫下攪動

免疫組化抗原修復(fù)注意事項2016/11/24

免疫組化抗原修復(fù)注意事項1、pH的應(yīng)用范圍及選擇抗原修復(fù)液的pH非常重要，有效的抗原修復(fù)pH要比修復(fù)液的化學成分更重要，同樣的修復(fù)液隨著pH的升高染色的強度逐漸增強，但*pH范圍為6.0-10.0。目前大家*的的抗原修復(fù)液是pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液和pH8.0的EDTA緩沖液。作為通用修復(fù)液堿性pH的修復(fù)液要比酸性的有效，而對固定很長時間舊的存檔組織，酸性pH的修復(fù)液則優(yōu)于堿性的修復(fù)液。2、抗原修復(fù)時應(yīng)選擇*溫度70-90℃的溫度對未經(jīng)固定的蛋白質(zhì)可發(fā)生變性，但經(jīng)福爾馬林固定的蛋白質(zhì)，溫度必須

常用培養(yǎng)基的制備2016/11/16

培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料，一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。以下介紹培養(yǎng)基的制備流程：一、配料按培養(yǎng)基處方準確稱取各種成分，先在三角燒瓶中加入少量蒸餾水，再加入各種成分，以防蛋白胨等粘附于瓶底，然后再以剩余的水沖洗瓶壁。二、溶化將各種成分混勻于水中，以流通蒸氣溶化半小時，如在電爐上溶化應(yīng)隨時攪拌，如有瓊脂成分時更應(yīng)注意防止外溢。溶化完畢，補足失去的水分。三、矯正pH1.pH測定取與標準管同口徑的試管（通常用

培養(yǎng)基分為哪些類型2016/10/28

由于各種所需要的營養(yǎng)不同，所以培養(yǎng)基的種類很多。據(jù)估計目前約有數(shù)千種不同的培養(yǎng)基，這些培養(yǎng)基可根據(jù)所含成分、物理狀態(tài)、以及不同的使用目的等而分成若干類型。1.按照培養(yǎng)基的成分來分培養(yǎng)基按其所含成分，可分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基三類。（1）合成培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基的各種成分*是已知的各種化學物質(zhì)。這種培養(yǎng)基的化學成分清楚，組成成分，重復(fù)性強，但價格較貴，而且微生物在這類培養(yǎng)基中生長較慢。如高氏一號合成培養(yǎng)基、察氏（Czapek）培養(yǎng)基等。（2）天然培養(yǎng)基。由天然物質(zhì)制成，如蒸熟的馬鈴薯

預(yù)防細胞污染及污染后對策2016/10/18

污染向來是在細胞培養(yǎng)中的大問題。預(yù)防或治理污染是細胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素。我們在細胞培養(yǎng)時，在開始階段就要十分重視污染問題，否則會前功盡棄，這樣不僅浪費時間，也會浪費人力、物力。(一)有哪幾類污染？在細胞培養(yǎng)過程中的污染不只是指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學物質(zhì)。1、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭

微生物培養(yǎng)基及其成分2016/10/09

培養(yǎng)基通常指人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)。廣義上說，凡是支持微生物生長和繁殖的介質(zhì)或材料均可以作為微生物的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的種類繁多，因考慮的角度不同，可將培養(yǎng)基分成以下一些類型：天然培養(yǎng)基：利用生物組織、器官及其抽取物或制品配成；根據(jù)對培養(yǎng)基成分了解的程度合成培養(yǎng)基：使用成分*了解的化學藥品配制而成；半合成培養(yǎng)基：由部分天然材料和部分已知的純化學藥品組成液體培養(yǎng)基：各營養(yǎng)成分按一定比例配制而成的水溶液或液體狀態(tài)的培養(yǎng)基；根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)固體培養(yǎng)基：液體培養(yǎng)基中加入一定量

細胞裂解方法及細胞裂解液的特點2016/10/09

細胞裂解方法包括化學裂解、酶裂解和機械裂解。化學裂解和酶裂解通常是比較溫和的方法，通常會很少使DNA斷裂。這兩種方法（包括SDS和溶菌酶處理等）提取純化DNA中常用的方法。機械裂解可以更均一的裂解細胞，同化學裂解相比，機械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機械處理可以更劇烈和全面的裂解細胞，但也會造成DNA的斷裂。常用的方法是裂解液處理法細胞裂解液的主要目的：1.利用去污劑破壞脂質(zhì)雙分子層，破裂細胞；2.溶解蛋白；3.蛋白變性使其穩(wěn)定；4.抑制蛋白酶活性含有多種細胞裂解成分和蛋白酶抑制成分，

如何選擇蛋白酶抑制劑以提高蛋白純化率2016/09/22

當細胞破碎的時候，蛋白水解酶就會被釋放出來或被激活，使電泳結(jié)果復(fù)雜化，影響zui終結(jié)果分析。為了避免這些情況的出現(xiàn)，建議在樣品制備時盡可能在低溫下進行。此外，許多蛋白酶在PH9以上就失活了，因此Tris堿，碳酸鈉或堿性載體兩性電解質(zhì)往往能抑制蛋白水解。但是有些蛋白酶在上述條件下仍然保持著活性，此時應(yīng)當使用蛋白酶抑制劑。因此對于我們想要研究的蛋白來說，選擇性和有效的抑制這些蛋白酶對于蛋白純化路線設(shè)計來說顯得尤為重要。蛋白酶抑制劑與蛋白酶一樣，都是紛繁復(fù)雜的，通常使用許多化學物質(zhì)作為蛋白酶抑制劑，如

培養(yǎng)基的濃度和理化2016/09/22

培養(yǎng)基的濃度和理化在同等條件下經(jīng)多次使用無污染后，就沒必要再擺3d后才使用，而是冷卻凝固后就可使用了。(1)防塵已經(jīng)滅好菌的培養(yǎng)基要注意防塵。如果培養(yǎng)基在衛(wèi)生條件差的地方貯存，依附在塵埃中的細菌、真菌等會落在培養(yǎng)瓶表面，使用前若不進行表面滅菌處理，培養(yǎng)基的濃度和理化在接種時就容易隨著氣流進入容器，使其受到污染，影響組織培養(yǎng)工作的順利進行，因此培養(yǎng)基必須放在干凈、衛(wèi)生的接種室內(nèi)。(2)避光備用培養(yǎng)基應(yīng)貯于光線較暗的房子里面，因為吲哚乙酸等某些物質(zhì)易見光分解。在光照下，一些培養(yǎng)基添加物的成分也會發(fā)生

細胞支原體污染的熒光檢測方法2016/09/22

DNA螢光染色法·原理︰利用螢光染劑（bisbenzimide,Hoechst33258）偵測支原體污染。此染劑會結(jié)合到DNA之Adenosine-Thymidine（A-T）rich區(qū)域，因為支原體之DNA中A-T含量占多數(shù)（55～80%），所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經(jīng)染色后，在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點，即為支原體之DNA，證明有支原體之污染?！ぬ攸c︰簡單、經(jīng)濟與靈敏，廣泛使用，可作為例行之偵測步驟?？梢詡蓽y不易培養(yǎng)之支原體，例如M.hyorhinis，較直

怎么理解抗體的功能、規(guī)律？2016/09/21

抗體(英語:antibody)，(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細胞(效應(yīng)B細胞)分泌，被免疫系統(tǒng)用來鑒別與中和外來物質(zhì)如細菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì)，僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動物的血液等體液中，及其B細胞的細胞膜表面?？贵w能識別特定外來物的一個*特征，該外來目標被稱為抗原。功能：抗體的主要功能是與抗原（包括外來的和自身的）相結(jié)合，從而有效地清除侵入機體內(nèi)的微生物、寄生蟲等異物，抗體（antibody）是一種應(yīng)答抗原產(chǎn)生的、可與抗原特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)。每種抗體與特定的抗原決定基結(jié)合。這種結(jié)合可以

細胞分離技術(shù)2016/09/21

離心是研究如細胞核、線粒體、高爾基體、溶酶體和微體，以及各種大分子基本手段。一般認為，轉(zhuǎn)速為10~25Kr/min的離心機稱為高速離心機；轉(zhuǎn)速超過25Kr/min，離心力大于89Kｇ者稱為超速離心機。目前超速離心機的zui高轉(zhuǎn)速可達100Kr/min，離心力超過500Kg。在密度均一的介質(zhì)中由低速到高速逐級離心，用于分離不同大小的細胞和細胞器。在差速離心中細胞器沉降的順序依次為：核、線粒體、溶酶體與過氧化物酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高基體、zui后為核蛋白體。由于各種細胞器在大小和密度上相互重疊，而且某些慢

免疫組織染色注意事項2016/09/02

免疫組織染色注意事項，1、概念和基本原理免疫組織化學又稱免疫細胞化學，是指帶顯色劑標記的特異性抗體在組織細胞原位通過抗原抗體反應(yīng)和組織化學的呈色反應(yīng)，對相應(yīng)抗原進行定位、定性、半定量測定的一項新技術(shù)。它把免疫反應(yīng)的特異性和組織化學的可見性巧妙地結(jié)合起來，借助顯微鏡的現(xiàn)像和放大作用，在細胞、亞細胞水平檢測各種抗原物質(zhì)，并可在原位顯示相應(yīng)的基因和基因表達產(chǎn)物。免疫組織化學方法種類現(xiàn)已有：免疫熒光組織（細胞）化學技術(shù)、免疫酶組織（細胞）化學技術(shù)、親和組織化學技術(shù)、免疫金銀及鐵標記免疫組織化學技術(shù)等。免