以下是兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒的綜合使用說明：

　　BS-4068 兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 天津本生

　　一、實(shí)驗(yàn)原理

　　采用雙抗體夾心法：包被抗IL-1sRⅠ抗體的微孔板捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白，與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合形成復(fù)合物，TMB顯色后通過OD值定量分析。

　　二、試劑盒組成

　　標(biāo)準(zhǔn)品?：凍干粉(需稀釋液復(fù)溶)

　　酶標(biāo)試劑?：HRP標(biāo)記抗體(3ml/6ml)

　　洗滌緩沖液?：50×濃縮液(需蒸餾水稀釋)

　　顯色系統(tǒng)?：TMB底物與終止液各12ml

　　輔助材料?：封板膜、密封袋、說明書

　　三、樣本處理要求

　　樣本類型 處理方式 保存條件

　　血清/血漿 2000-3000rpm離心10-30分鐘 短期2-8℃，長(zhǎng)期-20℃分裝

　　組織勻漿 PBS勻漿后離心取上清 -20℃避免反復(fù)凍融

　　細(xì)胞上清 離心去除碎片 分裝凍存

　　注意?：避免使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)。

　　四、操作步驟

　　標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?：梯度稀釋至7個(gè)濃度，第8孔為空白對(duì)照

　　加樣孵育?：加50-100μl樣本，37℃孵育1-2小時(shí)

　　洗滌?：使用稀釋洗滌液洗板4-6次，拍干

　　顯色?：加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘，終止后15分鐘內(nèi)測(cè)OD450nm

　　數(shù)據(jù)計(jì)算?：以標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算濃度

　　五、注意事項(xiàng)

　　不同批號(hào)試劑不可混用，底物需避光保存

　　顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制，OD值超范圍需稀釋復(fù)測(cè)

　　實(shí)驗(yàn)需設(shè)雙復(fù)孔取平均值以減少誤差

　　酶標(biāo)板開封后未用完需密封加干燥劑保存

　　六、技術(shù)服務(wù)支持

　　部分廠商提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，包括實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、數(shù)據(jù)解析等。如需具體品牌完整說明書，建議聯(lián)系供應(yīng)商獲取版本。

　　注：以上資料僅供參考，具體請(qǐng)咨詢技術(shù)老師或品牌供應(yīng)商。

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