高濃度HC Matrigel基底膜基質(zhì)膠
BD產(chǎn)品貨號:354248 354262
儲存和運(yùn)輸:-20℃儲存,干冰運(yùn)輸。
產(chǎn)品特性:
Matrigel基質(zhì)會有色差變化(淡黃色到深紅色),是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,但是與5%CO2平衡后即會減少。凍融后,輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻。所有操作均需在無菌環(huán)境下進(jìn)行,試劑瓶蓋可用70%乙醇擦拭,并自然干燥。應(yīng)使用預(yù)冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。
細(xì)胞可在0.5 mm厚度的Matrigel基質(zhì)層表面生長,也可在1 mm厚度的Matrigel三維基質(zhì)內(nèi)生長。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質(zhì)的蛋白層,可以用于細(xì)胞貼壁,但不能用于細(xì)胞的分化研究。
注意:可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管,所有分裝均需用預(yù)冷的凍存管,迅速冷凍并保存,避免多次凍融。
Matrigel在25-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,因此溶解時在4℃冰上overnight凍融(4度時會隨著溫度的上升部分成膠)。成膠后的Matrigel可以在4℃ 24-48小時后重新呈液態(tài)。
注射步驟:
注射前,必須保證Matrigel細(xì)胞懸浮液在不冷凍的情況下,盡可能地保持低溫,同時保證每一步都無菌操作。對于每只注射小鼠,冰上混合0.5 mL細(xì)胞(2×105或更多細(xì)胞)和 Matrigel混合液。細(xì)胞注射體積需盡可能小。通常,用含有2×106/mL細(xì)胞的250 μL預(yù)冷培養(yǎng)基,混合250 μL冰浴的Matrigel。小鼠皮下注射,19G針用于組織樣品,23G針用于培養(yǎng)的細(xì)胞。注射動作必須快速,以避免Matrigel凝固。抽出注射器時旋轉(zhuǎn)以防止泄漏。針頭需要經(jīng)常更換以避免堵塞。用BD細(xì)胞回收劑(354253)或離散酶(354235)可降解Matrigel基質(zhì),冰浴7小時后回收得到細(xì)胞。
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