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BIOGHSC一步法超級熒光定量PCR試劑盒(探針)說明書

來源:常州百代生物科技股份有限公司   2016年02月14日 13:50  

產(chǎn)品特點

◎逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個反應(yīng)管內(nèi)一步完成,操作簡便快速;

◎使用我們研發(fā)的超級熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性更高,酶動力更強,特別適合多重PCR反應(yīng);

◎反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,靈敏度高,zui低可檢測1pg總RNA中的目標(biāo)片段,特別適合低拷貝RNA的檢測;                     

◎添加了百代生物RT-PCR活素,可明顯提升RT-PCR的產(chǎn)量,CT值一般早3-5循環(huán),S型曲線更加典型。

產(chǎn)品介紹  

BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit專為以RNA為模板的定量PCR檢測而設(shè)計,適合熒光探針法定量PCR分析。使用BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit,逆轉(zhuǎn)錄和定量PCR在一個反應(yīng)管內(nèi)一步完成,中間無開管和移液動作,操作非常簡便,也大大提高了實驗的效率,并降低了反應(yīng)的污染風(fēng)險。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit使用我們研制優(yōu)化的緩沖液,確保了反轉(zhuǎn)錄和定量PCR反應(yīng)能夠快速、地完成。BIOGHSC Super MultiProbe One Step Kit的檢測靈敏度可達到1pg總RNA,與其它品牌的同類產(chǎn)品相比,具有更高的檢測靈敏度。各反應(yīng)成分以 Mix的形式提供,非常方便實驗者使用。

 

 

產(chǎn)品成分                                                     反應(yīng)體系 

組    分

100個反應(yīng)

250個反應(yīng)

RNase free ddH2O

1ml

1.25mlx2

BIOGHSC  Super MultiProbe  Mix

1ml

1.25mlx2

BIOGHS Super Enzyme Mix

50ul

125ul

RT-PCR Enhancer

25ul

62.5ul

2xBIOGHSC Super MultiProbe  Mix

10μl

BIOGHSC  Super Enzyme Mix

0.5μl

RT-PCR Enhancer

0.25ul

上下游引物 (10μM)

0.6μl

TaqMan Probe (10μM)

0.5μl

模板RNA

10ng-1μg

RNase free ddH2O

加至20µl

 

 

 

 

 

 

 

 

 

說明1、BIOGHSC Super MultiProbe Mix包含dNTP MixMg2+BIOGHSC Super Enzyme Mix包含BIOG超級逆轉(zhuǎn)錄酶和BIOG超級熱啟動聚合酶、熒光保護素。2、一般來說反應(yīng)體系中引物終濃度為0.3μM可得到較好的擴增效果。進行多重PCR反應(yīng)時,不同靶基因引物的濃度搭配可以在0.1-1.0μM范圍內(nèi)進行實驗優(yōu)化。 3TaqMan探針終濃度可以在0.1μM-0.45μM之間調(diào)整,進行多重PCR反應(yīng)時,不同靶基因探針的濃度搭配應(yīng)進行實驗優(yōu)化。4、qPCR反應(yīng)靈敏性高,模板量的準(zhǔn)確性對結(jié)果影響很大,建議將模板適度稀釋后加入,或用50ul反應(yīng)體系。5、模板體積不超過反應(yīng)體積的10%。6、擴增產(chǎn)物長度請選擇在100bp-500bp范圍內(nèi),為100-200bp 7、配制反應(yīng)體系時,避免震蕩混勻,以防氣泡產(chǎn)生。8、反應(yīng)條件:先于42℃逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)20分鐘,再于95℃加熱10分鐘,以激活熱啟動DNA聚合酶,然后95 15秒,60 35秒,35-40個循環(huán)。該反應(yīng)條件可根據(jù)目標(biāo)片段的大小、引物的Tm值、檢測基因的多少等適當(dāng)調(diào)整。8、如果模板具有復(fù)雜二級結(jié)構(gòu),可將反應(yīng)溫度提高至55℃,有助于提高產(chǎn)量。

 

 

 

儲存和穩(wěn)定性  

干冰或藍冰運輸,-20°C 儲存,避免反復(fù)凍融 。  

如每次使用量較少,推薦小份分裝使用。

有效期

-20℃保存條件下,有效期為1年。

質(zhì)量控制

所有組分經(jīng)檢測均無核酸外切酶,核酸內(nèi)切酶,RNase殘留。

 

注意 

本產(chǎn)品僅用于科研

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