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人ELISA試劑盒的操作步驟

來源:上海一研生物科技有限公司   2015年05月19日 10:31  

人ELISA試劑盒操作步驟

1、將1個McAb與固相載體連接,形成固相McAb。人ELISA試劑盒洗滌除去未結合物。

2、同時加入待檢標本和酶標McAb,溫育,是待檢抗原和固相McAb及酶標McAb反應形成雙抗體夾心復合物。洗滌除去未結合物。

3、加底物顯色。

適用于雙抗體夾心法的人ELISA試劑盒,有些也可用雙位點一步法檢測。如HBsAg同樣可用此法進行檢測,其原理為:將純化的抗HBs吸附于固相載體表面,加入待檢血清(或血漿),同時加入辣根過氧化物酶標記的另一個抗HBs(酶結合物),如血清或血漿中含有HBsAg,則通過溫育形成固相McAb-HBsAg-酶標McAb復合物,加入底物,通過顯色反應進行測定。若血清或血漿中不含HBsAg,通過洗滌除去未結合物,

加底物后就不顯色。

1.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準確。
2.液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。
3.孵育時要使蓋板膜封好酶標板,防止水分蒸發(fā),以防曲線不成線性。
4.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。
5.手工洗板時每次加入洗滌液后。人ELISA試劑盒應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

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