牛血清的質(zhì)量檢測
(一) 化學(xué)檢測
(1) 滲透壓(280-340mOsmol/kg):使用凝固點(diǎn)降低的方法檢測滲透壓,使用國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對我們的滲透壓儀器進(jìn)行校準(zhǔn);
(2) PH值(7.0-7.5):同樣使用國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究所標(biāo)定的標(biāo)準(zhǔn)溶液對pH計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn);
(3) 蛋白含量:(電容法)樣品被加到醋酸纖維素介質(zhì)中并在緩沖溶液體系內(nèi)遷移,條帶經(jīng)染色、清潔、干燥后用密度儀進(jìn)行掃描以檢測***和球蛋白組分的相對濃度。 ***、球蛋白和血紅蛋白隨著牛年齡的增加血清中總蛋白含量相應(yīng)增加,總的血清蛋白含量可以確認(rèn)產(chǎn)品的規(guī)格和年齡。
(二) 微生物檢查
(1)細(xì)菌和真菌:直接培養(yǎng)法
(2)支原體:(培養(yǎng)法及DNA染色法)在支原體專業(yè)培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4周,培養(yǎng)溫度34°C~36°C分別在需氧和厭氧的條件下進(jìn)行,有的還需要在支原體瓊脂培養(yǎng)皿上傳4代,Hoechst熒光素DNA染色檢查哪些培養(yǎng)法無法檢出的支原體如豬鼻支原體等。
(3)病毒:牛蘭舌病毒Bovine blue tongue;牛腺病毒Bovine Adeovirus;牛細(xì)小病毒Bovine Parvovirus;牛病毒性腹瀉病毒Bovine Viral Diarhea Virus;狂犬病病毒Rabies;呼腸狐病毒Reovirus;牛呼吸道合胞病毒BRSV;副流感病毒III型Parainfluenza。 檢查方法:已證明無外源因子污染的牛細(xì)胞培養(yǎng)物,在細(xì)胞生長液中加15%待測血清,連傳3代共21天。陰性對照細(xì)胞培養(yǎng)液中價(jià)15%已知無病毒污染的牛血清,與試驗(yàn)組同條件下進(jìn)行。在觀察期內(nèi)注意細(xì)胞形態(tài)變化或細(xì)胞病變。在觀察期內(nèi)第14天待檢樣品和對照樣品用標(biāo)準(zhǔn)病毒檢測方法檢查。如待檢細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)胰酶消化后分種到6個(gè)含蓋玻片的容器內(nèi)。陰性對照品按同樣方法。再將牛腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、牛腺病毒、狂犬病毒和呼腸弧病毒分別加入待檢培養(yǎng)物蓋玻片容器內(nèi)作為陽性對照,在培養(yǎng)7天,用熒光抗體技術(shù)進(jìn)行檢查。細(xì)胞病變或病毒引起的其他改變通過蘇木精或伊紅染色進(jìn)行觀察。取另外一個(gè)待檢細(xì)胞培養(yǎng)瓶用人“O”紅細(xì)胞、豚鼠紅細(xì)胞和新鮮雞紅細(xì)胞作血球吸附病毒檢查。試驗(yàn)在2-8°C和20-24°C進(jìn)行。陰性對照細(xì)胞預(yù)先感染副流感III型病毒作為陽性對照。未能感染的細(xì)胞作為陰性對照。
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