目標(biāo)
建立的氣相色譜質(zhì)譜檢測(cè)方法，靈敏、快速測(cè)定動(dòng)物性食品中的地**泮|安**酮的含量。樣品中的目標(biāo)物經(jīng)乙腈提取，固相萃取小柱凈化后用氣質(zhì)
聯(lián)用儀分析。引言 
地**泮|安**酮在臨床上作為鎮(zhèn)
靜催眠藥，屬于精神管制藥,長期服用有成癮性和依賴性。
近年來 , 隨著畜牧養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展 , 有不法分子在經(jīng)濟(jì)利益
的驅(qū)動(dòng)下,擅自在畜禽飼養(yǎng)中添加使用以期增加產(chǎn)肉量。
地**泮|安**酮在飼料中的濫用 , 將zui終導(dǎo)致畜產(chǎn)品中
藥物的殘留 , 從而嚴(yán)重影響消費(fèi)者的身體健康 [1]。
地**泮|安**酮的測(cè)定方法多集中在臨床制藥和刑偵檢
測(cè)方面 , 如血液、尿液、胃內(nèi)容物等。主要有紫外分光
光度法檢測(cè) ; 液液提取 , 用 HPLC 分析 ; 固相萃取 ,GC-FID
或 GC-MS 測(cè)定 ; 用薄層層析分離定性 , 用薄層掃描測(cè)定含
量 [1 ～ 3]
。
本方法是將樣品中的地**泮|安**酮用乙腈提取，固相
萃取的方法凈化后用氣相色譜 - 質(zhì)譜進(jìn)行定性、定量。
該方法定量準(zhǔn)確，靈敏度高，重現(xiàn)性好，能夠滿足目前
動(dòng)物性食品中地**泮|安**酮檢測(cè)的需要。
儀器
Trace1310-ISQ 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配 EI 源（Thermo 
Scientific）；AS1310 自動(dòng)進(jìn)樣器（Thermo Scientific）
恒溫水浴鍋、離心機(jī)、天平、漩渦混合器、氮吹儀、固
相萃取儀（Thermo Scientific）

耗材
色譜柱：TG-5SilMS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）（Thermo Scientific, 
PN: 26096-1421）
C18 SPE 柱，500 mg，3mL（Thermo Scientific）
試劑與標(biāo)準(zhǔn)品
地**泮|安**酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：濃度 200 μg/ml；
正己烷、乙腈、甲醇：色譜純 (Thermofisher)
標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備
精密移取適量地**泮|安**酮標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，根據(jù)需要將
標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用甲醇稀釋到使用濃度 10 μg/ml。然后再精密
量取 10 μg/ml 的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液適量，用甲醇稀釋，配
制成濃度為 0.5、1、5、10、50、100、500 和 1000 ng/ml 的
系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，待測(cè)。
樣品前處理
提取
取適量新鮮的豬肉樣品，用勻漿機(jī)絞碎，并使均質(zhì)。取均質(zhì)后的供試樣品，作為供試材料，空白樣品作為空白
試料；均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液，
作為加標(biāo)回收材料。
稱取試料約1.0 g(到0.01 g)，于15 ml離心管中，加入
10 ml乙腈，渦旋后水浴超聲5 min，8000 r/min離心10 min，
取上清液于50 ml離心管中，加入30 ml正己烷，渦旋混勻
后靜置，棄上層液。取下層液，于50 ℃氮?dú)獯抵? ml，加
水 4 ml，混勻備用。
凈化
C18 柱依次用甲醇 5 mL 和水 5 mL 活化，取備用液過柱，
用 50% 甲醇水溶液 5 mL 淋洗，用 70% 甲醇水溶液 5 mL
洗脫，收集洗脫液，于50℃氮?dú)獯蹈桑?00 μl甲醇復(fù)溶，
待測(cè)。
實(shí)驗(yàn)條件
色譜柱：TG-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；
柱溫：150℃（1 min），10℃/min到290℃（4 min）；
進(jìn)樣模式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 µL，分流時(shí)間 1 min；
進(jìn)樣口溫度： 290℃（15 min）；載氣：氦氣（99.999%），恒流模式，1 mL/min；
質(zhì)譜離子源溫度：310℃，傳輸線溫度：290℃；
掃描模式：選擇離子監(jiān)測(cè)模式，每個(gè)離子駐留時(shí)間0.09 s，
地**泮：283,256*,241,221；安**酮：250, 235*, 217,91；
結(jié)果與討論
儀器分析方法優(yōu)化：以全掃描的方式對(duì)目標(biāo)物標(biāo)液進(jìn)行
測(cè)定，得到其質(zhì)譜圖，根據(jù)全掃描質(zhì)譜圖經(jīng) NIST 譜庫檢
索進(jìn)一步確證目標(biāo)化合物，得到其保留時(shí)間，選擇合適
的定性和定量的特征目標(biāo)監(jiān)測(cè)離子。測(cè)定時(shí)，可根據(jù)標(biāo)
準(zhǔn)物和待測(cè)物的定量離子圖中的峰面積，外標(biāo)法定量。
確證時(shí)，可根據(jù)碎片離子及其豐度比作為其陽性判別的
依據(jù)。在選定的色譜條件下，標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖見圖 1。
線性關(guān)系及測(cè)定低限：將 0.5、1、5、10、50、100、500
和 1000 ng/ml 的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液由低濃度到高濃度進(jìn)樣。
以測(cè)定峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 3，表 1.。分別將樣品前處理項(xiàng)下的加
標(biāo)回收樣品，按照樣品前處理步驟處理，所得的溶液進(jìn)
樣即得各組分的加標(biāo)回收率，具體見表 2、表 3.。本實(shí)驗(yàn)
方法檢出限以 3 倍信噪比計(jì)算得到，本方法測(cè)定豬肉中
地**泮|安**酮的的測(cè)定低限為 1.0 µg/kg。