本實(shí)驗(yàn)的目的是為了評(píng)估Arium pro UF系統(tǒng)生產(chǎn)的超純水是否能夠安全無(wú)恙地輕松用于細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。在本研究中，我們以即用型CDM4PERMab（Hyclone）培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)PER.C6 EpCAM細(xì)胞作為對(duì)照，同時(shí)分別用Arium pro UF生產(chǎn)出來(lái)的水（UF水）和RO水來(lái)配制CDM4PERMab（Hyclone）粉末培養(yǎng)基。在本應(yīng)用指南中所使用的RO水?dāng)?shù)據(jù)是通過(guò)新一代Arium系統(tǒng)的舊款模型（Arium RO）而獲得的。每個(gè)培養(yǎng)批次的結(jié)果用于評(píng)估由Arium pro UF系統(tǒng)生產(chǎn)的水是否適合用于PER.C6 EpCAM細(xì)胞的培養(yǎng)。 
    本實(shí)驗(yàn)中所使用的PER.C6細(xì)胞系來(lái)源于人成視網(wǎng)膜細(xì)胞，如今也應(yīng)用于重組蛋白的表達(dá)和單克隆抗體（Mab生產(chǎn)）的制備，以及用于治療性蛋白和單克隆抗體的生產(chǎn)。

實(shí)驗(yàn)方法

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實(shí)驗(yàn)結(jié)果

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結(jié)論

     本實(shí)驗(yàn)結(jié)果清楚地顯示了用UF水配制的粉末培養(yǎng)基（CDM4PERMab培養(yǎng)基）比市場(chǎng)上在售的即用型培養(yǎng)基更加適合PER.C6 EpCAM細(xì)胞系的培養(yǎng)。PER.C6 EpCAM細(xì)胞系在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后的生長(zhǎng)特征與對(duì)照組中用即用型CDM4PERMab培養(yǎng)基培養(yǎng)后的特征相似。 此外，我們還觀察到當(dāng)實(shí)驗(yàn)在Spinner Flasks中進(jìn)行時(shí)，細(xì)胞系樣品在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)與用RO水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)相比，細(xì)胞生長(zhǎng)更加良好。在這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞密度基本都變得很高，而O2不再是限制性因素。因此我們得出結(jié)論，RO水中因?yàn)橛懈邼舛鹊膬?nèi)毒素或無(wú)機(jī)鹽，因此影響了細(xì)胞生長(zhǎng)。

     這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果都通過(guò)在Spinner Flasks中培養(yǎng)PER.C6 EpCAM細(xì)胞系而獲得的單抗產(chǎn)量得到進(jìn)一步驗(yàn)證與體現(xiàn)。PER.C6 EpCAM細(xì)胞系在用Arium pro UF超純水配制的培養(yǎng)基樣品中培養(yǎng)能夠獲得zui高的單抗產(chǎn)量，對(duì)照組（使用即用型培養(yǎng)基）的產(chǎn)量稍低。這兩種情況的單抗產(chǎn)量都不同于RO水樣品，在RO水樣品中培養(yǎng)后單抗產(chǎn)量反而下降。 
     綜上，我們總結(jié)出Arium pro UF系統(tǒng)是用于PER.C6 EpCAM細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)的，因?yàn)樵撍到y(tǒng)將水中的雜質(zhì)含量降到了zui低，如無(wú)機(jī)離子，有機(jī)化合物等，尤其是將內(nèi)毒素含量降為痕量的水平。這一結(jié)果在的實(shí)驗(yàn)中也得到了驗(yàn)證^[4]。

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參考文獻(xiàn)/更多信息

[1] ASTM Standard Guide for Bio-Applications Grade Water D 5196-06
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[4] Schmidt K. und Herbig E.: “Weniger ist mehr –Quantitative Endotoxinbestimmung von Reinstwasser“, Laborpraxis, 5, 36. Jhg., (2012)