本文所描述的HPLC，洗脫液必須具有*的物理和化學(xué)純度，并且不得含有懸浮機械性顆?；蛉魏卧诒Ａ魰r間內(nèi)由流穿色譜柱的溶解物質(zhì)，因為這些溶解物質(zhì)會產(chǎn)生干擾信號。溶劑的質(zhì)量往往對HPLC分析的可靠性起到?jīng)Q定作用。去離子水或蒸餾水仍然含有微量的可產(chǎn)生鬼峰的有機物質(zhì)[5]溶劑中的污染物會在固定相上不斷累積，進而導(dǎo)致色譜柱的堵塞，樣品運行期間壓力的上升和漂移可以證明這一點。

使用arium® pro VF純化水作為洗脫液

     HPLC所需的特殊品質(zhì)的水可以從多家生產(chǎn)商處購買，也可以使用一個水純化系統(tǒng)在現(xiàn)場直接生產(chǎn)，比如arium® pro VF系統(tǒng)。下面描述的是分離糖混合物的實驗，其中的流動相（洗脫）使用的是由arium® pro VF生產(chǎn)的超純水。

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材料和方法

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結(jié)果

1. 各種糖經(jīng) HPLC色譜柱后的分離結(jié)果。黑色曲線：糖混合物 在確定好每一種糖之后，便開始制備并分離糖混合物（圖5）。

圖5: 單一注射的糖樣品的分離結(jié)果以及糖混合物用超純水經(jīng)交聯(lián)8 % Na+的Rezex RNM

2. 通過注射磷酸鉀緩沖液和自來水來模擬污染物的效應(yīng)或鹽的影響（圖6）。

注射的自來水電導(dǎo)率為265µS/cm，磷酸鉀緩沖液的電導(dǎo)率為1700µS/cm，兩者都顯示了清晰的信號，因而可以明顯地辨別為污染物。在本次分析中使用的arium®超純水的電導(dǎo)率為0.055µS/cm，基本不含干擾性雜質(zhì)，表現(xiàn)為波形平坦，沒有波峰產(chǎn)生（見圖6中的綠色基線）。

圖6：2µl的10mM磷酸鉀緩沖液，2µl的自來水以及2µl的arium® pro VF超純水的色譜圖。

分析運行過程中的柱壓恒定地維持在23bar(~ 334psi)。這表明了在色譜柱內(nèi)沒有沉積物累積。開始和結(jié)尾的空白運行未顯示出任何改變；亦即，在流動相中沒有污染物。

對不同濃度的標準系列進行分析，以確定重現(xiàn)性和檢測限值。以棉子糖作為這些分析的例子。保留時間和峰面積均被記錄并在表4中列出。

不斷重復(fù)獲得一致的保留時間說明了具有優(yōu)異的重現(xiàn)性。棉子糖標準系列顯示了一條濃度高達0.015mg/ml的線性曲線（圖7）。

圖7：棉子糖和arium® pro VF超純水通過Rezex RNM Carbohydrate Na+ 8%色譜柱的標準系列（數(shù)值來自表4）。

根據(jù)量化樣本的峰面積生成一條標準的直線，對棉子糖研究是*可行的。

結(jié)論

     本文的研究結(jié)果顯示由arium® pro VF生產(chǎn)的超純水可以即時用作上文所列水溶性糖的HPLC分析的流動相，也可用于食品分析，環(huán)境分析，制藥、化學(xué)和生物化學(xué)方面的研究，以及制藥和生物行業(yè)的工藝中質(zhì)量控制測試。arium® pro VF超純水在HPLC色譜法中作為流動相所開展的研究以及所獲得的經(jīng)驗，都使其可在不久的將來延伸用于其它分離技術(shù)，比如反相色譜，尺寸排阻色譜或超液相色譜技術(shù)等。

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