熒光分光光度計(jì)基本原理       

    由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中，激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光，熒光經(jīng)過濾過和反射后，被光電倍增管所接受，然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。 物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出，從而產(chǎn)生熒光． 　　
        不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征，這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜；，因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。 　　
        在溶液中，當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時,其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似，熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。

熒光分光光度計(jì)的功能

1、波長掃描

波長掃描功能主要包括熒光強(qiáng)度和發(fā)光強(qiáng)度兩種數(shù)據(jù)模式。通過熒光強(qiáng)度數(shù)據(jù)模式可以得到樣品的激發(fā)光譜和熒光光譜，是一種比較常用的方法。

2、時間掃描

時間掃描是在規(guī)定的時間間隔內(nèi)采集被測樣品的熒光強(qiáng)度隨時間變化曲線?？梢杂脕肀O(jiān)測被測樣品的物理化學(xué)變化，動力學(xué)法可被執(zhí)行。

3、光度值法

使用波長法進(jìn)行定量，高達(dá)20個標(biāo)準(zhǔn)樣品能被測量，通過標(biāo)準(zhǔn)濃度的每個點(diǎn)來繪制多邊形標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備可使用一次、二次、三次方的曲線或折線，同時可獲得其相關(guān)系數(shù)R及R2。

4、三維掃描

可以得到三維圖、等高線圖，快速進(jìn)行未知樣品熒光峰位的測定。

5、強(qiáng)大的圖譜處理功能

兩個譜圖可進(jìn)行加、減、乘、除運(yùn)算，也可以計(jì)算譜圖面積；具有光譜校正和快門控制等。

熒光分光光度計(jì)的技術(shù)參數(shù)

1.光源: 150W 氙燈

2.波長范圍: 200 nm-900nm

3.靈敏度：S/N>500（峰對峰）

4.光柵: 1200grooves/250 nm blazing

5.波長掃描速度: zui大5000 nm/min

6.波長驅(qū)動器速度: 10,000 nm/min

7.波長度:+ 2 nm

8.波長重復(fù)性:+ 2 nm

9.狹縫寬度: 1，2，5，10，20 nm

10.尺寸: 518mm（W）×604mm（D）×272mm（H）

11.重量: 43.7kg

12.電源: 100~132V 50/60 Hz或者180~240V 50/60 Hz（可選）

熒光分光光度計(jì)的應(yīng)用

1.醫(yī)學(xué)和臨床檢驗(yàn)———生物體試料的臨床分析

2.藥學(xué)和藥理學(xué)———天然藥物分析，藥品質(zhì)量控制和藥物代謝的研究

3.生物化學(xué)———對于生物體內(nèi)微量物質(zhì)的測定

4.食品工業(yè)———食品中痕量組分的測定

5.污染物的分析———大氣污染、環(huán)境衛(wèi)生檢測，食品污染物研究等

6.有機(jī)和無機(jī)化學(xué)———用吸光光度法不能測定的痕量組分分析