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低速離心機在分離淋巴細胞中的應用

來源:廣州市默菲儀器有限公司   2013年05月24日 13:49  

 

 
Metrizozte-Ficoll法分離血液時,淋巴細胞和單核細胞在同一區(qū)帶,但是單核細胞具有吞噬膠態(tài)鐵顆粒的能力,使其密度明顯增加,用梯度法可使這兩種細胞獲得分離。
抗凝靜脈血在低速離心機中以600g離心10分鐘,分離出白細胞,大約1ml,與1ml膠態(tài)鐵懸浮液混合,在37℃、搖動孵育30分鐘,加入等體積的0.9%NaCl溶液,并鋪放在3ml Metrizozte-Ficoll介質(zhì)上,600g離心20分鐘,離心后淋巴細胞在分界面處形成區(qū)帶。
另外,淋巴細胞比單核細胞對滲透敏感,增加梯度介質(zhì)的滲透壓,淋巴細胞更容易失水收縮,密度增加??捎貌煌瑵B透壓的Nycodenz-NaCl梯度從富含白細胞的血漿中分離單核細胞。當暴露于高滲介質(zhì)中,淋巴細胞密度增加明顯,易于通過屏障介質(zhì),單核細胞密度也增加,使之產(chǎn)量下降。使用密度為1.062g/cm3 Nycodenz梯度,滲透壓在310mOsm時可獲得高純度的單核細胞,但產(chǎn)量會受到一些影響。

湖南湘立研制生產(chǎn)的幾款醫(yī)用離心機可以用來進行細胞分離,如DL5M/TDL5M兩種型號的低速冷凍離心機可用來進行干細胞實驗。XL03RH型控溫離心機(低速冷凍離心機)可用來進行溫度敏感型人體細胞分離。

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