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抗血清鑒定
抗血清的質(zhì)量直接影響分析方法的特異性和靈敏度。用于鑒定抗血清質(zhì)量的參數(shù)主要有幾項(xiàng)：
1．親和性（affinity） 是指抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合部位與相應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強(qiáng)度，常用親和常數(shù)Ka表示。Ka是正／逆向反應(yīng)速度常數(shù)的比值，單位為稀釋度單位（L／mol或LM-1），表示需將lmol抗體稀釋至多少升，才能使抗原—抗體結(jié)合下降50％；而Ka的倒數(shù)為解離常數(shù)（Kd），其單位為濃度單位（mol／L）。為提高放射免疫分析的靈敏度、精密度和準(zhǔn)確度，需選用Ka值高（109一1012L／mo1）的抗血清。
2．特異性（specificity） 是指一種抗體識(shí)別相應(yīng)抗原決定簇的能力。由于一種抗原常有結(jié)構(gòu)極相似的類(lèi)似物（同類(lèi)物、前體、降解物和代謝物），其抗血清可能對(duì)該抗原的類(lèi)似物產(chǎn)生交叉反應(yīng)。因此，抗體的特異性通常以交叉反應(yīng)率表示：將反應(yīng)的zui大結(jié)合率抑制下降50％時(shí)特異性抗原與類(lèi)似物的劑量（ED50）之比來(lái)計(jì)算交叉反應(yīng)率。如胰島素標(biāo)準(zhǔn)品使125I胰島素與抗血清的zui大結(jié)合下降50％的用量為0．5ng，而類(lèi)似的物（前體）胰島素原的用量為500ng，則相應(yīng)的交叉反應(yīng)率（％）為：0．5／500＝0．1％。
抗體交叉反應(yīng)程度的高低直接影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，但應(yīng)注意，抗血清特異性與分析方法特異性并不*相同，因后者對(duì)某一待測(cè)抗原的特異性程度不僅取決于所用抗體，尚有賴(lài)于標(biāo)記物的質(zhì)量和方法學(xué)設(shè)計(jì)。
3．效價(jià)（titer） 是反映抗血清中有效抗體含量的相對(duì)參數(shù)，即抗血清稀釋至能與抗原發(fā)生有效反應(yīng)的zui大稀釋度。通常是將一株抗血清作系列稀釋后與標(biāo)記抗原反應(yīng)，計(jì)算不同稀釋度時(shí)抗體結(jié)合標(biāo)記抗原的百分率，繪制出抗體稀釋度曲線。結(jié)合具體方法設(shè)計(jì)要求。效價(jià)一般指結(jié)合50％標(biāo)記抗原時(shí)，抗血清的稀釋度。
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