手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
人胚腎細(xì)胞STR鑒定原理與必要性深度解讀
一、STR鑒定原理：基于DNA指紋的精準(zhǔn)識別
短串聯(lián)重復(fù)序列（ShortTandemRepeat,STR）是基因組中2-6個(gè)堿基對重復(fù)排列的DNA片段，其重復(fù)次數(shù)在不同個(gè)體間存在顯著差異，形成的“遺傳指紋”。人胚腎細(xì)胞（如HEK293等常用細(xì)胞系）的STR鑒定通過以下步驟實(shí)現(xiàn)：
DNA提取與擴(kuò)增：從細(xì)胞樣本中提取基因組DNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增16-25個(gè)高多態(tài)性STR位點(diǎn)（如TH01、D21S11等），每個(gè)位點(diǎn)產(chǎn)生不同長度的擴(kuò)增片段。
電泳分離與熒光檢測：通過毛細(xì)管電泳分離擴(kuò)增片段，熒光標(biāo)記的片段在電場中按長度遷移，形成特征性峰圖。
數(shù)據(jù)庫比對：將峰圖數(shù)據(jù)與數(shù)據(jù)庫（如ATCC、DSMZ）比對，匹配率≥80%可確認(rèn)細(xì)胞系身份，若出現(xiàn)多峰或異常峰則提示交叉污染或遺傳變異。
二、人胚腎細(xì)胞STR鑒定的必要性
避免交叉污染，保障實(shí)驗(yàn)可靠性
據(jù)統(tǒng)計(jì)，約18%-30%的細(xì)胞系存在交叉污染或錯(cuò)誤標(biāo)記問題。人胚腎細(xì)胞作為基因編輯、藥物篩選的常用模型，若被其他細(xì)胞（如癌細(xì)胞）污染，會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失真。例如，某研究團(tuán)隊(duì)因使用污染的HEK293細(xì)胞，導(dǎo)致基因表達(dá)數(shù)據(jù)與預(yù)期不符，浪費(fèi)數(shù)月時(shí)間。
確?？蒲姓\信與可重復(fù)性
Nature、Science等期刊要求投稿時(shí)提供細(xì)胞STR鑒定報(bào)告，以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)材料的真實(shí)性。2015年，某科學(xué)家因未進(jìn)行STR鑒定，誤用錯(cuò)誤細(xì)胞系發(fā)表Nature論文，最終被迫撤稿，嚴(yán)重?fù)p害科研信譽(yù)。
監(jiān)測遺傳穩(wěn)定性，支持長期培養(yǎng)
人胚腎細(xì)胞在體外傳代過程中可能發(fā)生染色體變異或基因突變。定期STR鑒定可追蹤遺傳特征變化，例如某團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)傳代50次后的HEK293細(xì)胞在D5S818位點(diǎn)出現(xiàn)新峰，提示潛在遺傳不穩(wěn)定，及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案。
滿足法規(guī)與商業(yè)化需求
《中國藥典》規(guī)定，新建細(xì)胞系及生產(chǎn)終末細(xì)胞需通過STR鑒定確認(rèn)無交叉污染。在細(xì)胞治療領(lǐng)域，STR鑒定是產(chǎn)品安全性的關(guān)鍵證據(jù)，例如CAR-T細(xì)胞制備中，需通過STR驗(yàn)證T細(xì)胞來源。
三、實(shí)踐建議
鑒定頻率：新細(xì)胞入庫、傳代10代以上、實(shí)驗(yàn)結(jié)果異常時(shí)均需鑒定。
位點(diǎn)選擇：優(yōu)先檢測國際標(biāo)準(zhǔn)位點(diǎn)（如CODIS核心位點(diǎn)），確保數(shù)據(jù)庫匹配準(zhǔn)確性。
結(jié)果解讀：若匹配率<80%，需排查污染源或重新獲取細(xì)胞系；若出現(xiàn)新峰，建議結(jié)合核型分析進(jìn)一步驗(yàn)證。
STR鑒定是人胚腎細(xì)胞研究的質(zhì)量控制基石，通過精準(zhǔn)的遺傳指紋分析，為科研誠信、實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性及臨床應(yīng)用安全提供不可替代的保障。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心