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基于便攜式熒光比色計(jì)的乳制品中三聚氰胺現(xiàn)場快速測定解決方案

來源:上海元恒國際貿(mào)易有限公司   2025年08月20日 09:27  
一、檢測原理
本解決方案選用量子點(diǎn)作為熒光探針,量子點(diǎn)具有熒光量子產(chǎn)率高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),對三聚氰胺具有特異性識(shí)別作用。當(dāng)量子點(diǎn)與三聚氰胺結(jié)合后,會(huì)發(fā)生熒光猝滅現(xiàn)象,且熒光猝滅程度與三聚氰胺的濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。便攜式熒光比色計(jì)可通過檢測量子點(diǎn)熒光強(qiáng)度的變化,進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對乳制品中三聚氰胺的定量測定。具體而言,在沒有三聚氰胺存在時(shí),量子點(diǎn)發(fā)出較強(qiáng)的熒光;當(dāng)三聚氰胺存在時(shí),其與量子點(diǎn)表面的基團(tuán)發(fā)生相互作用,導(dǎo)致量子點(diǎn)的熒光被猝滅,熒光強(qiáng)度隨三聚氰胺濃度的增加而逐漸降低。
二、樣品預(yù)處理
  1. 取 10mL 乳制品樣品于 50mL 離心管中。

  1. 加入 5mL 10% 的三氯醋酸溶液作為沉淀劑,充分振蕩 10 分鐘(振蕩速度為 200r/min),使蛋白質(zhì)充分沉淀。

  1. 將離心管放入離心機(jī)中,以 4000r/min 的轉(zhuǎn)速離心 15 分鐘。

  1. 離心結(jié)束后,小心取出上清液,即為處理后的樣品,此步驟可有效去除樣品中的蛋白質(zhì)等干擾物質(zhì)。

三、檢測步驟
  1. 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制:準(zhǔn)確稱取一定量的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品,用超純水溶解并定容,配制一系列不同濃度的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.1mg/L、0.5mg/L、1mg/L、5mg/L、10mg/L)。

  1. 熒光探針溶液配制:將量子點(diǎn)溶于磷酸鹽緩沖溶液(pH=7.0)中,配制濃度為 2μmol/L 的量子點(diǎn)熒光探針溶液。

  1. 反應(yīng)體系構(gòu)建:分別取 2mL 不同濃度的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液和處理后的樣品溶液于比色管中,各加入 2mL 量子點(diǎn)熒光探針溶液,充分混合均勻。

  1. 反應(yīng)條件控制:將比色管置于 25℃恒溫水浴中反應(yīng) 20 分鐘,控制反應(yīng)體系的 pH 值為 7.0。

  1. 便攜式熒光比色計(jì)檢測:反應(yīng)結(jié)束后,將比色管中的溶液倒入便攜式熒光比色計(jì)的比色皿中,設(shè)置激發(fā)波長為 365nm,發(fā)射波長為 520nm,測定溶液的熒光強(qiáng)度。

  1. 數(shù)據(jù)處理與結(jié)果分析:以三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo),對應(yīng)的熒光猝滅程度(空白熒光強(qiáng)度與樣品熒光強(qiáng)度的差值與空白熒光強(qiáng)度的比值)為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)樣品溶液的熒光猝滅程度,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品中三聚氰胺的濃度。

四、性能評(píng)價(jià)
  1. 檢測限:通過對低濃度三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行多次檢測,以 3 倍信噪比對應(yīng)的濃度作為該方法的檢測限,經(jīng)測定,本方法的檢測限可達(dá) 0.05mg/L,滿足乳制品中三聚氰胺的檢測要求。

  1. 精密度:對同一濃度的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行 6 次平行測定,計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD),結(jié)果顯示 RSD 小于 5%,表明該方法具有良好的精密度。

  1. 準(zhǔn)確度:采用加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn),向已知濃度的乳制品樣品中加入不同量的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行回收實(shí)驗(yàn),計(jì)算回收率,回收率在 85%-115% 之間,說明該方法具有較高的準(zhǔn)確度。

  1. 特異性:選取乳制品中可能存在的干擾物質(zhì),如尿素、葡萄糖、乳糖等,進(jìn)行特異性實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明這些干擾物質(zhì)對三聚氰胺的檢測無明顯影響,該方法具有良好的特異性。

綜上所述,本基于便攜式熒光比色計(jì)的乳制品中三聚氰胺現(xiàn)場快速測定解決方案操作簡便、快速、準(zhǔn)確,適用于乳制品中三聚氰胺的現(xiàn)場快速檢測,可滿足食品安全監(jiān)管和企業(yè)質(zhì)量控制的需求。


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