DBCO-PEG-Biotin的分子結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)
產(chǎn)品介紹:
DBCO-PEG-Biotin:用于點(diǎn)擊標(biāo)記與親和結(jié)合的雙功能連接分子
一、產(chǎn)品概述
DBCO-PEG-Biotin 是一種具備雙功能的聚乙二醇衍生物,分子結(jié)構(gòu)包括三部分:一端為具有應(yīng)變環(huán)炔結(jié)構(gòu)的 DBCO(Dibenzocyclooctyne),中間為柔性的 PEG 鏈段,另一端為生物素(Biotin)結(jié)構(gòu)。其設(shè)計(jì)思路是在不依賴金屬催化劑的條件下,實(shí)現(xiàn)分子的高效點(diǎn)擊連接,同時(shí)兼具后續(xù)的親和素結(jié)合功能。
該材料廣泛應(yīng)用于分子標(biāo)記、納米粒修飾、信號(hào)放大、生物探針構(gòu)建等領(lǐng)域,是連接疊氮修飾分子與生物素體系的重要中間體或交聯(lián)試劑。
二、分子結(jié)構(gòu)與功能特點(diǎn)
DBCO 是一種具有應(yīng)變八元環(huán)炔結(jié)構(gòu)的化學(xué)單元,能夠在溫和條件下與疊氮(–N?)基團(tuán)發(fā)生快速的1,3-偶極環(huán)加成反應(yīng)(SPAAC),無(wú)需銅離子等金屬催化劑,適用于細(xì)胞或體內(nèi)環(huán)境。其反應(yīng)速度快、選擇性強(qiáng),是當(dāng)前點(diǎn)擊化學(xué)中常用的親炔基團(tuán)之一。
中間的聚乙二醇鏈提供柔性和親水性,避免官能團(tuán)間的空間干擾,并提升水相體系中的溶解性和反應(yīng)穩(wěn)定性。PEG長(zhǎng)度通常在1000~5000道爾頓范圍內(nèi)可調(diào)節(jié),能根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整分子間距和溶解行為。
末端的生物素是一個(gè)天然維生素結(jié)構(gòu),可被鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)高度特異性地結(jié)合,結(jié)合常數(shù)達(dá)到10?1? mol/L 級(jí)別,廣泛用于生物分子富集、探針標(biāo)記、親和捕獲、免疫識(shí)別等體系中。
三、反應(yīng)原理與偶聯(lián)機(jī)制
DBCO-PEG-Biotin 的一端能與疊氮修飾的蛋白、肽、多糖、聚合物或其他功能分子進(jìn)行銅離子無(wú)催化的點(diǎn)擊反應(yīng)。這種 SPAAC 反應(yīng)通常在水性緩沖液中即可進(jìn)行,反應(yīng)條件溫和,適合敏感的生物體系如活細(xì)胞、天然蛋白、DNA 等。
點(diǎn)擊完成后,目標(biāo)分子即被共價(jià)修飾上 Biotin 結(jié)構(gòu)。隨后通過(guò)鏈霉親和素與生物素之間的高度親和識(shí)別,可以將目標(biāo)分子固定在酶、熒光標(biāo)記物、磁珠或芯片表面等介質(zhì)上,進(jìn)一步用于富集、標(biāo)記、成像、傳感等操作。
四、應(yīng)用方向舉例
該試劑用于將含疊氮基團(tuán)的分子修飾為生物素化分子,便于后續(xù)鏈霉親和素體系的結(jié)合。典型應(yīng)用包括熒光或磁性探針的構(gòu)建,將疊氮修飾的熒光染料、納米顆粒等通過(guò) DBCO-PEG-Biotin 修飾為生物素標(biāo)記結(jié)構(gòu),再結(jié)合鏈霉親和素偶聯(lián)熒光素、辣根過(guò)氧化物酶或磁珠,實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大與富集。
在免疫分析和傳感器開(kāi)發(fā)中,該分子常被用于實(shí)現(xiàn)抗體或寡核苷酸的生物素化修飾,并用于固定到親和素修飾的芯片或電極表面,構(gòu)建高靈敏度檢測(cè)平臺(tái)。
在細(xì)胞標(biāo)記與成像方面,也可先將細(xì)胞表面疊氮修飾,再與 DBCO-PEG-Biotin 反應(yīng),之后通過(guò)熒光鏈霉親和素成像,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞定位或成分追蹤。
五、操作建議
實(shí)驗(yàn)中建議使用無(wú)水 DMSO 或 DMF 將該化合物溶解成濃縮母液,使用時(shí)按比例稀釋入緩沖液中反應(yīng)。點(diǎn)擊反應(yīng)可在中性條件下完成,一般在室溫或37°C 條件下30分鐘至2小時(shí)即可,具體時(shí)間可根據(jù)反應(yīng)對(duì)象調(diào)整。
為獲得較高反應(yīng)效率,推薦的摩爾配比為 DBCO-PEG-Biotin 與疊氮目標(biāo)分子1:1至1.2:1之間。反應(yīng)后可以通過(guò)親和素標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)驗(yàn)證,或利用鏈霉親和素珠實(shí)現(xiàn)產(chǎn)物純化。
本品應(yīng)避光、干燥儲(chǔ)存,長(zhǎng)期保存建議在–20°C環(huán)境中冷藏,避免潮氣與氧化性物質(zhì)影響結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
六、小結(jié)
DBCO-PEG-Biotin 是一種功能明確、反應(yīng)溫和、選擇性高的雙功能交聯(lián)分子,既能通過(guò)點(diǎn)擊化學(xué)實(shí)現(xiàn)疊氮分子的高效標(biāo)記,又能借助生物素與親和素的強(qiáng)親和作用進(jìn)行后續(xù)固定、捕獲或信號(hào)擴(kuò)展操作。在蛋白質(zhì)修飾、細(xì)胞成像、生物傳感器構(gòu)建、分子探針開(kāi)發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域具有廣泛適用性。
如配合其他點(diǎn)擊試劑(如疊氮-DNA、疊氮-抗體、疊氮-藥物等)使用,可快速搭建模塊化分子體系,適合科研開(kāi)發(fā)和應(yīng)用驗(yàn)證過(guò)程中的快速反應(yīng)平臺(tái)建設(shè)。
產(chǎn)品名稱:DBCO-PEG-Biotin
產(chǎn)地信息:陜西 · 西安
包裝規(guī)格:產(chǎn)品提供瓶裝形式,常規(guī)包裝規(guī)格包括100 mg、250 mg 和 500 mg,亦可根據(jù)需求定制。
產(chǎn)品形態(tài):可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提供為固體、粉末或溶液狀態(tài),便于不同應(yīng)用場(chǎng)景。
儲(chǔ)存建議:為保持產(chǎn)品的活性與穩(wěn)定性,建議低溫冷藏保存。
廠家信息
西安暉瑞生物科技有限公司是一家集研發(fā)、生產(chǎn)和銷(xiāo)售為一體的科研試劑企業(yè),專(zhuān)注于功能分子與高分子材料的開(kāi)發(fā)與定制服務(wù)。公司擁有成熟的合成技術(shù)體系和豐富的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),產(chǎn)品類(lèi)型覆蓋多個(gè)研究方向,廣泛服務(wù)于高校、科研院所及企業(yè)實(shí)驗(yàn)室。
主營(yíng)產(chǎn)品包括:合成磷脂、PEG衍生物、嵌段共聚物、順磁/超順磁納米顆粒,金納米材料(納米金、金納米棒)、近紅外染料及其標(biāo)記物、熒光標(biāo)記的葡聚糖、BSA、鏈霉親和素、多種蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG化合物等
此外,公司還提供點(diǎn)擊化學(xué)試劑、樹(shù)枝狀聚合物、環(huán)糊精、大環(huán)配體、熒光量子點(diǎn)、透明質(zhì)酸修飾物、石墨烯及其氧化物、碳納米材料(包括碳納米管、富勒烯)等前沿材料,并支持客戶根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)進(jìn)行分子結(jié)構(gòu)與功能的定制開(kāi)發(fā)。
暉瑞生物以技術(shù)驅(qū)動(dòng)和服務(wù)導(dǎo)向?yàn)楹诵睦砟?,致力于為科研人員提供穩(wěn)定可靠的材料解決方案,助力科學(xué)研究高效推進(jìn)。
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