Invigentech IN0005 WB 超敏型ECL發(fā)光液產(chǎn)品介紹

基礎(chǔ)信息

產(chǎn)品概述

包裝規(guī)格

提供 100ml 與 500ml 兩種包裝規(guī)格，滿足不同實(shí)驗(yàn)規(guī)模需求。

儲(chǔ)存條件

• 短期保存：4℃避光環(huán)境下，保質(zhì)期可達(dá) 1 年；

• 長(zhǎng)期保存：若暫不使用，建議 - 20℃避光冷凍保存；

• 運(yùn)輸條件：支持 4℃冷藏運(yùn)輸或室溫運(yùn)輸。

產(chǎn)品描述

本試劑采用化學(xué)發(fā)光技術(shù)，專用于蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子的檢測(cè)。生物大分子經(jīng)電泳分離后，轉(zhuǎn)移至印跡膜。針對(duì)蛋白質(zhì)檢測(cè)，采用一抗與辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗順序結(jié)合目的蛋白；核酸檢測(cè)則通過 HRP 標(biāo)記探針直接或間接結(jié)合目的核酸。完成結(jié)合反應(yīng)后，使用新鮮配制的 ECL 工作液，在室溫避光條件下孵育印跡膜 2 - 3 分鐘。后續(xù)既可通過 X 光片曝光顯影，也可采用 CCD 掃描印跡膜，實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)或核酸條帶的可視化檢測(cè)。

操作說明

1. 完成      Western Blot 實(shí)驗(yàn)全流程，直至使用 PBST 或 TBS/TBST 充分洗滌二抗。

2.   配制 ECL 工作液：將 ECL Substrate A 液與 Peroxide Solution B 液按 1:1 體積比混合，現(xiàn)配現(xiàn)用?；旌虾蟮墓ぷ饕菏覝胤胖脭?shù)小時(shí)仍可使用，但靈敏度會(huì)有所下降。

3.   用平頭鑷子取出印跡膜，置于濾紙上瀝干洗膜液，注意避免膜干燥。將 ECL 工作液均勻滴加于膜表面（使用量約 0.125 ml/cm2，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)習(xí)慣調(diào)整），確保wan全覆蓋，室溫孵育 2 - 3 分鐘。

4.   用鑷子夾持印跡膜，棄去工作液，用吸水紙吸除多余液體。

5.   迅速將印跡膜夾在兩層保鮮膜之間，盡量排除氣泡。

6.   將包好的印跡膜蛋白面朝上，固定于 X 光膠片暗盒內(nèi)。

7.   在暗室環(huán)境下，將 X 光片覆蓋于膜上，根據(jù)預(yù)期信號(hào)強(qiáng)度設(shè)定曝光時(shí)間，完成顯影、定影操作。

8.   可根據(jù)信號(hào)強(qiáng)弱調(diào)整曝光及顯影時(shí)間，或通過多次曝光優(yōu)化檢測(cè)效果。

注意事項(xiàng)

1. 配制      ECL 工作液時(shí)，吸取 ECL Substrate A 液與 Peroxide Solution B 液需更換吸頭，工作液配制后應(yīng)立即使用。

2.   Peroxide Solution B 液含氧化劑，易被還原失效，使用后需及時(shí)密封保存。

3.   本產(chǎn)品僅適用于基于 HRP 酶標(biāo)記抗體或核酸探針的檢測(cè)系統(tǒng)。

4.   避免在同一洗膜盒內(nèi)同時(shí)洗滌多張膜，防止膜間吸附、摩擦導(dǎo)致背景信號(hào)升高。

5.   選用高質(zhì)量保鮮膜，劣質(zhì)膜可能淬滅熒光或因雜質(zhì)污染印跡膜，造成曝光背景值異常。

6.   根據(jù)目的蛋白表達(dá)豐度，合理設(shè)置曝光時(shí)間，避免因曝光不足或過長(zhǎng)導(dǎo)致條帶不清晰或背景過深。

7.   （NaN?）會(huì)抑制 HRP 活性，如需回收 HRP 標(biāo)記探針或抗體，應(yīng)避免使用 NaN?；若必須使用，其濃度不得超過 0.01%。

8.   建議進(jìn)口抗體使用濃度：一抗 1:1000 - 1:4000，二抗 1:2000 - 1:5000?？贵w濃度過高可能導(dǎo)致高背景或條帶缺失。

9.   ECL Substrate A 液與 Peroxide Solution B 液具有生物毒性，操作時(shí)需穿戴實(shí)驗(yàn)服、佩戴一次性手套，避免接觸皮膚或吸入。

特別聲明：本產(chǎn)品僅限科研用途，嚴(yán)禁用于人體、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或其他非科研領(lǐng)域。