Waters色譜柱使用注意事項(xiàng)如下:
1、安裝與連接:
流向標(biāo)識(shí):
色譜柱通常標(biāo)有流向箭頭,需按箭頭方向正確安裝,避免反沖。
連接管路需與色譜柱接頭匹配,避免因匹配不佳導(dǎo)致柱效下降或滲漏。
初始沖洗:
新色譜柱安裝前,需用純有機(jī)溶劑(如乙腈或甲醇)以低流速(0.1 mL/min)沖洗,再逐步提高流速至常規(guī)分析流速,以去除柱內(nèi)雜質(zhì)并避免氣泡進(jìn)入檢測(cè)系統(tǒng)。
2、流動(dòng)相與平衡
流動(dòng)相兼容性:
更換流動(dòng)相前,需確保新流動(dòng)相與色譜柱內(nèi)當(dāng)前溶劑兼容。若流動(dòng)相含緩沖鹽,需先用5倍柱體積的水/有機(jī)溶劑混合液沖洗,再引入緩沖流動(dòng)相。
避免流動(dòng)相中鹽濃度過高時(shí)直接使用高比例有機(jī)相,以防鹽析出導(dǎo)致色譜柱堵塞。
平衡時(shí)間:
反相色譜柱需用至少10倍柱體積的流動(dòng)相平衡,直至壓力與基線穩(wěn)定。
3、操作條件控制:
壓力與流速:
避免壓力急劇變化,調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)緩慢進(jìn)行。流速需根據(jù)色譜柱規(guī)格調(diào)整,避免超過色譜柱的*大允許壓力。
溫度管理:
避免溫度循環(huán)變化,柱溫升高可降低系統(tǒng)壓力,但不宜通過提高柱溫過度降低壓力。
pH范圍:
反相色譜柱推薦pH范圍為1-12,但極*pH條件(如pH≥8)會(huì)加速鍵合相水解和硅膠溶解,需降低使用溫度并縮短操作時(shí)間。
4、樣品處理
樣品凈化:
樣品中的雜質(zhì)是色譜柱污染的主要來源。建議使用固相萃?。?/font>SPE)小柱或超臨界流體萃?。⊿FE)系統(tǒng)對(duì)樣品進(jìn)行凈化。
樣品需用0.2 μm濾膜過濾,確保濾膜材料與樣品溶劑兼容,避免濾膜溶解污染色譜柱。
溶劑選擇:
樣品溶劑需與流動(dòng)相兼容,避免進(jìn)樣后發(fā)生沉淀或溶劑不互溶。建議使用流動(dòng)相或比流動(dòng)相洗脫強(qiáng)度弱的溶液溶解樣品,以獲得優(yōu)異峰形和檢測(cè)靈敏度。
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