結構設計
· 物鏡與載物臺位置關系
o 正置生物顯微鏡的物鏡位于載物臺上方,觀察時,物鏡自上而下對樣品進行觀察。這種設計使得顯微鏡的整體結構較為常規(guī),符合大多數(shù)人對傳統(tǒng)顯微鏡的認知。其物鏡與載物臺之間的距離相對固定,通過調(diào)節(jié)粗準焦螺旋和細準焦螺旋來改變物鏡與樣品之間的距離以實現(xiàn)聚焦。
o 倒置生物顯微鏡的物鏡則位于載物臺下方,從下往上對樣品進行觀察。這種設計是為了適應特定的觀察需求,例如觀察培養(yǎng)皿中的細胞等。它打破了傳統(tǒng)顯微鏡的結構布局,使得載物臺上方有更開闊的空間,便于放置較大的培養(yǎng)容器。
· 載物臺特點
o 正置生物顯微鏡的載物臺通常較小且較為平整,主要用于放置載玻片。載玻片的尺寸相對固定,一般為 75mm×25mm,載物臺能夠穩(wěn)定地承載載玻片,并通過移動尺來精確控制載玻片的位置,便于對樣品的不同區(qū)域進行觀察。
o 倒置生物顯微鏡的載物臺較大,并且需要具備較好的透光性,因為光線要從載物臺下方穿過樣品到達物鏡。它可以放置培養(yǎng)皿、多孔板等較大的容器,適用于細胞培養(yǎng)過程中的實時觀察。載物臺的移動方式也較為靈活,能夠滿足對不同位置細胞的觀察需求。
成像原理
· 光路傳播方向
o 正置生物顯微鏡的光線從載物臺下方的光源發(fā)出,向上穿過樣品,然后經(jīng)過物鏡、目鏡,最終進入觀察者的眼睛。光線的傳播路徑相對直接,符合傳統(tǒng)的光學成像原理。
o 倒置生物顯微鏡的光線同樣從光源發(fā)出,但由于物鏡在載物臺下方,光線先向上穿過樣品,再經(jīng)過下方的物鏡進行第一次成像,然后經(jīng)過一系列光學元件和目鏡,最終成像供觀察者觀察。其光路傳播方向與正置顯微鏡相反,這種設計是為了適應其特殊的結構布局。
· 成像特點
o 正置生物顯微鏡由于物鏡距離樣品較近,能夠提供較高的放大倍數(shù)和較好的分辨率,適用于觀察較小的、薄的樣品,如組織切片等。在高倍鏡下,能夠清晰地觀察到細胞的細節(jié)結構,如細胞核、線粒體等。
o 倒置生物顯微鏡雖然也能提供一定的放大倍數(shù),但由于其物鏡與樣品之間的距離相對較遠,在某些情況下,分辨率可能會略低于正置顯微鏡。不過,它更側重于觀察活細胞的形態(tài)、生長狀態(tài)和運動情況等,對于較大范圍的細胞群體觀察具有優(yōu)勢。
應用場景
· 適用樣品類型
o 正置生物顯微鏡適用于觀察各種薄片樣品,如組織切片、血涂片、微生物涂片等。這些樣品通常需要經(jīng)過特殊的處理,如固定、染色等,以便更好地觀察其內(nèi)部結構。例如,在病理診斷中,醫(yī)生會使用正置生物顯微鏡觀察組織切片,以判斷是否存在病變細胞。
o 倒置生物顯微鏡主要用于觀察培養(yǎng)中的活細胞。細胞培養(yǎng)通常在培養(yǎng)皿或多孔板中進行,倒置顯微鏡可以直接對培養(yǎng)容器中的細胞進行觀察,無需將細胞取出,從而保證了細胞的生存環(huán)境和生理狀態(tài)。在細胞生物學研究中,科研人員經(jīng)常使用倒置生物顯微鏡觀察細胞的增殖、分化、凋亡等過程。
· 研究領域
o 正置生物顯微鏡在生物學、醫(yī)學、農(nóng)學等領域的基礎研究和教學中應用廣泛。在生物學實驗中,用于觀察植物細胞的結構、動物組織的切片等;在醫(yī)學教學中,幫助學生學習人體組織和細胞的形態(tài)結構。
o 倒置生物顯微鏡在細胞生物學、免疫學、腫瘤學等前沿研究領域發(fā)揮著重要作用。例如,在腫瘤研究中,科研人員可以使用倒置生物顯微鏡觀察腫瘤細胞的生長、遷移和侵襲等行為,為腫瘤的治療提供理論依據(jù)。
操作便捷性
· 樣品放置難度
o 正置生物顯微鏡放置樣品相對簡單,只需將載玻片平穩(wěn)地放置在載物臺上,然后用移動尺固定即可。操作過程直觀,容易掌握,適合初學者使用。
o 倒置生物顯微鏡由于載物臺較大且需要放置培養(yǎng)皿等容器,樣品放置時需要更加小心,以確保培養(yǎng)容器平穩(wěn)且不會晃動。同時,還需要注意避免培養(yǎng)容器中的液體溢出,影響觀察效果。
· 聚焦調(diào)節(jié)難度
o 正置生物顯微鏡的聚焦調(diào)節(jié)相對容易,通過調(diào)節(jié)粗準焦螺旋和細準焦螺旋可以快速找到樣品的清晰圖像。特別是在低倍鏡下,聚焦過程較為簡單。
o 倒置生物顯微鏡的聚焦調(diào)節(jié)可能會稍微復雜一些,因為其物鏡在載物臺下方,調(diào)節(jié)時需要更加小心,以避免物鏡與培養(yǎng)容器碰撞。在高倍鏡下,聚焦難度會進一步增加。
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