干貨分享 | 實(shí)驗(yàn)室移液精準(zhǔn)度受哪些因素影響,又該如何解決?
實(shí)驗(yàn)室移液精準(zhǔn)度對(duì)實(shí)驗(yàn)成功起著關(guān)鍵作用,哪怕微小的偏差都可能干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。從移液器的校準(zhǔn)、操作的規(guī)范,到吸頭的合理選擇,每個(gè)環(huán)節(jié)都不容忽視。
愛(ài)津生物擁有豐富多樣的吸頭產(chǎn)品,能與多種移液器適配,為提升移液精準(zhǔn)度提供有效助力。
01 移液精度的影響因素與控制
精準(zhǔn)移液需系統(tǒng)控制誤差來(lái)源,包括可預(yù)測(cè)的系統(tǒng)誤差與操作相關(guān)的隨機(jī)誤差。
①系統(tǒng)誤差控制
定期校準(zhǔn)
常規(guī)實(shí)驗(yàn)室每6個(gè)月校準(zhǔn)一次,高頻使用場(chǎng)景(如制藥企業(yè)QC)需縮短至每3個(gè)月。
吸頭匹配
使用非原裝或磨損吸頭可能導(dǎo)致密封性下降,引發(fā)體積偏差。建議選擇適配性好的吸頭,愛(ài)津通用吸頭能適配市面上大部分移液器,類(lèi)型豐富多樣,包括濾芯和非濾芯、加長(zhǎng)和不加長(zhǎng)、普通和低吸附等,合適的吸頭能有效降低實(shí)驗(yàn)誤差,提高數(shù)據(jù)可靠性。
溫度平衡
實(shí)驗(yàn)前將液體與移液器置于相同環(huán)境溫度下。
海拔修正
高海拔地區(qū)需通過(guò)校準(zhǔn)補(bǔ)償氣壓變化對(duì)空氣置換式移液器的影響。
②隨機(jī)誤差控制
浸入深度
吸頭浸入液面1-3mm,深度差異超過(guò)4mm可導(dǎo)致±3%體積波動(dòng)。
吸液速度
緩慢釋放活塞以避免氣泡產(chǎn)生,分液時(shí)停頓1秒確保排空。
吸頭選擇
低殘留吸頭可大幅減少樣本浪費(fèi),過(guò)濾吸頭能有效阻隔氣溶膠。愛(ài)津低吸附吸頭采用疏水涂層設(shè)計(jì),能減少液體殘留,從而提高珍貴樣品的回收率。
表面處理
寬孔吸頭適用于脆弱細(xì)胞或大分子樣本。
02 吸頭的正確選擇
①標(biāo)準(zhǔn)吸頭
標(biāo)準(zhǔn)吸頭是一種多用途吸頭,適用于許多具有各種性能要求的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,從高精度到大容量液體的移取。愛(ài)津吸頭中的通用吸頭常用于常規(guī)液體轉(zhuǎn)移,可滿(mǎn)足多種常規(guī)實(shí)驗(yàn)需求。無(wú)菌標(biāo)準(zhǔn)吸頭可用于要求高的應(yīng)用,如細(xì)胞培養(yǎng)。
②濾芯吸頭
內(nèi)置濾芯阻擋氣溶膠,同時(shí)防止液體意外進(jìn)入移液器腔體,防止交叉污染,是PCR測(cè)序?qū)嶒?yàn)的必需品。愛(ài)津?yàn)V芯吸頭具備此功能,且能有效保護(hù)移液器,延長(zhǎng)其使用壽命。
③低吸附吸頭
疏水表面減少液體粘附,適合珍貴樣品(如熒光標(biāo)記探針),可減少試劑浪費(fèi)。愛(ài)津低吸附吸頭正是此類(lèi)產(chǎn)品,能顯著降低樣品損失。
④大口吸頭
吸頭孔徑擴(kuò)大,可避免剪切力損傷脆弱細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞)或大分子(如基因組DNA)。
⑤加長(zhǎng)吸頭
吸頭長(zhǎng)度增加,適用于深窄容器移液,避免移液器觸碰容器壁造成交叉污染。愛(ài)津加長(zhǎng)吸頭適用于高窄容器,對(duì)于深孔板、離心管、細(xì)長(zhǎng)瓶等容器,它能夠輕松抵達(dá)容器底部吸取液體,同時(shí)避免了因傾斜容器等帶來(lái)的操作難度。
此外,愛(ài)津生物還有專(zhuān)門(mén)用于凝膠點(diǎn)樣的吸頭,其末端更長(zhǎng)更細(xì),能精準(zhǔn)控制微量樣品的上樣量。在DNA/RNA電泳、蛋白質(zhì)電泳等實(shí)驗(yàn)中,使用凝膠點(diǎn)樣吸頭不僅簡(jiǎn)化了凝膠上樣過(guò)程,還能提高上樣精度,減少樣品浪費(fèi),讓實(shí)驗(yàn)操作更加高效。
在進(jìn)行培養(yǎng)基更換、批量試劑分裝等大體積液體轉(zhuǎn)移場(chǎng)景時(shí),愛(ài)津的5ml、10ml大容量吸頭可減少頻繁吸液操作,能大幅縮短操作時(shí)間,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和一致性,非常適用于高通量實(shí)驗(yàn)。
03 標(biāo)準(zhǔn)化操作流程與技巧
①基礎(chǔ)移液技術(shù)
正向移液法(水溶液)
按下第一停點(diǎn),垂直浸入液面1- 3mm;
緩慢釋放活塞吸液,輕觸容器壁去除多余液體;
按壓第一停點(diǎn)分液,停頓1秒后按壓第二停點(diǎn)排空。
反向移液法(粘性/易起泡液體)
直接按下第二停點(diǎn)吸液,避免氣泡;
分液時(shí)按至第一停點(diǎn),保留殘留液體以減少飛濺。
重復(fù)移液法(批量分液)
一次吸液后重復(fù)按壓第一停點(diǎn)分配,效率提升50%以上。
②人體工程學(xué)優(yōu)化
姿勢(shì)規(guī)范
坐姿:座椅高度調(diào)整至小臂與桌面平行,手肘彎曲90°。
握持:保持移液器豎直,避免傾斜導(dǎo)致液體倒流污染活塞。
工具選擇
電動(dòng)移液器:減少手動(dòng)按壓頻率,適合每日處理5塊以上微孔板。
輕量化設(shè)計(jì):選擇重量低于200g的型號(hào)以降低肩部負(fù)擔(dān)。
04 維護(hù)與校準(zhǔn)規(guī)范
①日常維護(hù)
清潔
每日用70%乙醇擦拭外殼,每周拆卸吸頭圓錐部清除殘留。
潤(rùn)滑
每3個(gè)月用專(zhuān)用硅脂保養(yǎng)活塞與密封圈。
②校準(zhǔn)驗(yàn)證
稱(chēng)重法
移取10μL純水稱(chēng)重,重復(fù)10次,平均值與理論值(10mg)偏差應(yīng)<±0.5%。
交叉驗(yàn)證
同一液體用兩支移液器移取,結(jié)果差異需<3%。
③消毒處理
化學(xué)消毒
70%乙醇擦拭表面,強(qiáng)酸/堿污染后需用蒸餾水沖洗干燥。
滅菌
可高溫滅菌型號(hào)(如部分手動(dòng)移液器)需在121℃下處理20分鐘,電子型號(hào)采用化學(xué)熏蒸。
05 提高準(zhǔn)確性的6個(gè)步驟
①潤(rùn)洗移液器吸頭
在轉(zhuǎn)移液體之前,至少吸出并排出一定量的液體三次。未能預(yù)潤(rùn)洗吸頭會(huì)增加吸頭空間內(nèi)的蒸發(fā),這會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)移量顯著降低。預(yù)濕增加了吸頭內(nèi)的濕度,從而減少了蒸發(fā)。
②在溫度平衡下工作
移液前,讓液體和設(shè)備平衡至環(huán)境溫度??諝庵脫Q移液器轉(zhuǎn)移的液體量隨著液體的相對(duì)濕度和蒸汽壓而變化,這兩者都與溫度有關(guān)。在恒溫下工作可最大限度地減少移液體積的變化。
③檢查移液管出液口是否有液滴
在轉(zhuǎn)移液體之前,通過(guò)接容器側(cè)面小心地從出液口外部去除滴液,確保遠(yuǎn)離出液口開(kāi)口,以避免液體從出液口吸出。轉(zhuǎn)移后,在釋放活塞之前,通過(guò)將出液口接觸容器側(cè)面來(lái)排出出液口內(nèi)的任何殘留液體。表面張力有助于將殘留液體從出液口吸出。
④根據(jù)液體選擇正向或反向移液
比反向模式在所有粘性或揮發(fā)性液體中產(chǎn)生更好的準(zhǔn)確性和精確度。反向模式通常會(huì)導(dǎo)致過(guò)量轉(zhuǎn)移。因此,建議評(píng)估實(shí)驗(yàn)中可能的過(guò)量轉(zhuǎn)移的影響,并在需要時(shí)進(jìn)行調(diào)整。選擇合適的吸頭,如愛(ài)津濾芯吸頭、低吸附吸頭等將活塞壓至第一停點(diǎn),將浸入液體中,釋放活塞以吸取。將移液器從液體中取出,將活塞壓至第二停點(diǎn)以分配液體。標(biāo)準(zhǔn)(或正向)模式移液器,可更好地配合不同移液模式,提高移液準(zhǔn)確性。
⑤使用正確的浸沒(méi)深度
抽吸前,將吸頭充分浸入液面下方。使用相同的深度進(jìn)行相同體積的抽吸。浸入不足,尤其是使用大體積吸頭時(shí),可能會(huì)導(dǎo)致吸入空氣。浸入過(guò)多可能會(huì)導(dǎo)致液體粘附在吸頭外部。吸頭接觸容器底部可能會(huì)限制抽吸。
⑥使用正確的移液器吸頭
建議使用與移液器匹配的專(zhuān)用移液頭。若型號(hào)不匹配,可能導(dǎo)致體積偏差或重復(fù)性差。優(yōu)質(zhì)移液頭具備三大核心優(yōu)勢(shì):精密氣密設(shè)計(jì)防泄漏,高品質(zhì)材料無(wú)瑕疵,嚴(yán)格品控保穩(wěn)定,可助力實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)高效進(jìn)行。
移液技術(shù)是科研嚴(yán)謹(jǐn)性的微觀體現(xiàn)。通過(guò)科學(xué)選型、規(guī)范操作、人體工程學(xué)優(yōu)化及嚴(yán)格的維護(hù)校準(zhǔn),可顯著提升實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,同時(shí)降低職業(yè)健康風(fēng)險(xiǎn)。愛(ài)津生物致力于為實(shí)驗(yàn)室提供多樣的移液解決方案,我們的吸頭產(chǎn)品能滿(mǎn)足不同實(shí)驗(yàn)需求,與多種移液器適配良好,有效提高移液精準(zhǔn)度。
Company Profile
關(guān) 于 愛(ài) 津
愛(ài)津生物,成立于2009年
致力于研發(fā)生產(chǎn)生物科研領(lǐng)域所需的優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品
專(zhuān)注生命科學(xué)、生物工程技術(shù)和實(shí)驗(yàn)室耗材
堅(jiān)持不斷優(yōu)化、品質(zhì)至上的原則,將更值得信賴(lài)的產(chǎn)品交付于您
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