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酶標(biāo)分析儀:從原理到應(yīng)用的全面解析-賽默飛

來源:賽默飛世爾科技(中國)有限公司   2025年07月01日 10:22  


 


賽默飛全自動酶標(biāo)分析儀可測量包括光吸收、熒光、化學(xué)發(fā)光或時間分辨熒光等各種信號。包括專用酶標(biāo)儀和可升級的多功能酶標(biāo)儀,既可滿足您當(dāng)前的實驗需要,也可滿足您實驗室未來的升級需要。賽默飛全自動酶標(biāo)分析儀具有多種功能,可幫助您節(jié)省時間并最大限度提高工作效率,如自我診斷和自動校準(zhǔn)、易用的 SkanIt 電腦軟件以及自動化兼容。


 

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哪款酶標(biāo)分析儀更適合您?

賽默飛酶標(biāo)儀具有靈活性、高性能和易用性??商峁┌ü馕?、熒光、化學(xué)發(fā)光、時間分辨熒光和 AlphaScreen等檢測模式。您可根據(jù)應(yīng)用方向、樣品量和總體實驗室需求選擇適合您的酶標(biāo)儀。還可查看以下儀器分類和相關(guān)參數(shù)對比,更能通過酶標(biāo)儀型號了解更多詳細信息。

 

酶標(biāo)分析儀選擇指南

1、Multiskan FC:傳承40多年經(jīng)驗設(shè)計而成,著名 Multiskan品牌的易用型酶標(biāo)儀。該儀器通過創(chuàng)新的檢測設(shè)計和內(nèi)置的自我診斷,可在 ELISA 檢測或各種其他研究和常規(guī)應(yīng)用中提供成熟性能和可靠結(jié)果。

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2、Multiskan SkyHigh:全波長酶標(biāo)儀是各種終點法、動力學(xué)和光譜檢測的理想選擇。配備適合獨立使用的大觸摸屏,并配有適用于最常見 DNA、RNA 和蛋白檢測的現(xiàn)成檢測方案。 提供對 Thermo Fisher Connect 和 Microsoft OneDrive 云端工具的訪問,以實現(xiàn)安全和遠程數(shù)據(jù)管理。

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3、Varioskan ALF:一款通用型多功能酶標(biāo)儀,可實現(xiàn)多種檢測,包括UV/Vis光吸收、熒光和化學(xué)發(fā)光檢測。SkanIt PC軟件具有經(jīng)過驗證的程序和可視化的工作流程,易于使用和可輕松完成數(shù)據(jù)分析。

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4、Varioskan LUX:提供多達五種測量技術(shù)的多功能酶標(biāo)儀,包括光吸收、熒光、化學(xué)發(fā)光、時間分辨熒光和 Alpha。在所有應(yīng)用中均具有出色性能,它還提供了多種自動化功能,可幫助您節(jié)省時間并減少實驗中的常見錯誤。

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酶標(biāo)儀原理

普通光吸收酶標(biāo)儀的工作原理主要基于光電比色法,也稱為分光光度計。其基本原理是利用光源發(fā)出的光波,經(jīng)過濾光片或光柵變成一束單色光,然后進入微孔板中的待測樣品中。當(dāng)樣品中的分子吸收特定波長的光時,會根據(jù)其濃度產(chǎn)生不同的吸光值。酶標(biāo)儀通過檢測這些吸光值來定量分析樣品中的成分。

 

普通光吸收酶標(biāo)儀的核心功能是利用酶聯(lián)免疫技術(shù),通過抗原和抗體的特異性反應(yīng)進行檢測。具體來說,酶標(biāo)儀將抗原或抗體與酶結(jié)合形成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留了免疫活性,又保留了酶的活性。當(dāng)酶標(biāo)抗原或抗體與固相載體上的相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng)并結(jié)合后,通過洗滌的方法將未結(jié)合的物質(zhì)去除,從而形成穩(wěn)定的抗原-抗體-酶復(fù)合物。然后,酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測的信號,如顏色變化或熒光強度,通過測量這些信號來定量分析樣品中的目標(biāo)分子。

 

此外,酶標(biāo)儀可以進行多種檢測模式,包括吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時間分辨熒光(TRF)、Alpha和化學(xué)發(fā)光(Lum)等。這些檢測模式使得酶標(biāo)儀在生物醫(yī)學(xué)研究、臨床診斷、藥物篩選和食品安全監(jiān)測等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。

 

酶聯(lián)免疫技術(shù)在酶標(biāo)儀中的應(yīng)用機制有哪些詳細步驟?

酶聯(lián)免疫技術(shù)(ELISA)在酶標(biāo)儀中的應(yīng)用機制主要包括以下幾個詳細步驟:

1. 固相載體的準(zhǔn)備:首先,將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體。這一步驟確保抗體能夠固定在載體表面,并保持其免疫活性。

2. 樣品處理:將待檢樣本加入固相載體,使其與表面吸附的抗體或抗原發(fā)生反應(yīng)。如果檢測的是抗原,受檢抗原和酶標(biāo)抗原會競爭與固相抗體結(jié)合。

3. 洗滌:反應(yīng)完成后,需要進行洗滌步驟,以去除未結(jié)合的物質(zhì)。這一步驟是確保只有特異性結(jié)合的復(fù)合物留在固相載體上。

4. 加入酶標(biāo)抗體:隨后,加入酶標(biāo)記的抗體(如酶標(biāo)抗抗體),使其與目標(biāo)抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。酶標(biāo)抗體也保留了其免疫活性和酶的活性。

5. 顯色反應(yīng):加入酶促底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)。通過觀察顯色反應(yīng)的程度,可以定量分析待測物質(zhì)的含量。

6. 信號檢測:最后,使用酶標(biāo)儀檢測顯色反應(yīng)產(chǎn)生的信號。酶標(biāo)儀通過測量吸光度來定量分析樣品中的目標(biāo)物質(zhì)。

 

酶標(biāo)儀的不同檢測模式(吸光度、熒光強度、時間分辨熒光、Alpha和化學(xué)發(fā)光)各自的工作原理和應(yīng)用場景是什么?

酶標(biāo)儀的不同檢測模式包括吸光度、熒光強度、時間分辨熒光、Alpha和化學(xué)發(fā)光,各自的工作原理和應(yīng)用場景如下:

 

    1. 吸光度檢測

· 工作原理:吸光度檢測是通過測量樣品在特定波長下的光吸收值來定量分析樣品中的生物分子含量。當(dāng)光通過樣品時,樣品會吸收一定量的光能量,剩余的光能量被檢測器測量,從而計算出樣品的吸光度值。

· 應(yīng)用場景:吸光度檢測廣泛應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)技術(shù)中,用于測定核酸、蛋白質(zhì)等生物分子的濃度。此外,它還用于細胞增殖和毒性檢測等生物學(xué)研究。

 

     2. 熒光強度檢測:

· 工作原理:熒光強度檢測是基于樣品中熒光物質(zhì)的濃度與其發(fā)出的熒光強度成正比的原理。通過測量熒光信號的強度,可以定量分析樣品中的目標(biāo)分子含量。

· 應(yīng)用場景:熒光強度檢測在生物學(xué)研究中應(yīng)用廣泛,包括生物大分子定量、酶活性分析、熒光免疫分析、細胞學(xué)分析(如細胞增殖、細胞毒理、細胞吸附等)和分子間相互作用研究。

 

     3. 時間分辨熒光(TRF):

· 工作原理:時間分辨熒光檢測利用熒光共振能量傳遞(FRET)技術(shù),通過測量不同時間延遲下的熒光信號強度來提高檢測靈敏度和特異性。這種方法可以減少背景信號的干擾,提高檢測的準(zhǔn)確性。

· 應(yīng)用場景:時間分辨熒光檢測常用于高靈敏度的生物分子定量分析,如蛋白質(zhì)相互作用研究和核酸雜交實驗。

 

     4. Alpha檢測:

· 工作原理Alpha技術(shù),即Amplified Luminescent Proximity Homogeneous Assay (Amplified Luminescence Proximity Homogeneous Assay),使用供體微珠和受體微珠。供體微珠包含光敏劑,在680nm激光照射下,光敏劑將氧分子轉(zhuǎn)化為單線態(tài)氧。如果受體微珠在附近(<200nm),單線態(tài)氧會觸發(fā)受體微珠上的化學(xué)反應(yīng),最終產(chǎn)生光信號。這個過程基于微珠之間的接近程度來檢測相互作用?。

· 應(yīng)用場景Alpha技術(shù)具有高靈敏度和免洗板的優(yōu)點,適用于藥物發(fā)現(xiàn)階段的高通量篩選。該技術(shù)已經(jīng)得到國內(nèi)外藥物研發(fā)企業(yè)和科研院所的廣泛認(rèn)可。Alpha技術(shù)家族包括AlphaScreen和AlphaLISA,后者特別適用于血清/血漿樣品的檢測,能夠有效避免熒光背景干擾。

 

     5. 化學(xué)發(fā)光檢測:

· 工作原理:化學(xué)發(fā)光檢測是基于化學(xué)發(fā)光反應(yīng)和酶標(biāo)技術(shù)的結(jié)合。通過檢測化學(xué)發(fā)光信號來定量分析樣本中的特定物質(zhì)。發(fā)光物質(zhì)在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體,直接標(biāo)記在抗原或抗體上,或酶作用于發(fā)光底物。

· 應(yīng)用場景:化學(xué)發(fā)光檢測廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域(報告基因檢測),農(nóng)業(yè)中的農(nóng)藥殘留檢測和食品安全檢測。此外,它還用于臨床實驗室中的各種生物標(biāo)志物的定量分析。結(jié)合熒光的生物發(fā)光共振能量轉(zhuǎn)移(BRET),可進行細胞內(nèi)實時蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用檢測。

 

 

 

 

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