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血清存在的問題及解決方法

來源:上海滬峰生物科技有限公司   2012年08月08日 16:01  

在實驗室操作中要注意及處理方法

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1. 血清保存: 建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于 4℃時,請勿超過一個月。若您 一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

2. 解凍血清的方法: 建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于 2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫 下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3. 血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理? 血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因, 但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成, 而血纖 維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之 一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以 400g 稍微離心,上清液即可接 著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。 我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物, 因為它可能會阻塞 您的過濾膜。

4. 為什么要熱滅活血清? 加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組 胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng) ES 細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦 使用熱滅活血清。

5. 有必要做熱滅活嗎? 實驗顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對 細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質(zhì)量, 而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在 倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”, 常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在 37℃ 環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。 因此我們建議您, 若非必須, 您可以不需要做熱處理這一步。 如此一來, 不但節(jié)省您寶貴的時間, 更確保血清的質(zhì)量!

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