內毒素對細胞培養(yǎng)的影響

——BioProE優(yōu)化處理

內毒素對細胞培養(yǎng)的影響

在細胞培養(yǎng)的精密世界中，一個微小的污染或者條件的非zuiyou都可能拖慢整個實驗的進程。今天，我們要聚焦的正是這個不容忽視的隱形威脅——內毒素。

內毒素：細胞培養(yǎng)的“隱形刺客"

內毒素（如下圖），這個聽起來有些陌生的名詞，實際上在細胞培養(yǎng)中扮演著不容忽視的角色。內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁的一種成分，當細菌死亡或細胞壁破裂后，內毒素會被釋放出來。這些微小的分子，雖然肉眼不可見，但卻能對細胞產生巨大的影響。具體有哪些影響呢，例如在細胞培養(yǎng)過程中，內毒素的污染可能導致細胞生長緩慢、細胞毒性增加，甚至影響瞬時轉染的效率。想象一下，您精心設計的實驗，因為內毒素的污染而功虧一簣，是不是非常令人沮喪？對于追求精準與高效的現(xiàn)代生物研究而言，內毒素控制成

為了不可回避的問題。再進一步看看影響到什么程度：

 內毒素對細胞培養(yǎng)的影響

1. 免疫和炎癥反應： 內毒素可以激活細胞的免疫反應，導致炎癥因子的釋放，如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白細胞介素-1β（IL-1β）等。這些炎癥因子可以影響細胞的生理功能，導致細胞內信號通路的紊亂，甚至可能引發(fā)細胞凋亡。

2. 細胞生長和代謝的影響： 高水平的內毒素暴露可能影響細胞的生長和代謝。細胞在免疫激活狀態(tài)下可能會減緩生長，因為它們需要將資源用于炎癥反應。此外，內毒素可能干擾細胞的代謝途徑，影響蛋白質合成、DNA合成等。

3. 實驗結果的暗黑時刻：內毒素的存在使實驗結果變得不穩(wěn)定，可靠性大打折扣，需要多次重復結果以保證其數據的有效性。

4. 影響細胞因子和蛋白質的表達：內毒素的存在可能導致細胞產生炎癥相關的細胞因子和蛋白質的表達增加。這可能對特定的研究課題產生影響，如細胞信號通路、蛋白質相互作用等的研究。

5. 內毒素對瞬時轉染的影響：內毒素的存在會極大程度地影響轉染效率，尤其是瞬時轉染。由于內毒素的兩親性和負電荷性，性質類似于DNA，因此在質粒純化中會伴隨質粒一同被純化出來。這些內毒素在轉染過程中可能與轉染試劑和質粒形成不穩(wěn)定的復合物，從而降低質粒與細胞的結合效率和轉染效率。內毒素含量越低，轉染效率也越高。特別是在使用陽離子聚合物轉染試劑時，內毒素的影響更為顯著，所以確保細胞培養(yǎng)液中低類毒素含量是非常重要的。

使用BioProE的DPBS和DMEM高糖培養(yǎng)基無需擔心以上問題。