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人表皮永生化細(xì)胞HACAT培養(yǎng)條件
人表皮永生化細(xì)胞HACAT是一種重要的研究工具，廣泛應(yīng)用于皮膚生物學(xué)和分化研究領(lǐng)域。以下是對HACAT細(xì)胞的詳細(xì)介紹：
1、細(xì)胞來源：HACAT細(xì)胞源自一位62歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚組織。
2、細(xì)胞特性：HACAT細(xì)胞保留了角質(zhì)形成細(xì)胞的分化能力，與正常人角質(zhì)形成細(xì)胞分化特性相似，可以繁殖超過150代，但不具有腫瘤特性。該細(xì)胞在顯微鏡下呈典型上皮細(xì)胞樣，角蛋白、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關(guān)蛋白表達(dá)呈陽性。
3、培養(yǎng)條件：人表皮永生化細(xì)胞HACAT細(xì)胞推薦使用DMEM培養(yǎng)基，含有10%的FBS，在37度、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。此外，還可以使用89%MEM(abs9503)+10%胎牛血清優(yōu)級(abs972)+1%雙抗(abs9244)+0.2%牛腦垂體提取物(abs9119)作為營養(yǎng)體系。
4、注意事項(xiàng)：HACAT細(xì)胞較難消化，胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%)含酚紅消化時間可能需要5min或更久，具體時間因細(xì)胞不同分化程度和融合度而異。傳代時建議按1:3至1:5的比例進(jìn)行，傳代周期通常為2-3天。如果細(xì)胞長滿后沒有及時傳代，任其過度生長，可能造成不可逆轉(zhuǎn)的損傷。
總的來說，人表皮永生化細(xì)胞HACAT細(xì)胞作為一種重要的研究工具，在皮膚生物學(xué)和分化研究領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。
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