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白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)

來源:上海尚寶生物科技有限公司   2024年10月15日 11:57  

白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)

產(chǎn)品貨號: BA1555

 

產(chǎn)品規(guī)格: 100T

 

產(chǎn)品簡介

總蛋白(Total?Protein,TP)由白蛋白和球蛋白組成,檢測白蛋白的方法有雙縮脲法、色氨酸法、染料結(jié)合法。檢測白蛋白的染料結(jié)合法可采用溴甲酚綠或溴甲酚紫染料結(jié)合,上述染料對白蛋白具有高度的親和力,通常監(jiān)測染料與白蛋白結(jié)合的初速率,該速率與樣品中白蛋白濃度成正比。白蛋白檢測試劑盒(溴甲酚紫微板法)檢測原理是在酸性環(huán)境下,白蛋白分子帶正電荷,與帶負電荷的溴甲酚紫(Bromocresol?purple,BCP)結(jié)合生成綠色復合物,在603nm處有吸收波,該復合物的吸光度與白蛋白濃度成正比,與同樣處理的白蛋白標準比較,求得待測樣品中白蛋白濃度。本試劑盒多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的蛋白含量測定,該法操作簡單、方法特異,既可手工操作,又可采用自動分析儀檢測。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

 

產(chǎn)品組成:

產(chǎn)品名稱

100T

保存條件

試劑(A): BCP試劑

25ml

4℃,避光

試劑(B): 白蛋白標準

20mg

室溫

試劑(C):白蛋白標準配制液

10ml

室溫

 

自備材料:

1. 離心管、小試管

2. 96孔板

3. 酶標儀

 

操作步驟(僅供參考)

1. 取白蛋白標準配制液或稀釋液加入到白蛋白標準中,充分溶解后配制成40mg/ml的白蛋白標準溶液,配制后可立即使用,溶解后的白蛋白標準溶液應-20℃保存。亦可按自己試驗要求繼續(xù)進行稀釋,如稀釋至1mg/ml。特別提示:待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,白蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中,亦取白蛋白標準溶解于蔗糖中。一般也可以用NaClPBS作為溶解白蛋白標準品的稀釋液。

2. 樣本處理:血清、血漿樣本直接取檢測。對于組織樣本,組織質(zhì)量(g):生理鹽水比例,加入生理鹽水或PBS,冰浴下勻漿后,離心,取上清待檢。

3. 白蛋白加樣操作,按下表依次加入試劑:

加入物(μL

空白孔

標準孔

 待測孔

白蛋白標準配制液

5

-

-

白蛋白標準溶液(40mg/ml

-

5

-

待檢樣品(血清、血漿、組織勻漿液)

-

-

5

BCP試劑

250

250

250

4. 先在酶標儀處以空白管調(diào)零,逐管加入BCP試劑,并立即混勻。

5. 放置(30±3)s,讀取標準孔和各待測孔的吸光度。

6. 當遇到脂血混濁,可設(shè)樣本空白孔”:取待測樣品加入白蛋白標準配制液,予以校正。

 

計算:

白蛋白(g/L)=(待測孔吸光度/標準孔吸光度)×白蛋白標準液濃度(g/L)

 

參考區(qū)間:

健康成年人

36~46g/L

 

注意事項:

1. 白蛋白標準粉末溶解于白蛋白標準配制液后,即獲得白蛋白標準原液,該原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標準原液-20℃長期保存。

2. 如果沒有分光光度計,也可以使用酶標儀測定。使用酶標儀測定蛋白濃度時,每個試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著增加。

3. 本法線性范圍10~50g/L,在10~40g/L呈良好線性范圍。

4. CV可達0.45%,回收率可達99.3%~102%,平均回收率達100.5%。

5. 該法測定正常樣本的批間變異系數(shù)為6.3%

 

有效期:6個月有效。白蛋白標準配制成溶液后應-20℃凍存。


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