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什么是熒光原位雜交技術(shù)
你知道什么是熒光原位雜交嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！
一、FISH的定義
熒光原位雜交技術(shù)（FISH）是一種利用熒光信號(hào)檢測(cè)探針的原位雜交技術(shù)。它將熒光信號(hào)的高靈敏度、安全性及直觀性和原位雜交的高特異性結(jié)合起來(lái)，通過(guò)熒光標(biāo)記的核酸探針與待測(cè)樣本核酸進(jìn)行原位雜交。在熒光顯微鏡下對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行辨別和計(jì)數(shù)，從而對(duì)染色體或基因異常的細(xì)胞和組織樣本進(jìn)行檢測(cè)和診斷，為各種基因相關(guān)疾病的分型、預(yù)前和預(yù)后提供準(zhǔn)確的依據(jù)。
二、FISH的原理
FISH分為直接法和間接法。
直接法是在已知堿基序列的核酸探針上標(biāo)記熒光素，在組織切片、間期細(xì)胞及染色體標(biāo)本上與靶核酸進(jìn)行原位雜交。因所形成的雜交體帶有熒光素。故可在熒光顯微鏡下直接觀察。
間接法使用非熒光物質(zhì)標(biāo)記的核酸探針。如生物素或地高x等標(biāo)記探針，再通過(guò)親和連接或免疫反應(yīng)帶入熒光物質(zhì)來(lái)檢測(cè)雜交體的存在。
廣義上講，F(xiàn)ISH靶序列可以是DNA或RNA，既可以用來(lái)進(jìn)行基因組層面的研究，也可以進(jìn)行表達(dá)層面的研究。
目前常用的熒光素有異硫氰酸熒光素、得克薩斯紅、羅丹明及其衍生物四甲基異硫氰酸羅丹明等。
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