簡(jiǎn)析氯霉素試劑盒要求及使用注意事項(xiàng)
氯霉素(Chloramphenicol)是一種抗生素。目前用人工方法合成,已廣泛的應(yīng)用于動(dòng)物的各種傳染性疾病的治療,由于其具有廣譜性效果好以及相對(duì)廉價(jià)等特點(diǎn),用氯霉素治療家畜、禽疾病比較普遍。但是氯霉素有嚴(yán)重的副作用,它能抑制人體骨髓造血功能而引起再生障礙性貧血癥和粒狀白細(xì)胞缺乏癥,因此動(dòng)物性食品中的氯霉素殘留對(duì)人類的健康構(gòu)成了潛在的危害。美國(guó)和歐盟規(guī)定在動(dòng)物性的食品中不得檢出氯霉素。
試劑盒是以抗原-抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)。用氯霉素抗原包被微量反應(yīng)板,加入氯霉素標(biāo)準(zhǔn)品或樣品和酶結(jié)合物,游離氯霉素與酶標(biāo)板中的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合氯霉素抗體,沒(méi)有結(jié)合的酶結(jié)合物被洗去,再向孔中加入TMB,結(jié)合后的酶結(jié)合物將無(wú)色的TMB轉(zhuǎn)化為藍(lán)色的產(chǎn)物,加入終止液后顏色由藍(lán)變黃,用OD450nm酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè),吸光值與樣品中氯霉素含量成反比。
使用注意事項(xiàng):
1) 室溫低于20℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫(20- 25℃)會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。
2)在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感,避免直接暴露在光線下。
4) 混合要均勻,洗板(包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻)。
5) 反應(yīng)停止液為強(qiáng)酸性物質(zhì),避免接觸皮膚。
6)不要使用過(guò)了有效期的試劑盒,也不要稀釋或攙雜使用不同生產(chǎn)廠家的試劑盒這樣會(huì)引起靈敏度降低。
7) 試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃,切勿冷凍。
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