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未來已來 | 單細(xì)胞柔性分選系統(tǒng)Pala

來源:Bio-Techne   2024年05月27日 16:05  


在藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的動(dòng)態(tài)過程中,從開創(chuàng)性研究到工業(yè)規(guī)模生產(chǎn),效率以及數(shù)據(jù)的可靠性是每個(gè)階段的驅(qū)動(dòng)力。盡管技術(shù)進(jìn)步為當(dāng)今藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)的各個(gè)方面增添了光彩,但挑戰(zhàn)仍然存在,需要更新工具和技術(shù)來加快這一進(jìn)程。那么在細(xì)胞系開發(fā)中,特別是單克隆分離方面,我們?cè)撊绾螒?yīng)對(duì)這些挑戰(zhàn)?













1.什么是單克隆分離? 



單克隆是指基因相同的細(xì)胞群,也意味著它們需要來源于同一個(gè)細(xì)胞。經(jīng)過工程改造的細(xì)胞群需要進(jìn)行單獨(dú)分析并分選,這一過程也被稱為單克隆分離,是確保遺傳同致性的基本步驟。單克隆分離也驗(yàn)證了引入的基因改變和觀察到的表型之間的關(guān)系,并為后續(xù)步驟提供了可靠的基礎(chǔ)。


2.單克隆分離的現(xiàn)有技術(shù)和挑戰(zhàn)  


流式細(xì)胞分選(FACS)和有限稀釋法是兩種常用的單克隆分離技術(shù)。FACS是根據(jù)細(xì)胞的熒光特性分選細(xì)胞。一旦細(xì)胞被熒光標(biāo)記物標(biāo)記,將其引入到FACS儀器中,并根據(jù)特定的標(biāo)準(zhǔn)測(cè)量其熒光強(qiáng)度,從而決定是否分選細(xì)胞。值得注意的是,F(xiàn)ACS的分選過程是在高壓(30-70 psi)和高速流動(dòng)下進(jìn)行的,可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞損傷和應(yīng)激反應(yīng),從而影響分選后細(xì)胞的存活率1。另外,流動(dòng)池和管路的尺寸較小,堵塞也是傳統(tǒng)FACS長(zhǎng)期存在的一個(gè)問題。管路疏通會(huì)占用儀器大量的操作時(shí)間,推遲整體的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃。而且在非無菌環(huán)境中共用流體管路來操作,會(huì)大大增加污染的風(fēng)險(xiǎn)。

有限稀釋法是一種更加溫和的技術(shù),通過連續(xù)稀釋細(xì)胞懸液來降低細(xì)胞密度。雖然細(xì)胞不再受高壓力或依賴其熒光特性,但有限稀釋法是一個(gè)手動(dòng)的勞動(dòng)密集過程,極易出錯(cuò)。而且有限稀釋法的單細(xì)胞沉降概率要遵循泊松分布,導(dǎo)致整體單細(xì)胞效率低且不可靠2。

3.全自動(dòng)柔性單細(xì)胞分離儀Pala的優(yōu)勢(shì)


Pala單細(xì)胞分離儀是專門應(yīng)對(duì)上述挑戰(zhàn)而設(shè)計(jì)的。結(jié)合微流控技術(shù)、流式細(xì)胞術(shù)和液滴分配技術(shù),在<2psi的低壓下對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分選,可分別在1分鐘和6分鐘內(nèi)將細(xì)胞分選到96或384孔板中。在節(jié)省大量分選時(shí)間的同時(shí)獲得健康且有活力的細(xì)胞。

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Pala單細(xì)胞分離儀保證了較高的單細(xì)胞效率,單細(xì)胞入孔率超過90%。自動(dòng)化設(shè)計(jì)使得操作簡(jiǎn)單直觀,不需要專門的操作人員和大量的應(yīng)用培訓(xùn)。小巧輕便的設(shè)計(jì)允許其可以在超凈臺(tái)內(nèi)完成操作,一次性細(xì)胞芯片避免了樣本間的交叉污染。

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