茶多酚（TP）檢測(cè)試劑盒（福林酚微板法）

產(chǎn)品貨號(hào)：BA1572

產(chǎn)品規(guī)格：100T

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

茶多酚(Tea Polyphenols，TP)是茶葉中多酚類物質(zhì)的總稱，包括黃烷醇類、花色苷類、黃酮類、黃酮醇類和酚酸類等，是一類兒茶素為主體的黃酮化合物，兒茶素占60~80%，具有C6-C3-C6碳骨架結(jié)構(gòu)，是一種重要的天然抗氧化物質(zhì)，能夠清除自由基。類物質(zhì)茶多酚又稱茶鞣或茶單寧，是形成茶葉色香味的主要成份之一，也是茶葉中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物質(zhì)具解毒和抗輻射作用，能有效地阻止放射性物質(zhì)侵入骨髓，并可使鍶90和鈷60迅速排出體外。

尚寶茶多酚(TP)檢測(cè)試劑盒(福林酚微板法)參考國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 8313而來，其檢測(cè)原理是利用福林酚氧化茶多酚中的酚羥基-OH，使其顯藍(lán)色，用分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀測(cè)定765nm處吸光度，在一定范圍內(nèi)吸光度與顏色深淺的變化成正比，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，進(jìn)而計(jì)算出茶多酚的含量。該試劑盒主要用于測(cè)定植物組織樣品中茶多酚含量，尤其適用于茶葉。本產(chǎn)品僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成

自備材料：

1. 茶葉、綠茶等待測(cè)樣本

2. 蒸餾水、甲醇

3. 研缽、200目細(xì)胞篩

4. 水浴鍋或電爐

5. 離心機(jī)、離心管或試管

6. 96孔板、酶標(biāo)儀

操作步驟 (僅供參考) ：

1. 準(zhǔn)備樣品：

①固體樣品：稱取1g植物樣品，充分研磨成粉末，稱取0.2g加入10ml離心管中，再向其中加入在70℃水浴中預(yù)熱的70%甲醇水溶液5ml，蓋緊并使樣品濕潤(rùn)，立即放入70℃水浴中浸提10min（每隔5min晃動(dòng)一次），浸提后冷卻至室溫，3500r/min離心10min，轉(zhuǎn)移上清液至10ml容量瓶。向樣品殘?jiān)偌尤?/span>5ml 70%甲醇水溶液浸提一次，重復(fù)上述操作。合并上清液并定容至10ml，搖勻，即為茶多酚提取液。4℃避光保存，用于茶多酚的檢測(cè)。

②綠茶、血漿、血清和尿液等液體樣品：綠茶樣品可直接用本試劑盒測(cè)定。血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可直接用本試劑盒測(cè)定。

2. 配制系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)：用蒸餾水和茶多酚標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml)，按下表進(jìn)行操作，依次稀釋。

3. 配制福林酚工作液：按照福林酚試劑：蒸餾水=1:9的比例，現(xiàn)配現(xiàn)用，不宜長(zhǎng)期保存。

4. TP加樣：取96孔板，按照下表設(shè)置空白孔、對(duì)照孔、測(cè)定孔，溶液應(yīng)按照順序依次加入，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的TP濃度過高，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，樣品的檢測(cè)最好能設(shè)置2平行孔，求平均值。

5. TP測(cè)定：以空白孔調(diào)零，酶標(biāo)儀測(cè)定765nm處各標(biāo)準(zhǔn)孔、測(cè)定孔的吸光度。

計(jì)算：

以系列茶多酚標(biāo)準(zhǔn)濃度(1~6號(hào))(2、5、10、30、50、80μg/ml)為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，求得回歸方程。以測(cè)定管吸光度代入回歸方程求得提取液中TP含量。

固體樣品TP含量(μg/g)= (C×V_T×N)/W

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

V_T =提取液的總體積(ml) =10ml

W=固體樣品的質(zhì)量(g) =0.2g

N=提取液的稀釋倍數(shù)

液體樣本TP含量(μg/ml)= C×N

式中：C=根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求得提取液中茶多酚含量(μg/ml)

N=提取液的稀釋倍數(shù)

注意事項(xiàng) ：

1. 茶多酚提取液宜4℃避光保存，且保存時(shí)間在24h以內(nèi)。

2. 福林酚有一定的腐蝕性，請(qǐng)小心操作。

3. 樣品中茶多酚濃度過高，顏色反應(yīng)將特別深，超出儀器的檢測(cè)范圍，應(yīng)用蒸餾水適當(dāng)稀釋重新檢測(cè)。

4. 該試劑盒測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，肉眼可見，濃度小于10μg/ml時(shí)，呈淺藍(lán)色，30~50μg/ml時(shí)，呈藍(lán)色，大于80μg/ml時(shí)，呈深藍(lán)色。

附錄： 參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：尚寶測(cè)定茶多酚標(biāo)準(zhǔn)在5、10、30、50、80、100μg/ml時(shí)的吸光度，據(jù)此作出其參考標(biāo)準(zhǔn)曲線如下：

注意：由于檢測(cè)儀器和操作手法等條件的不同，參考值范圍會(huì)有波動(dòng)，該值僅供參考。

有效期：6個(gè)月有效。4℃運(yùn)輸，4℃保存。