改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)的原理及實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象
一、用途:
用于空腸彎曲桿菌的分離培養(yǎng)(GB4789.9-2014,GB4789.28-2013,ISO標(biāo)準(zhǔn))
二、實(shí)驗(yàn)原理:
蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì);氯化鈉提供均衡的滲透壓;無(wú)菌凍融脫纖維羊血提供額外的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);鐵、焦亞硫酸鈉和丙酮酸鈉有利于空腸彎曲菌的生長(zhǎng);TMP、多粘菌素B和萬(wàn)古霉素可抑制樣本中非彎曲菌的生長(zhǎng),從而便于分離空腸彎曲菌;瓊脂是凝固劑。
三、培養(yǎng)基配方(g/L)
FBP溶液:丙酮酸鈉、焦亞硫酸鈉、鐵各0.25g溶解于100mL純化水中,用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾除菌。
抗生素溶液:稱取頭孢哌酮0.032g,兩性霉素B0.01g,利福平0.01g,溶解于5mL 50%無(wú)菌乙醇溶液中。
配制方法:稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基4.25g,加熱攪拌溶解于100ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50-55℃左右時(shí),加入1ml過(guò)濾除菌的FBP濃原液、一支改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)添加劑(萬(wàn)古霉素mg,TMP0.5mg,多粘菌素B 250 IU)1mL和無(wú)菌凍融脫纖維羊血5ml,混勻,傾入無(wú)菌平皿。
四、試驗(yàn)方法:
1、制備質(zhì)控菌液。
2、將質(zhì)控菌液劃線接種于平板。
3、42±1℃微需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
五、結(jié)果觀察與解釋
接種以下質(zhì)控菌株,42±1℃微需氧培養(yǎng)24-48小時(shí):
圖1-1 改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ)質(zhì)控結(jié)果
a:空腸彎曲菌,b:大腸埃希氏菌,c:jin黃色葡萄球菌
六、注意事項(xiàng)
本培養(yǎng)基僅為細(xì)菌鑒定的一部分,需做其他補(bǔ)充試驗(yàn)。
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