EGF主要來源于頒下腺。成年人許多組織中也表達EGF。人成纖維細胞、唾液腺癌細胞等也可產(chǎn)生EGF。EGF的作用沒有種屬特異性,人和小鼠的EGF對人成纖維細胞的作用相同。
1.Swiss 3T3細胞增殖法
(1)用含5%FCS的DMEM培養(yǎng)液將Swiss 3T3細胞調(diào)整成1×104/mL,接種于60mm的培養(yǎng)皿中(5mL),置37C 5%C02溫箱中培養(yǎng)4~5d,待細胞匯合后,更換上述培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)2~3d,此時細胞數(shù)不再增多。
(2)分別加入200ral系列稀釋的待測樣品或標準品,陰性對照加培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)4d。
(3)采用3H-TdR摻人法或比色法測定細胞增殖反應。根據(jù)標準曲線計算待測樣品中EGF的含量(活性),或用誘導50%zui大細胞增殖的zui高稀釋度表達EGF的含量。
2.BALB/c 3T3細胞增殖法
(1)用含5%FCS的DMEM培養(yǎng)液將Swiss 3T3細胞調(diào)整成2×104/mL,接種于60mm的培養(yǎng)皿中(5mI),置37C 5%C02溫箱中培養(yǎng)5ho更換同樣培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)24h。
(2)向培養(yǎng)物中加入100~L系列稀釋的待測樣品或標準品,陰性對照培養(yǎng)皿加培養(yǎng)液,培養(yǎng)16h后,同上法測定和計算EGF的含量(活性)。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。