原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的*1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。原代細胞不僅廣泛應(yīng)用于分子、細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究,如蛋白質(zhì)組學(xué)、基因組學(xué)、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學(xué)研究等,還可應(yīng)用于生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究等。
細胞培養(yǎng)是一種操作縶瑣而又要求嚴(yán)謹?shù)膶嶒灱夹g(shù)。要使細胞能在休外長期生長,必須滿足兩個基本要求:一是供給細胞存活所必須的條件,如適量的水、無機鹽、氨基酸、維生素、葡萄糖及其有關(guān)的生長因子、氛氣、適宜的溫度,注意外環(huán)境酸堿度與滲透壓的調(diào)節(jié)。二是嚴(yán)格控制無菌條件。
原代細胞的培養(yǎng)是指直接從機體取下細胞、組織和器官后立即進行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì),如果是正常細胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實際上,通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
常用的原代細胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進行培養(yǎng)。
分散細胞培養(yǎng)大致步驟為:將動物組織從機體中取出離散成單個細胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
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