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DsRed 2橙色熒光蛋白(應用于啟動子活性監(jiān)測)

來源:西安昊然生物科技有限公司   2023年09月28日 09:05  

DsRed 2橙色熒光蛋白(應用于啟動子活性監(jiān)測)

啟動子能特異性識別與RNA聚合酶結(jié)合,使之與模板DNA準確地相結(jié)合并具有轉(zhuǎn)錄起始的特異性;轉(zhuǎn)錄因子(TFs)調(diào)節(jié)基因表達,保證目的基因以特定的強度在特定的時間與空間表達的蛋白質(zhì)分子。

熒光素酶是自然中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶,其最有代表性的就算螢火蟲熒光素酶(firefly Luciferase)和海腎熒光素酶( Renilla Luciferase )。在熒光素酶的催化下,熒光素底物發(fā)生氧化反應,從而產(chǎn)生熒光。通常其中一個熒光素酶基因作為報告基因,用于指示不同處理條件下基因的表達情況。而另一個作為內(nèi)參對照,即表達量基本恒定,用于減少內(nèi)在變化因素對于實驗準確性的影響,比如細胞數(shù)目及活力的差異,細胞轉(zhuǎn)染及裂解效率。

結(jié)合雙熒光素酶報告系統(tǒng),將啟動子DNA序列插入到報告基因載體(常用載體為pGL3-Basic Vector,將待檢測的啟動子序列構(gòu)建在報告基因上游),若該DNA片段具有啟動子活性,則可以測到相應的雙熒光素酶熒光值。 

GFP“進化”的同時,研究人員開始修飾原始DsRed,以克服它的結(jié)構(gòu)缺陷。第二代DsRed,即DsRed2,經(jīng)過突變改造后,熒光蛋白的寡聚物形成趨勢減弱,蛋白成熟速度加快,并減少了發(fā)射綠光的中間載物臺。之后進一步誘變將產(chǎn)生紅色熒光蛋白,而這種熒光蛋白拋棄了四聚體狀態(tài),但會以犧牲部分量子產(chǎn)率(DsRed2的25%)為代價。Tsien 等人研究出了單體紅色熒光蛋白,這種熒光蛋白被稱為 mRFP1。

綠色2.png

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以上資料來自小編MSQ,2023.09.28

以上文中提到的產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體及其他用途。


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