小鼠葉酸受體elisa檢測試劑盒常見組成部分:
1)小鼠葉酸受體elisa檢測試劑盒圖片酶和底物:在ELISA中zui常用的酶為HRP和ALP。
2)抗體:在ELISA中應用的抗體可分為多克隆抗體(多抗)和單克隆抗體(單抗)。
3)抗原:在ELISA中應用的抗原要求有較高的特異性、親和力和純度。主要有三類,即自然抗原、人工合成抗原和基因重組抗原。
4 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒包被:將免疫活性物質(抗原或抗體)結合于固相載體上的過程稱為包被。常用的材料有聚苯乙烯、硝酸纖維薄膜等;常用的方法有吸附法、化學交聯(lián)法及親和素-生物素間接包被法
5)固相載體:固相載體是ELISA中用以分離結合標記物和游離標記物的主要手段,應與各種免疫活性物質有良好的結合性能并且不改變其免疫活性。常用的固相載體有聚苯乙烯塑料和硝酸纖維素膜。
試劑配制
1、 標準品
(1) 從試劑盒中取出一支標準品,于6000-10000rpm 離心30 秒。用1ml 樣本稀釋液溶解,并用吸頭對準凍存管底部反復吸打5 次以助溶解,充分混勻得到標準品S7,放置備用。
(2) 取7 個1.5 ml 離心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl 樣本稀釋液。吸取250μl 標準品S7 到*個離心管中(S6),輕輕吹打混勻。從S6 中吸取250μl 到第二個EP 管中(S5),輕輕吹打混勻。以此類推進行標準品的倍比稀釋。S0 為樣本稀釋液。
2、 洗液工作液濃洗滌液按1:25倍用去離子水進行稀釋。例如用量筒量取240ml去離子水,倒入燒杯或其他潔凈容器中,再量取10ml濃洗滌液,均勻加入,攪拌混勻,在臨用前配妥。濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3、 生物素標記抗體工作液生物素標記抗體液按1:100倍用生物素標記抗體稀釋液進行稀釋。如10μl生物素標記抗體加990μl生物素標記抗體稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內配妥。
4、 辣根過氧化物酶標記親和素工作液辣根過氧化物酶標記親和素按1:100倍用辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液進行稀釋。如10μl辣根過氧化物酶標記親和素加990μl辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液,輕輕混勻,在臨用10分鐘內配妥。
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