冰凍切片的制作步驟以及每個步驟的要求和作用？

來源：上海鹿森生物工程有限公司 2023年07月24日 15:18

冰凍切片是一種在低溫條件下使組織快速冷卻到一定硬度，然后進行切片的方法。因其制作過程較石蠟切片快捷、簡便，而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷。

制備步驟:

將組織在恒溫冷凍機里面切片。冷凍腔內(nèi)的溫度一般設(shè)置為-18℃至-25℃，根據(jù)不同組織調(diào)節(jié)不同腔溫，平時應(yīng)將冷凍頭放置在冷凍臺上。冷凍切片機應(yīng)長期處在冷凍恒溫狀態(tài)。

1、當冰凍組織提取好之后，在冷凍頭上放少量的OCT或羧田基纖維素(可用普通膠水代替)，放上組織，速凍。

2、待組織凍結(jié)后，將冷凍頭裝刀切片機上。

3、粗切，修出切面細切幾張，用毛筆刷去刀上組織片。

4、放下抗卷板，開始切片，切片速度一般為5-6微米，切出的片子用載玻片貼附后立即放入甲醇冰醋酸液(97ml甲醇+3ml冰醋酸)中固定，固定時間為10-20秒。

作用:

OCT冰凍切片包埋劑是由聚乙二醇和金屬硬脂酸鹽等化學品混合而成的。其中，聚乙二醇是一種聚合物，主要作用是增加包埋劑的黏度，以便于固定組織樣本;金屬硬脂酸鹽則可以幫助固定細胞膜和細胞外基質(zhì)，防止組織樣本在切片過程中失去原有的形態(tài)和結(jié)構(gòu)。

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