FITC-COOH（Fluorescein-Carboxylic Acid）可以通過(guò)與氨基化合物的共價(jià)連接來(lái)實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記。以下是一種常見(jiàn)的方法：

1. 準(zhǔn)備FITC-COOH溶液：將FITC-COOH溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，如二甲基亞砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF）。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，調(diào)整FITC-COOH的濃度。

2. 準(zhǔn)備氨基化合物溶液：將待偶聯(lián)的氨基化合物溶解在緩沖溶液中，以確保適當(dāng)?shù)?/span>pH條件和反應(yīng)環(huán)境。調(diào)整氨基化合物的濃度。

3. 活化FITC-COOH：向FITC-COOH溶液中加入活化試劑，常用的活化試劑為N,N'-環(huán)己基碳二亞胺（EDC）和N-羥基琥珀酰亞胺（NHS）。這些活化試劑將激活FITC-COOH中的羧酸官能團(tuán)，使其具有更高的反應(yīng)活性。

4. 反應(yīng)：將活化的FITC-COOH溶液與氨基化合物溶液混合，并在適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件下進(jìn)行反應(yīng)。通常情況下，反應(yīng)在室溫下進(jìn)行一段時(shí)間，如1-2小時(shí)。反應(yīng)時(shí)間可以根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和需要進(jìn)行優(yōu)化。

5. 反應(yīng)停止：反應(yīng)完成后，可添加一些反應(yīng)停止劑，如氨基醇（如甲醇或乙醇），來(lái)中和剩余的活化試劑。

6. 純化：為了去除未反應(yīng)的FITC-COOH和其他雜質(zhì)，需要對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行純化。常用的純化方法包括凝膠過(guò)濾、柱層析或溶劑萃取等。選擇合適的純化方法，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和目標(biāo)分子的性質(zhì)進(jìn)行優(yōu)化。

需要注意的是，在進(jìn)行FITC-COOH與氨基化合物的共價(jià)連接反應(yīng)時(shí)，應(yīng)根據(jù)目標(biāo)分子的性質(zhì)和實(shí)驗(yàn)要求選擇適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)條件和活化試劑。

CY7-Dextran MW:5K

Mal-PEG2K-cyclo(RGDfk）

cy5.5-PEG2000-SH

CY7.5-Dextran MW:10K

PCL2K-PEG2K-CY7

BSA-CY3(低偶聯(lián)率）

BSA-CY3(高偶聯(lián)率）

Cy5 NHS

CY5單體

sulfo cy7 NH2

Sulfo-Cy5 NHS ester

sulfo Cy3.5 COOH

Cy3 alkyne

胱氨酸（cystine）-FITC

Cyclodextrin-PEG600-NH2

Sulfo CY5 COOH

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