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磷酸緩沖鹽的配置方法及作用

來源:浙江聯(lián)碩生物科技有限公司   2023年06月20日 15:54  

PBS緩沖液,是生物化學(xué)研究中使用最為廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二級(jí)解離,緩沖的pH值范圍很廣,而NaCl和KCl主要作用為增加鹽離子濃度。如有需要PBS還可以補(bǔ)加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二價(jià)陽離子。

配制方法
稱取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液至7.4,最后加蒸餾水定容至1L即可得0.01M PBS緩沖液。

作用
PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡(jiǎn)稱,不僅偽狂犬病毒要用它稀釋,一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。
原因就是它具有鹽平衡、可調(diào)整的適宜pH緩沖作用,蒸餾水不具有鹽平衡作用,可以破壞生物蛋白的結(jié)構(gòu)及生物特性;生理鹽水不具有調(diào)整pH的作用,對(duì)完整的、具有活性的物質(zhì)不能保證其在最適條件下參與生物反應(yīng),所以使用PBS是S選。
PBS也不是全能的,有的生物活性物質(zhì)需要的條件比PBS還要高,就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分,維持最佳的條件保證生物活性物質(zhì)保持其最完整的特性。

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