上??撇┤鹕锟萍加邢薰靖嬷?、血漿、尿液、唾液和細胞的收集和處理方法:
1. 血清:用無菌管收集,室溫血液天然凝聚10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應再次離心。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求挑選EDTA、檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應再次離心。
4. 唾液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應再次離心。
培育的細胞
1. 動物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度到達100萬/ml左右。經(jīng)過重復凍融(假如重復凍融,破碎效果欠好,就選用超聲波破碎),以使細胞損壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應再次離心。
2. 植物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度到達100萬/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設(shè)置破碎2s,冷卻30s的方法,充分破碎細胞,以使細胞損壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有堆積構(gòu)成,應再次離心。
組織的細胞
1. 切割標本后,稱取1g組織,參加9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手藝或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗刷堆積的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
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