凍存細胞時,為什么需要程序降溫儀?
若常溫樣本直接向液氮低溫環(huán)境轉(zhuǎn)移,溫差大,細胞脫水快,易形成冰晶,對細胞膜、細胞器造成嚴重損傷。而程序降溫儀通過對降溫速率的控制,能有效減少細胞損傷,提高復蘇率。
程序降溫時,關鍵看哪幾點?
樣本在相變期內(nèi)的溫度控制很重要在被凍樣本由液態(tài)向固態(tài)變化的相變期內(nèi),會釋放一定的熱量。在這一期間,如果精準控制好溫度,克服樣本溫度的回升,將會大大提高樣本成活率。
批次實驗時整個過程控制要穩(wěn)定程序降溫必須達到過程管控,統(tǒng)一化、規(guī)范化、標準化,這樣才能降低不同批次之間的冷凍差異。
液氮供應量必須要充足完成一次冷凍所需的液氮量取決于樣本量、冷凍時間、環(huán)境溫度等因素,因此實時查看相關參數(shù)十分重要。
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