溫度升高的趨勢是保留時間提前,一般柱溫增加1℃,保留值通常減小1~2%。保留值改變也可引起分離度變化,理論上說,溫度提高有利于提高柱效,增加分離度,但由于不同物質(zhì)對溫度的敏感程度不同,這也不是絕對的。用溫度優(yōu)化液相色譜分析方法的優(yōu)點是使用方便,不需要更換色譜柱和流動相,是改變峰間距和改善分離的有效參數(shù)。
同時升高柱溫,會改變流動相的粘度(一般表現(xiàn)為柱壓降低)和分析物的溶解性,進而影響某些物質(zhì)的保留特性和選擇性;而溫度的不平衡會導(dǎo)致峰扭曲變形。因此柱溫在液相色譜分離過程中扮演了一個重要的角色,如果想得到穩(wěn)定可靠的分離結(jié)果,色譜柱的溫度變化是不可忽視的。對于液相色譜來說,柱溫升高可加快分離過程,但因樣品保留時間不穩(wěn)將增加檢測工作的麻煩,分辨率也可能下降;相反,當(dāng)柱溫低時,分辨率提高,但分離過程時間會加長,因為在溫度低的情況下,流動相黏度增加會延長檢測時間,增加泵的磨損,同時,溶解度相對下降會出現(xiàn)緩沖鹽結(jié)晶而堵塞泵、進樣閥、管道、色譜柱的現(xiàn)象,雜質(zhì)吸附在填料上而難于洗脫,從而影響色譜柱的使用壽命。
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