原代細(xì)胞培養(yǎng):原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細(xì)胞進(jìn)行的**培養(yǎng),也叫*代培養(yǎng)。將動物機(jī)體的各種組織從機(jī)體中取出,經(jīng)各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機(jī)械方法處理,分散成單細(xì)胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。
動物組織經(jīng)胰蛋白酶等消化、分散,獲得單個細(xì)胞,再生長于培養(yǎng)皿中。大多數(shù)組織可以制備原代細(xì)胞,但生長的快慢及難易程度不一。甲狀腺細(xì)胞生長較慢,只用于某些**的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養(yǎng)。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)
原代細(xì)胞的培養(yǎng)是指直接從機(jī)體取下細(xì)胞、組織和器官后立即進(jìn)行培養(yǎng)。因此,較為嚴(yán)格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng),此時的細(xì)胞保持原有細(xì)胞的基本性質(zhì),如果是正常細(xì)胞,仍然保留二倍體數(shù)。但實(shí)際上,通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。
常用的原代細(xì)胞的培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細(xì)胞培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)是將剪碎的組織塊直接移植在培養(yǎng)瓶壁上,加入培養(yǎng)基后進(jìn)行培養(yǎng)。
分散細(xì)胞培養(yǎng)大致步驟為:
將動物組織從機(jī)體中取出離散成單個細(xì)胞(常用胰蛋白酶),置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細(xì)胞得以生存、生長和繁殖(注意整個過程無菌)。
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