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多巴胺(DA)ELISA試劑盒運用雙抗體夾心ELISA法定量測定其他血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解液、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體中多巴胺(DA)ELISA試劑盒含量。將多巴胺(DA)抗體包被于孔微孔板中，制成固相載體，向微孔中分別加入標準品或標本，其中的多巴胺(DA)與連接于固相載體上的抗體結(jié)合，然后加入生物素化的多巴胺(DA)抗體，將未結(jié)合的生物素化抗體洗凈后，加入HRP標記的親和素，再次洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺(DA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值，計算樣品濃度。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）已知待測物質(zhì)濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將待測物質(zhì)和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用，產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。
多巴胺(DA)ELISA試劑盒使用注意事項：
1、從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。
3、嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
4、為避免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和封板膜。
5、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
6、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
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