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這五步幫你了解固相萃取的操作流程

來源:上海泰特睿杰信息科技有限公司   2023年01月05日 14:31  
  固相萃取作為樣品前處理技術(shù),在實驗室中得到了越來越廣泛的應用。它利用分析物在不同介質(zhì)中被吸附的能力差將標的物提純,有效的將標的物于干擾組分分離,大大增強對分析物特別是痕量分析物的檢出能力,提高了被測樣品的回收率。
  固相萃取的基本程序一般可分為以下五個步驟,但在實際應用中可根據(jù)分析手段對樣品的要求對這五個步驟進行增加或減少。
  1.固相萃取柱的預處理活化:
  用適當?shù)娜芤簩滔噍腿≈M行預處理活化,可以展開碳氫鏈,增加和目標分析物作用的表面積,可以除去柱上吸附的對分析有影響的雜質(zhì),保證良好的萃取再現(xiàn)性,同時注意在上樣前預處理好的固相柱必須保持濕潤。
  2. 固相萃取柱的上樣:
  將樣品加于固相萃取柱中,用正壓或負壓使樣品通過柱子,控制好樣品的流速,對于生物樣品,一般控制在1.5 ml/min。對于以離子交換為作用機理的萃取,樣品通過固相萃取柱的速度應該適當?shù)慕档?,以保證分析物有足夠的時間與SPE柱填料的離子交換功能團發(fā)生充分的作用。
  3.固相萃取柱的淋洗:
  用適當?shù)那逑慈軇┻x擇性地洗掉附著力弱的雜質(zhì)而保留目標分析物于固相萃取柱上。清洗溶劑的選擇取決于最后的分析手段。
  4. 固相萃取柱的干燥:
  如最后的清洗溶劑為緩沖溶液或水溶性有機溶劑,而分析手段為反相HPLC,固相柱上的殘留水對分析影響不大。但是,當洗脫劑為非水溶性有機溶劑或分析手段又為GC或GC-MS時,固相柱的干燥就顯得特別重要。
  5.目標分析物的洗脫:
  選擇洗脫溶劑時必須考慮有足夠強度的洗脫劑,要以最小用量的洗脫劑將盡可能多的目標分析物洗脫下來;同時還要兼顧洗脫劑必須有足夠的選擇性,選擇只將目標分析物洗脫,而吸附力強的雜質(zhì)保留在柱上。

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